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稻瘟病菌肌苷-5-磷酸乳酸脱氢酶及SNARE蛋白MoVam7和MoSec22调控的分泌蛋白的生物学功能研究

摘要第1-11页
Abstract第11-13页
上篇 文献综述第13-34页
 第一章 GTP合成途径研究进展概述第14-26页
  1 生物体内核苷酸代谢途径概论第14-17页
   ·生物体内核苷酸的概述第14-15页
   ·生物体内核苷酸的代谢第15-17页
  2 不同生物体内肌苷单磷酸乳酸脱氢酶的研究进展第17-21页
   ·肌苷单磷酸乳酸脱氢酶简述第17-18页
   ·病原真菌中肌苷单磷酸乳酸脱氢酶的研究进展第18-19页
   ·病原细菌中肌苷单磷酸乳酸脱氢酶的研究进展第19页
   ·植物中肌苷单磷酸乳酸脱氢酶的研究进展第19-20页
   ·动物中肌苷单磷酸乳酸脱氢酶的研究进展第20-21页
  参考文献第21-26页
 第二章 SNARE蛋白家族的研究意义第26-34页
  1 SNARE蛋白与膜泡运输第26-28页
   ·膜泡运输过程第26-27页
   ·膜泡运输的定向识别机制与SNARE蛋白第27-28页
  2 SNARE蛋白家族的研究进展及意义第28-31页
   ·SNARE蛋白在植物中的研究发现第29页
   ·SNARE蛋白在动物中的研究发现第29-30页
   ·SNARE蛋白在稻瘟菌中的研究发现第30-31页
  参考文献第31-34页
下篇 研究内容第34-94页
 第一章 GTP从头合成途径中肌苷-5'-磷酸乳酸脱氢酶在稻瘟病菌生长发育及致病过程中的功能分析第36-66页
  1 材料与方法第38-44页
   ·供试菌株和培养条件第38页
   ·稻瘟病菌DNA、RNA的提取和cDNA的合成第38-39页
   ·MoImd4的蛋白序列及系统发育树分析第39页
   ·MoIMD4敲除突变体的获得第39-40页
   ·MoIMD4敲除突变体的菌落形态观察和营养测定第40-41页
   ·MoIMD4敲除突变体的附着胞形成和膨压测定第41页
   ·MoIMD4敲除突变体的致病性分析第41-42页
   ·MoIMD4敲除突变体的侵染观察第42页
   ·外源加入IMP、XMP对MoIMD4敲除突变体的表型恢复第42-44页
  2 结果与分析第44-60页
   ·MoImd4的功能域预测和系统进化树分析第44-45页
   ·MoIMD4的基因敲除及互补转化子的筛选验证第45-46页
   ·MoIMD4参与调控稻瘟病菌的营养生长第46-47页
   ·MoIMD4参与调控稻瘟病菌的致病过程第47-49页
   ·MoIMD4敲除突变体附着胞膨压降低第49-50页
   ·MoIMD4参与附着胞的侵入和侵染菌丝在寄主植物中的扩展第50-52页
   ·外源添加XMP恢复MoIMD4敲除突变体的营养生长缺陷第52-53页
   ·外源添加XMP恢复MoIMD4敲除突变体的致病性缺陷第53-55页
   ·外源添加XMP恢复MoIMD4敲除突变体的附着胞侵入和侵染菌丝在寄主植物细胞中的扩展第55-56页
   ·MoIMD4功能域缺失影响菌丝生长第56-57页
   ·MoIMD4功能域缺失影响致病性第57-59页
   ·MoIMD4基因的亚细胞定位第59-60页
  3 讨论第60-62页
  参考文献第62-66页
 第二章 稻瘟病菌SNARE蛋白MoVam7和MoSec22蛋白质组学分析第66-94页
  1 材料与方法第69-76页
   ·外泌蛋白的收集及纯化第69页
   ·双向凝胶电泳第69-71页
   ·凝胶银染第71-72页
   ·图像分析采集及差异点蛋白的切取第72页
   ·蛋白胶内酶解第72-73页
   ·特征蛋白点的质谱分析和生物信息学分析第73页
   ·供试菌株和培养条件第73页
   ·敲除载体的构建和敲除突变体的获得第73-74页
   ·敲除突变体的生长测定第74页
   ·敲除突变体产孢量测定及侧拍第74-75页
   ·实时定量荧光PCR(Real time PCR)检测产孢量下降的突变体中产孢相关基因的表达第75页
   ·敲除突变体的孢子萌发、附着胞形成及洋葱表皮侵入率第75页
   ·水稻喷雾致病性试验第75-76页
   ·大麦点滴致病性试验第76页
  2 结果与分析第76-89页
   ·双向电泳图谱第76-77页
   ·差异表达蛋白的鉴定第77-81页
   ·敲除突变体的筛选和验证第81-84页
   ·敲除突变体的生长测定第84-85页
   ·敲除突变体的产孢量测定第85-89页
   ·敲除突变体的致病性测定第89页
  3 讨论第89-92页
  参考文献第92-94页
附录 稻瘟病菌bZIP转录因子MoBzip5和MoBzip8的生物学功能研究第94-111页
 1 材料与方法第95-98页
   ·供试菌株和培养条件第95页
   ·稻瘟病菌DNA、RNA的提取和cDNA的合成第95页
   ·MoBZIP5和MoBZIP8敲除载体的构建第95-96页
   ·MoBZIP5和MoBZIP8敲除突变体的筛选和验证第96页
   ·MoBZIP5和MoBZIP8敲除突变体的菌落形态观察和生长测定第96页
   ·MoBZIP5和MoBZIP8敲除突变体的产孢量测定、侧拍及附着胞的形成第96-97页
   ·突变体ΔMobzip5胞内cAMP浓度测定第97页
   ·实时定量荧光PCR(Real time PCR)检测8个RGS基因在MoBZIP5敲除突变体中的表达第97-98页
   ·MoBZIP5和MoBZIP8敲除突变体的致病性分析第98页
 2 结果与分析第98-104页
   ·MoBZIP5和MoBZIP8敲除载体的构建以及敲除突变体的筛选和验证第98-100页
   ·MoBZIP5参与稻瘟病菌的产孢过程,MoBZIP8不参与稻瘟病菌的形态建成第100-101页
   ·MoBZIP5参与芽管的生长和附着胞的分化第101-102页
   ·MoBZIP5调控胞内的cAMP水平第102-103页
   ·MoBZIP5和MoBZIP8不参与稻瘟病菌的致病性第103-104页
 3 讨论第104-106页
 参考文献第106-111页
全文总结及创新点第111-112页
附表第112-118页
博士期间发表研究论文第118-120页
致谢第120页

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