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小分子化合物处理对川金丝猴—山羊异种核移植胚胎体外发育的影响

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
第一章 文献综述第10-24页
    1.1 川金丝猴的研究和保护第10-13页
        1.1.1 川金丝猴的生存现状第10-11页
        1.1.2 川金丝猴的相关研究第11-12页
        1.1.3 川金丝猴的保护及其意义第12-13页
    1.2 重塑体细胞多潜能性的手段第13-15页
    1.3 小分子化合物诱导多能性的研究第15-19页
        1.3.1 丙戊酮(valproate acid,VPA)第16页
        1.3.2 CHIR99021(CT99021)第16-17页
        1.3.3 Repsox第17页
        1.3.4 Tranylcypromine第17-18页
        1.3.5 毛喉素(Forskolin)第18页
        1.3.6 AM580第18-19页
        1.3.7 EPZ004777第19页
    1.4 异种核移植第19-21页
        1.4.1 异种核移植的概念第19-20页
        1.4.2 异种核移植的历史发展及应用第20-21页
        1.4.3 小分子化合物诱导对核移植胚胎发育的影响第21页
    1.5 本实验的研究内容和意义第21-24页
第二章 川金丝猴耳缘皮肤成纤维细胞的分离培养第24-32页
    2.1 动物材料第24页
    2.2 仪器设备第24页
    2.3 试剂第24-25页
    2.4 主要试剂配制第25-26页
    2.5 方法第26-28页
        2.5.1 川金丝猴成纤维细胞的分离培养第26页
        2.5.2 川金丝猴成纤维细胞的传代第26-27页
        2.5.3 川金丝猴成纤维细胞的冷冻保存第27页
        2.5.4 川金丝猴成纤维细胞的复苏第27页
        2.5.5 CCK8法检测细胞增殖能力第27-28页
    2.6 结果第28-30页
        2.6.1 川金丝猴成纤维细胞的形态学观察第28-29页
        2.6.2 川金丝猴成纤维细胞的生长动态分析第29-30页
    2.7 讨论小结第30-32页
第三章 川金丝猴耳缘皮肤成纤维细胞的小分子处理第32-42页
    3.1 实验材料第32页
    3.2 仪器设备第32页
    3.3 试剂第32-33页
    3.4 主要试剂配制第33-34页
    3.5 方法第34-38页
        3.5.1 小分子化合物处理川金丝猴耳缘皮肤成纤维细胞第34页
        3.5.2 细胞形态观察以及增殖能力检测第34页
        3.5.3 细胞基因表达的检测第34-38页
    3.6 结果第38-40页
        3.6.1 小分子化合物对细胞形态以及增殖的影响第38页
        3.6.2 内胚层相关性基因的表达第38-40页
    3.7 讨论小结第40-42页
第四章 川金丝猴-山羊体细胞异种核移植胚胎体外发育第42-54页
    4.1 实验材料第42页
    4.2 仪器设备第42-43页
    4.3 试剂第43页
    4.4 主要试剂配制第43-45页
    4.5 方法第45-47页
        4.5.1 山羊超数排卵和卵母细胞的采集第45页
        4.5.2 卵母细胞的体外成熟培养第45页
        4.5.3 川金丝猴-山羊体细胞核移植形成重构胚第45-46页
        4.5.4 重构胚的激活和培养第46页
        4.5.5 基因表达水平检测第46-47页
        4.5.6 胚胎免疫荧光化学染色第47页
    4.6 结果第47-51页
        4.6.1 卵母细胞体外成熟第47-48页
        4.6.2 重组异构胚体外发育第48-49页
        4.6.3 异种核移植早期发育基因的表达第49页
        4.6.4 免疫荧光化学染色检测基因的表达第49-51页
    4.7 讨论小结第51-54页
全文总结第54-56页
参考文献第56-66页
攻读硕士学位期间取得的科研成果第66-68页
致谢第68页

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