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葡萄科药用植物三叶崖爬藤的亲缘地理学和分子鉴定研究

摘要第7-10页
ABSTRACT第10-13页
第一章 前言第18-50页
    1.1 亲缘地理学第18-33页
        1.1.1 亲缘地理学简介第18页
        1.1.2 亲缘地理学相关理论第18-22页
        1.1.3 亲缘地理学研究方法第22-27页
        1.1.4 第二代测序技术及其在亲缘地理学研究中的应用第27-33页
    1.2 中国亚热带常绿阔叶林概述和相关研究进展第33-37页
        1.2.1 中国亚热带常绿阔叶林的分布和气候特征第33页
        1.2.2 中国亚热带常绿阔叶林的起源和发展第33-34页
        1.2.3 中国亚热带常绿阔叶林应对第四纪气候变化的两种假说第34-37页
    1.3 海南岛的形成历史及相关生物地理学研究进展第37-39页
        1.3.1 海南岛的起源和形成历史第37-38页
        1.3.2 海南岛和邻近大陆间断分布类群的生物地理学研究进展第38-39页
    1.4 中药鉴定技术概况与研究进展第39-42页
    1.5 三叶崖爬藤概况和相关研究现状第42-46页
        1.5.1 物种概况第42页
        1.5.2 化学成分和药理活性研究第42-44页
        1.5.3 种质鉴定和资源评价研究第44-45页
        1.5.4 群体遗传学研究第45页
        1.5.5 崖爬藤属分类和分子系统学研究第45-46页
    1.6 存在的问题第46-47页
    1.7 本研究的内容和目的第47-50页
        1.7.1 研究内容第47-48页
        1.7.2 研究目的和意义第48-50页
第二章 野生资源调查及样品收集第50-65页
    2.1 三叶崖爬藤的野外调查和取样第50-57页
        2.1.1 标本和文献查阅第50-51页
        2.1.2 样品采集方法第51-57页
    2.2 野生三叶崖爬藤资源调查总结第57-65页
        2.2.1 资源概况第57-60页
        2.2.2 种内形态变异第60-65页
第三章 基于叶绿体序列的亲缘地理学研究第65-96页
    3.1 材料第65-66页
    3.2 方法第66-77页
        3.2.1 基因组总DNA的提取第66-67页
        3.2.2 叶绿体片段筛选、扩增和测序第67-73页
        3.2.3 群体遗传与谱系地理结构分析第73-74页
        3.2.4 单倍型系统发育关系和分歧时间估算第74-75页
        3.2.5 祖先分布区重建第75-77页
    3.3 结果第77-92页
        3.3.1 群体遗传多样性第77页
        3.3.2 单倍型谱系关系第77-82页
        3.3.3 群体遗传结构分析第82-83页
        3.3.4 种内分歧时间估算第83-92页
    3.4 讨论第92-96页
        3.4.1 遗传多样性和遗传结构第92-93页
        3.4.2 种内谱系分化第93-94页
        3.4.3 群体动态历史第94-96页
第四章 基于核微卫星标记的群体遗传学分析第96-124页
    4.1 三叶崖爬藤微卫星引物的开发第97-109页
        4.1.1 材料第97页
        4.1.2 方法第97-102页
            4.1.2.1 基因组DNA提取第97页
            4.1.2.2 微卫星标记的分离第97-100页
            4.1.2.3 引物设计第100-101页
            4.1.2.4 引物退火温度优化第101-102页
            4.1.2.5 引物多态性检测第102页
            4.1.2.6 数据分析第102页
        4.1.3 结果第102-105页
            4.1.3.1 基因组总DNA酶切结果第102-103页
            4.1.3.2 微卫星位点PCR富集第103页
            4.1.3.3 阳性克隆筛选第103-104页
            4.1.3.4 微卫星引物设计和扩增效率检测第104-105页
            4.1.3.5 微卫星引物多态性检测第105页
        4.1.4 结论第105-109页
    4.2 基于微卫星标记的三叶崖爬藤群体遗传多样性和遗传结构分析第109-124页
        4.2.1 材料第109页
        4.2.2 方法第109-113页
            4.2.2.1 基因组总DNA的提取第109页
            4.2.2.2 微卫星位点扩增和数据判读第109页
            4.2.2.3 微卫星数据分析第109-111页
            4.2.2.4 生态位模型重建现在和LGM时期的物种潜在分布区第111-113页
        4.2.3 结果第113-122页
            4.2.3.1 遗传多样性和遗传结构第113-119页
            4.2.3.2 地区间基因流第119页
            4.2.3.3 现在和末次盛冰期的生态位模型第119-122页
        4.2.4 讨论第122-124页
            4.2.4.1 三叶崖爬藤群体在末次盛冰期原地居留在多个避难所第122-123页
            4.2.4.2 海南岛和邻近大陆群体间的二次接触第123-124页
第五章 比较转录组分析和单拷贝核基因开发第124-156页
    5.1 材料第125页
    5.2 方法第125-133页
        5.2.1 总RNA提取第125-126页
        5.2.2 Illumina转录组测序和序列拼接第126-127页
        5.2.3 基因功能注释和CDS预测第127页
        5.2.4 直系同源基因的鉴定和碱基替换率的估算第127-128页
        5.2.5 EST-SSR分析第128页
        5.2.6 单拷贝核基因的开发和验证第128-133页
    5.3 结果第133-153页
        5.3.1 转录组测序质量和组装结果第133页
        5.3.2 Unigene功能注释第133-136页
        5.3.3 谱系间直系同源基因预测和碱基替换速率估算第136-139页
        5.3.4 EST-SSR位点信息分析第139-143页
        5.3.5 单拷贝核基因的鉴定和验证第143-149页
        5.3.6 核倍型谱系关系和IMA分析第149-153页
    5.4 讨论第153-156页
第六章 基于SCAR标记的三叶崖爬藤分子鉴定研究第156-169页
    6.1 材料第157页
    6.2 方法第157-162页
        6.2.1 基因组总DNA提取第157页
        6.2.2 ISSR引物筛选及扩增第157-158页
        6.2.3 ISSR特异片段的回收、克隆和测序第158页
        6.2.4 引物设计与SCAR-PCR检测第158-162页
    6.3 结果第162-167页
        6.3.1 ISSR特异性条带的发现第162-164页
        6.3.2 SCAR分子标记的转化第164-165页
        6.3.3 SCAR分子标记的检测第165-167页
    6.4 讨论第167-169页
        6.4.1 三叶崖爬藤SCAR分子标记的扩增结果第167-168页
        6.4.2 SCAR分子标记在药材鉴定中的优势第168-169页
第七章 结论和展望第169-172页
    7.1 结论第169-170页
    7.2 展望第170-172页
参考文献第172-203页
在读期间主要成果第203-204页
致谢第204-205页

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