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水稻叶片蜡质基因OsHSD1的克隆与功能分析

摘要第6-7页
abstract第7-8页
英文缩略表第12-13页
第一章 引言第13-28页
    1.1 植物蜡质代谢的研究进展第13-23页
        1.1.1 植物角质层的结构及蜡质组成第13-14页
        1.1.2 拟南芥表皮蜡质的形成过程第14-20页
        1.1.3 拟南芥表皮蜡质代谢的分子调控机制第20-22页
        1.1.4 水稻蜡质代谢的研究现状第22-23页
    1.2 油体蛋白的研究进展第23-27页
        1.2.1 油体的结构及油体相关的蛋白第23-24页
        1.2.2 油体蛋白的结构与功能第24-25页
        1.2.3 油体钙蛋白的结构与功能第25-26页
        1.2.4 油体固醇蛋白HSD的研究进展第26-27页
    1.3 本研究的意义和目的第27-28页
第二章 水稻蜡质突变体Oshsd1的表型分析第28-35页
    2.1 材料与方法第28-29页
        2.1.1 材料种植第28页
        2.1.2 野生型与突变体的农艺性状比较第28页
        2.1.3 甲苯胺蓝染色第28页
        2.1.4 扫描电镜和透射电镜观察第28-29页
        2.1.5 野生型与突变体叶片的蜡质组分分析第29页
        2.1.6 野生型与突变体叶片总的可溶性脂肪酸分析第29页
        2.1.7 野生型与突变体种子的脂肪酸含量分析第29页
    2.2 结果第29-34页
        2.2.1 水稻蜡质突变体Oshsd1的表型分析第29-31页
        2.2.2 水稻蜡质突变体Oshsd1的扫描电镜和透射电镜观察第31-32页
        2.2.3 水稻蜡质突变体Oshsd1叶片的蜡质组分分析第32页
        2.2.4 水稻蜡质突变体Oshsd1叶片总的可溶性脂肪酸分析以及种子脂肪酸含量分析第32-34页
    2.3 讨论第34-35页
        2.3.1 Oshsd1是一个新类型的蜡质突变体第34页
        2.3.2 OsHSD1参与维持叶片脂肪酸稳态第34-35页
第三章 水稻叶片蜡质基因OsHSD1的图位克隆第35-42页
    3.1 材料与方法第35-38页
        3.1.1 定位群体的种植第35页
        3.1.2 隐性极端单株的鉴定第35页
        3.1.3 DNA的提取第35页
        3.1.4 In Del标记的开发与精细定位第35-36页
        3.1.5 候选基因的测序第36页
        3.1.6 转基因互补载体的构建和转化第36-37页
        3.1.7 转基因互补植株的鉴定第37-38页
    3.2 结果第38-40页
        3.2.1 Oshsd1突变体的遗传分析第38页
        3.2.2 OsHSD1基因的精细定位及候选基因的确定第38-39页
        3.2.3 OsHSD1基因的转基因互补验证第39-40页
    3.3 讨论第40-42页
        3.3.1 OsHSD1基因是一个新的蜡质代谢基因第40-42页
第四章 OsHSD1的功能分析第42-58页
    4.1 材料与方法第42-48页
        4.1.1 OsHSD1基因的表达分析第42-43页
        4.1.2 GUS染色第43-44页
        4.1.3 树脂切片的制作第44页
        4.1.4 OsHSD1基因在各种逆境处理下的表达分析第44页
        4.1.5 氨基酸序列的多重比对分析第44页
        4.1.6 原生质体的制备与转化第44-46页
        4.1.7 原核蛋白的表达第46页
        4.1.8 羟基类固醇脱氢酶活性的测定第46页
        4.1.9 酵母的异源表达第46-47页
        4.1.10 Cell-free降解实验第47页
        4.1.11 Western blot检测第47-48页
        4.1.12 荧光素酶活性的检测第48页
    4.2 结果第48-56页
        4.2.1 OsHSD1基因的时空表达分析第48-49页
        4.2.2 OsHSD1基因在各种逆境处理下的表达分析第49-50页
        4.2.3 OsHSD1及其同源蛋白的序列比对分析第50-51页
        4.2.4 OsHSD1的亚细胞定位第51-53页
        4.2.5 OsHSD1的羟基类固醇脱氢酶活性测定第53-54页
        4.2.6 OsHSD1蛋白的稳定性检测第54-56页
    4.3 讨论第56-58页
        4.3.1 OsHSD1表达模式和亚细胞定位第56-57页
        4.3.2 OsHSD1(35)蛋白稳定性下降第57页
        4.3.3 OsHSD1蛋白在蜡质代谢中可能的作用第57-58页
第五章 全文总结第58-60页
参考文献第60-71页
附录第71-80页
致谢第80-81页
作者简历第81-82页

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