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拟南芥锌指蛋白基因AtSRZ5的功能研究和盐胁迫下水稻叶片蛋白质组学分析

摘要第1-13页
ABSTRACT第13-16页
第一部分 文献综述第16-46页
 第一章 脱落酸和生长素在种子萌发中的作用第16-36页
  1 脱落酸对种子萌发的抑制作用第16-19页
   ·PYR/RCAR蛋白与PP2C蛋白的互作第17-18页
   ·SnRK2蛋白在ABA信号途径中的作用第18-19页
   ·ABI蛋白在种子萌发中的作用第19页
  2 生长素在种子萌发中的作用第19-26页
   ·TIR1/AFB-auxin-AUX/IAA信号受体第20-21页
   ·生长素响应因子(ARF)第21-22页
   ·微小RNA对ARF蛋白的调控第22-25页
   ·Gretchen Hagen3蛋白第25-26页
  3 RBP蛋白参与调节基因表达第26-27页
  4 RBP蛋白参与调节植物对胁迫的抗性第27-30页
   ·富甘氨酸RBP蛋白参与调节非生物胁迫抗性第27-29页
   ·UBA1和UBA2是胁迫相关的RNA稳定因子第29-30页
  5 RBP蛋白对植物发育的调控第30-31页
  6 RBP蛋白对MIRNA功能的影响第31-33页
   ·RBP蛋白与miRNA的协同作用第32页
   ·RBP蛋白与miRNA的竞争作用第32页
   ·RBP蛋白的修饰和亚细胞定位第32-33页
   ·RBP蛋白对miRNA合成的影响第33页
  7 RBP蛋白对可变剪接的影响第33页
  8 C2C2型锌指蛋白第33-34页
  9 展望第34-36页
 第二章 植物盐胁迫响应机制第36-46页
  1 植物对盐胁迫的响应第36-37页
   ·盐胁迫的机理第36页
   ·盐离子在植物体中的运输第36-37页
   ·盐生植物和甜土植物对盐胁迫的响应第37页
  2 植物的盐胁迫抗性第37-44页
   ·离子的调节和区域化分布第38-40页
   ·盐胁迫对亲和物质合成的诱导第40-41页
   ·盐胁迫对抗氧化酶的诱导第41-43页
   ·盐胁迫对植物激素的诱导第43页
   ·盐胁迫对光合作用的影响第43-44页
   ·盐胁迫抗性的分子生物学机制第44页
  3 小结第44-46页
第二部分 研究报告第46-166页
 第三章 拟南芥锌指蛋白基因ATSRZ5的功能研究第46-118页
  1 材料和方法第46-66页
   ·植物材料第46-47页
   ·细菌菌株及质粒第47页
   ·植物材料的培养第47页
   ·胁迫处理第47-49页
   ·CTAB法提取拟南芥基因组DNA第49页
   ·总RNA的提取和cDNA第一链的合成及半定量PCR第49-51页
   ·AtSRZ5的克隆第51页
   ·大肠杆菌质粒DNA抽提第51-52页
   ·DNA片段的回收与连接第52-53页
   ·转基因载体构建第53页
   ·重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞第53页
   ·重组质粒转化农杆菌感受态细胞第53-54页
   ·农杆菌侵染拟南芥花序遗传转化第54页
   ·转基因拟南芥植株的PCR检测第54页
   ·T-DNA插入突变体的PCR检测第54-55页
   ·差异表达基因分析第55页
   ·miRNA的反转录和qRT-PCR分析第55-56页
   ·蛋白表达载体的构建和纯化第56-57页
   ·RNA结合实验第57-58页
   ·GST Pull Down体外分析蛋白互作第58-59页
   ·Pull Down结果的Western bolt验证第59-60页
   ·细胞定位实验第60-62页
   ·植物激素提取与测定第62-63页
   ·qRT-PCR分析第63-66页
  2 结果与分析第66-111页
