| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-17页 |
| 本文所用主要缩写词 | 第17-18页 |
| 上篇 文献综述 | 第18-49页 |
| 第一章 植物与病原菌互作及协同进化 | 第19-39页 |
| 1 植物对病原菌分子模式(PAMP)的识别体系 | 第21-25页 |
| ·病原菌的PAMP分子 | 第21-23页 |
| ·植物对PAMP分子的识别 | 第23-24页 |
| ·LRR受体激酶 | 第23页 |
| ·EPR1：DAMP受体 | 第23-24页 |
| ·对糖类PAMP分子的识别 | 第24页 |
| ·受体蛋白复合物在植物先天免疫中的功能 | 第24-25页 |
| 2 效应分子(effector)抑制PAMP触发的寄主防卫反应方式 | 第25-27页 |
| ·效应分子通过操控激酶类靶标阻断植物免疫反应 | 第26页 |
| ·效应分子在植物免疫中的其它靶标蛋白 | 第26-27页 |
| 3 R蛋白介导的植物抗病信号通路 | 第27-35页 |
| ·抗病蛋白的分类 | 第27-28页 |
| ·R蛋白与效应分子互做模式研究 | 第28-31页 |
| ·R蛋白触发的信号通路 | 第31-32页 |
| ·抗病信号途径的复杂性 | 第32-35页 |
| ·蛋白质降解在R蛋白介导的信号传导过程中的作用 | 第33-34页 |
| ·R蛋白信号途径中的磷酸化过程 | 第34-35页 |
| 4 植物抗病基因的进化 | 第35-39页 |
| ·基因组水平上的R基因进化分析 | 第35-36页 |
| ·群体水平上抗病基因进化的分析 | 第36-39页 |
| 第二章 大豆抗大豆疫霉研究进展 | 第39-48页 |
| 1 完全抗性 | 第40-43页 |
| ·Rps抗病基因 | 第40页 |
| ·疫霉小种分化和大豆种质抗源筛选 | 第40-42页 |
| ·大豆抗病基因的分子标记 | 第42页 |
| ·大豆抗病基因的克隆、鉴定和进化 | 第42-43页 |
| 2 部分抗性 | 第43-45页 |
| ·大豆部分抗性的评价 | 第44页 |
| ·大豆部分抗性的分子标记 | 第44-45页 |
| 3 大豆对大豆疫霉抗性机制研究 | 第45-48页 |
| ·抗病信号通路的研究 | 第45-46页 |
| ·基于测序技术的基因转录水平分析 | 第46页 |
| ·大豆次级代谢物质在疫霉抗性中的功能分析 | 第46-47页 |
| ·MiRNA在疫霉抗性中的功能分析 | 第47-48页 |
| 本研究的目的和意义 | 第48-49页 |
| 下篇 研究报告 | 第49-119页 |
| 第三章 无毒基因Avr1b干扰寄主防卫反应的功能研究 | 第51-75页 |
| 1 材料与方法 | 第53-60页 |
| ·供试材料 | 第53页 |
| ·DNA提取 | 第53-54页 |
| ·大豆疫霉菌丝基因组DNA提取 | 第53-54页 |
| ·大豆发状根DNA提取 | 第54页 |
| ·大豆发状根RNA提取 | 第54-55页 |
| ·大豆发状根RNA逆转录 | 第55页 |
| ·去除基因组DNA反应 | 第55页 |
| ·反转录反应 | 第55页 |
| ·感受态细胞制备 | 第55-56页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态制备 | 第55-56页 |
| ·农杆菌K599感受态制备 | 第56页 |
| ·无毒基因克隆及重组质粒的构建 | 第56页 |
| ·大肠杆菌热激转化 | 第56-57页 |
| ·质粒提取 | 第57页 |
| ·农杆菌电击转化 | 第57页 |
| ·农杆菌介导的大豆遗传转化 | 第57-58页 |
| ·大豆子叶的获得 | 第57-58页 |
| ·农杆菌K599的培养 | 第58页 |
| ·农杆菌转化 | 第58页 |
| ·根侵染及侵染水平分析 | 第58-59页 |
| ·胼胝质沉淀观察、过氧化氢观察 | 第59页 |
| ·胼胝质沉淀观察 | 第59页 |
| ·过氧化氢观察 | 第59页 |
