摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
上篇 文献综述 | 第13-34页 |
第一章 GTP合成途径研究进展概述 | 第14-26页 |
1 生物体内核苷酸代谢途径概论 | 第14-17页 |
·生物体内核苷酸的概述 | 第14-15页 |
·生物体内核苷酸的代谢 | 第15-17页 |
2 不同生物体内肌苷单磷酸乳酸脱氢酶的研究进展 | 第17-21页 |
·肌苷单磷酸乳酸脱氢酶简述 | 第17-18页 |
·病原真菌中肌苷单磷酸乳酸脱氢酶的研究进展 | 第18-19页 |
·病原细菌中肌苷单磷酸乳酸脱氢酶的研究进展 | 第19页 |
·植物中肌苷单磷酸乳酸脱氢酶的研究进展 | 第19-20页 |
·动物中肌苷单磷酸乳酸脱氢酶的研究进展 | 第20-21页 |
参考文献 | 第21-26页 |
第二章 SNARE蛋白家族的研究意义 | 第26-34页 |
1 SNARE蛋白与膜泡运输 | 第26-28页 |
·膜泡运输过程 | 第26-27页 |
·膜泡运输的定向识别机制与SNARE蛋白 | 第27-28页 |
2 SNARE蛋白家族的研究进展及意义 | 第28-31页 |
·SNARE蛋白在植物中的研究发现 | 第29页 |
·SNARE蛋白在动物中的研究发现 | 第29-30页 |
·SNARE蛋白在稻瘟菌中的研究发现 | 第30-31页 |
参考文献 | 第31-34页 |
下篇 研究内容 | 第34-94页 |
第一章 GTP从头合成途径中肌苷-5'-磷酸乳酸脱氢酶在稻瘟病菌生长发育及致病过程中的功能分析 | 第36-66页 |
1 材料与方法 | 第38-44页 |
·供试菌株和培养条件 | 第38页 |
·稻瘟病菌DNA、RNA的提取和cDNA的合成 | 第38-39页 |
·MoImd4的蛋白序列及系统发育树分析 | 第39页 |
·MoIMD4敲除突变体的获得 | 第39-40页 |
·MoIMD4敲除突变体的菌落形态观察和营养测定 | 第40-41页 |
·MoIMD4敲除突变体的附着胞形成和膨压测定 | 第41页 |
·MoIMD4敲除突变体的致病性分析 | 第41-42页 |
·MoIMD4敲除突变体的侵染观察 | 第42页 |
·外源加入IMP、XMP对MoIMD4敲除突变体的表型恢复 | 第42-44页 |
2 结果与分析 | 第44-60页 |
·MoImd4的功能域预测和系统进化树分析 | 第44-45页 |
·MoIMD4的基因敲除及互补转化子的筛选验证 | 第45-46页 |
·MoIMD4参与调控稻瘟病菌的营养生长 | 第46-47页 |
·MoIMD4参与调控稻瘟病菌的致病过程 | 第47-49页 |
·MoIMD4敲除突变体附着胞膨压降低 | 第49-50页 |
·MoIMD4参与附着胞的侵入和侵染菌丝在寄主植物中的扩展 | 第50-52页 |
·外源添加XMP恢复MoIMD4敲除突变体的营养生长缺陷 | 第52-53页 |
·外源添加XMP恢复MoIMD4敲除突变体的致病性缺陷 | 第53-55页 |
·外源添加XMP恢复MoIMD4敲除突变体的附着胞侵入和侵染菌丝在寄主植物细胞中的扩展 | 第55-56页 |
·MoIMD4功能域缺失影响菌丝生长 | 第56-57页 |
·MoIMD4功能域缺失影响致病性 | 第57-59页 |
·MoIMD4基因的亚细胞定位 | 第59-60页 |
3 讨论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
第二章 稻瘟病菌SNARE蛋白MoVam7和MoSec22蛋白质组学分析 | 第66-94页 |
1 材料与方法 | 第69-76页 |
·外泌蛋白的收集及纯化 | 第69页 |
·双向凝胶电泳 | 第69-71页 |
·凝胶银染 | 第71-72页 |
·图像分析采集及差异点蛋白的切取 | 第72页 |
·蛋白胶内酶解 | 第72-73页 |
·特征蛋白点的质谱分析和生物信息学分析 | 第73页 |
·供试菌株和培养条件 | 第73页 |
·敲除载体的构建和敲除突变体的获得 | 第73-74页 |
·敲除突变体的生长测定 | 第74页 |
·敲除突变体产孢量测定及侧拍 | 第74-75页 |
·实时定量荧光PCR(Real time PCR)检测产孢量下降的突变体中产孢相关基因的表达 | 第75页 |
·敲除突变体的孢子萌发、附着胞形成及洋葱表皮侵入率 | 第75页 |
·水稻喷雾致病性试验 | 第75-76页 |
·大麦点滴致病性试验 | 第76页 |
2 结果与分析 | 第76-89页 |
·双向电泳图谱 | 第76-77页 |
·差异表达蛋白的鉴定 | 第77-81页 |
·敲除突变体的筛选和验证 | 第81-84页 |
·敲除突变体的生长测定 | 第84-85页 |
·敲除突变体的产孢量测定 | 第85-89页 |
·敲除突变体的致病性测定 | 第89页 |
3 讨论 | 第89-92页 |
参考文献 | 第92-94页 |
附录 稻瘟病菌bZIP转录因子MoBzip5和MoBzip8的生物学功能研究 | 第94-111页 |
1 材料与方法 | 第95-98页 |
·供试菌株和培养条件 | 第95页 |
·稻瘟病菌DNA、RNA的提取和cDNA的合成 | 第95页 |
·MoBZIP5和MoBZIP8敲除载体的构建 | 第95-96页 |
·MoBZIP5和MoBZIP8敲除突变体的筛选和验证 | 第96页 |
·MoBZIP5和MoBZIP8敲除突变体的菌落形态观察和生长测定 | 第96页 |
·MoBZIP5和MoBZIP8敲除突变体的产孢量测定、侧拍及附着胞的形成 | 第96-97页 |
·突变体ΔMobzip5胞内cAMP浓度测定 | 第97页 |
·实时定量荧光PCR(Real time PCR)检测8个RGS基因在MoBZIP5敲除突变体中的表达 | 第97-98页 |
·MoBZIP5和MoBZIP8敲除突变体的致病性分析 | 第98页 |
2 结果与分析 | 第98-104页 |
·MoBZIP5和MoBZIP8敲除载体的构建以及敲除突变体的筛选和验证 | 第98-100页 |
·MoBZIP5参与稻瘟病菌的产孢过程,MoBZIP8不参与稻瘟病菌的形态建成 | 第100-101页 |
·MoBZIP5参与芽管的生长和附着胞的分化 | 第101-102页 |
·MoBZIP5调控胞内的cAMP水平 | 第102-103页 |
·MoBZIP5和MoBZIP8不参与稻瘟病菌的致病性 | 第103-104页 |
3 讨论 | 第104-106页 |
参考文献 | 第106-111页 |
全文总结及创新点 | 第111-112页 |
附表 | 第112-118页 |
博士期间发表研究论文 | 第118-120页 |
致谢 | 第120页 |