   ·AtSRZ5的克隆与序列分析第66-69页
   ·AtSRZ5突变体和过量表达株系的验证第69-71页
   ·AtSRZ5在不同逆境处理下的表达第71-72页
   ·AtSRZ5突变体和过量表达株系的耐盐性分析第72-79页
   ·AtSRZ5突变体和过量表达株系对ABA的敏感性第79-85页
   ·差异表达基因分析第85-90页
   ·AtSRZ5突变体对生长素信号途径的影响第90-97页
   ·AtSRZ5突变体对ABA信号途径的影响第97-100页
   ·AtSRZ5突变体中激素含量测定第100-101页
   ·AtSRZ5与AGO1蛋白结合能力分析第101页
   ·AtSRZ5的RNA结合能力分析第101-107页
   ·AtSRZ5的亚细胞定位分析第107-109页
   ·AtSRZ5突变体对蓝光响应的分析第109-111页
  3 讨论第111-118页
   ·SRZ5参与了ABA对种子萌发的抑制第111页
   ·SRZ5影响了ABA信号途径中ABI3和ABI5的表达第111-112页
   ·SRZ5通过影响miRNA对ARF的转录后调控促进ABI3的表达第112-113页
   ·SRZ5与miR160和miR167A间的协同和竞争作用第113-114页
   ·SRZ5参与了ABI5 mRNA前体的剪接第114-115页
   ·研究SRZ5的意义第115页
   ·总结第115-118页
 第四章 盐胁迫下水稻叶片蛋白质组学分析第118-166页
  1 材料和方法第118-126页
   ·植物材料的盐胁迫处理第119页
   ·三氯乙酸法(TCA)提取水稻总蛋白质第119页
   ·iTRAQ定量分析第119-120页
   ·利用Mascot软件对蛋白质进行鉴定第120页
   ·蛋白质相对定量分析第120页
   ·对iTRAQ结果的GO分析第120-121页
   ·差异蛋白的GO富集分析第121页
   ·水稻总RNA提取和cDNA第一链合成第121页
   ·qRT-PCR分析第121-124页
   ·水稻植株中总抗氧化能力测定第124页
   ·水稻植株中过氧化物酶活性测定第124-125页
   ·水稻植株中谷胱甘肽S-转移酶活性测定第125页
   ·水稻植株中还原型谷胱甘肽含量测定第125页
   ·水稻植株中总ATP酶活性测定第125-126页
   ·水稻叶片中叶绿素含量测定第126页
  2 结果与分析第126-158页
   ·水稻盐胁迫前后总蛋白的质谱分析第126-128页
   ·水稻盐胁迫处理前后差异总蛋白的定量分析第128-133页
   ·对iTRAQ结果的GO富集分析第133-140页
   ·差异表达蛋白编码基因的qRT-PCR分析第140-148页
   ·盐胁迫处理后水稻中抗氧化物质的测定第148-149页
   ·盐胁迫处理后水稻中叶绿素含量的测定第149-150页
   ·盐胁迫处理后水稻中ATP酶活性的测定第150-151页
   ·盐胁迫对水稻氧化磷酸化作用的影响第151-152页
   ·盐胁迫对水稻体内抗氧化物质的影响第152-153页
   ·盐胁迫对水稻光合作用的影响第153-155页
   ·盐胁迫对水稻转录和翻译的影响第155-158页
  3 讨论第158-166页
   ·光系统Ⅰ对盐胁迫的响应第158-159页
   ·盐胁迫下抗氧化物质对光合作用的影响第159-161页
   ·盐胁迫对水稻细胞离子调节功能的影响第161-162页
   ·盐胁迫对水稻转录的影响第162-163页
   ·盐胁迫对水稻转录后调控的影响第163页
   ·盐胁迫对水稻蛋白合成的影响第163页
   ·盐胁迫对水稻蛋白降解的影响第163-166页
全文结论第166-168页
本研究创新点第168-170页
参考文献第170-186页
附录第186-194页
致谢第194页

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