| ·蛋白提取和Western blot | 第59-60页 |
| ·蛋白提取 | 第59页 |
| ·Western blot | 第59-60页 |
| ·组织电导率测定 | 第60页 |
| 2 结果与分析 | 第60-70页 |
| ·pBIN-GFP-Avr1b载体的构建 | 第60-61页 |
| ·阳性转基因发状根的筛选 | 第61-63页 |
| ·异源表达Avr1b降低大豆发状根的抗性水平 | 第63-67页 |
| ·Avr1b促进大豆疫霉对转基因发状根组织的侵染 | 第63-65页 |
| ·Avr1b对疫霉侵染造成的发状根细胞死亡的影响 | 第65-67页 |
| ·Avr1b抑制大豆发状根基础防卫反应 | 第67-70页 |
| ·胼胝质沉淀观察 | 第67-68页 |
| ·过氧化氢观察 | 第68-70页 |
| ·Avr1b在互作过程中的定位 | 第70页 |
| 3 讨论 | 第70-75页 |
| 第四章 转Avr1b发状根组织全基因组水平基因表达分析 | 第75-89页 |
| 1 材料与方法 | 第77-79页 |
| ·实验材料及培养条件 | 第77页 |
| ·农杆菌介导的大豆发状根转化及荧光筛选 | 第77页 |
| ·RNA测序样品准备 | 第77-78页 |
| ·GO功能分析 | 第78页 |
| ·差异基因鉴定及同源基因比对 | 第78-79页 |
| 2 结果与分析 | 第79-86页 |
| ·大豆发状根组织DGE测序RNA样品的质量检测 | 第79-80页 |
| ·DGE表达谱数据质量评估 | 第80页 |
| ·tags标签基因注释 | 第80-83页 |
| ·差异基因表达分析 | 第83-84页 |
| ·差异基因GO功能显著性富集分析 | 第84-85页 |
| ·差异基因Pathway途径分析 | 第85-86页 |
| 3 讨论 | 第86-89页 |
| 第五章 GmSGT1在大豆与疫霉互作过程中的功能研究 | 第89-119页 |
| 1 材料和方法 | 第91-95页 |
| ·基因序列搜索和引物设计 | 第91-92页 |
| ·植物材料和培养条件 | 第92页 |
| ·pHellsGate12载体改造和载体构建 | 第92-93页 |
| ·发根农杆菌介导的大豆子叶转化 | 第93页 |
| ·烟草叶片瞬时转化 | 第93页 |
| ·大豆子叶、发状根和烟草叶片抗病性分析 | 第93页 |
| ·大豆子叶远端沉默评价 | 第93-94页 |
| ·RNA提取,RT-PCR和qRT-PCR | 第94页 |
| ·Western blotting分析 | 第94-95页 |
| 2 结果与分析 | 第95-116页 |
| ·大豆中SGT1同源基因鉴定 | 第95-96页 |
| ·GmSGT1受大豆疫霉侵染诱导表达 | 第96-98页 |
| ·载体改造和载体构建 | 第98-101页 |
| ·载体改造 | 第98-100页 |
| ·GmSGT1 RNAi载体构建 | 第100-101页 |
| ·GmSGT1-1过表达载体构建 | 第101页 |
| ·发根农杆菌介导的大豆子叶瞬时沉默 | 第101-103页 |
| ·GmSGT1参与Rps1k介导抗病反应 | 第103-106页 |
| ·GwSGTV在不同抗病基因调控的抗病反应中的功能研究 | 第106-108页 |
| ·大豆子叶中沉默GmSGT1降低大豆对大豆疫霉的部分抗性 | 第108-110页 |
| ·过表达GmSGT1-1增强大豆发状根对疫霉抗性 | 第110-114页 |
| ·过表达GmSGT1对信号通路干扰的分析 | 第114-116页 |
| ·烟草叶片瞬时表达GmSGT1增强对辣椒疫霉(P.capsici)的抗性 | 第116页 |
| 3 讨论 | 第116-119页 |
| 全文总结 | 第119-121页 |
| 本研究创新之处 | 第121-123页 |
| 参考文献 | 第123-137页 |
| 附录 | 第137-141页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第141-143页 |
| 致谢 | 第143页 |
