摘要 | 第1-13页 |
ABSTRACT | 第13-16页 |
第一部分 文献综述 | 第16-46页 |
第一章 脱落酸和生长素在种子萌发中的作用 | 第16-36页 |
1 脱落酸对种子萌发的抑制作用 | 第16-19页 |
·PYR/RCAR蛋白与PP2C蛋白的互作 | 第17-18页 |
·SnRK2蛋白在ABA信号途径中的作用 | 第18-19页 |
·ABI蛋白在种子萌发中的作用 | 第19页 |
2 生长素在种子萌发中的作用 | 第19-26页 |
·TIR1/AFB-auxin-AUX/IAA信号受体 | 第20-21页 |
·生长素响应因子(ARF) | 第21-22页 |
·微小RNA对ARF蛋白的调控 | 第22-25页 |
·Gretchen Hagen3蛋白 | 第25-26页 |
3 RBP蛋白参与调节基因表达 | 第26-27页 |
4 RBP蛋白参与调节植物对胁迫的抗性 | 第27-30页 |
·富甘氨酸RBP蛋白参与调节非生物胁迫抗性 | 第27-29页 |
·UBA1和UBA2是胁迫相关的RNA稳定因子 | 第29-30页 |
5 RBP蛋白对植物发育的调控 | 第30-31页 |
6 RBP蛋白对MIRNA功能的影响 | 第31-33页 |
·RBP蛋白与miRNA的协同作用 | 第32页 |
·RBP蛋白与miRNA的竞争作用 | 第32页 |
·RBP蛋白的修饰和亚细胞定位 | 第32-33页 |
·RBP蛋白对miRNA合成的影响 | 第33页 |
7 RBP蛋白对可变剪接的影响 | 第33页 |
8 C2C2型锌指蛋白 | 第33-34页 |
9 展望 | 第34-36页 |
第二章 植物盐胁迫响应机制 | 第36-46页 |
1 植物对盐胁迫的响应 | 第36-37页 |
·盐胁迫的机理 | 第36页 |
·盐离子在植物体中的运输 | 第36-37页 |
·盐生植物和甜土植物对盐胁迫的响应 | 第37页 |
2 植物的盐胁迫抗性 | 第37-44页 |
·离子的调节和区域化分布 | 第38-40页 |
·盐胁迫对亲和物质合成的诱导 | 第40-41页 |
·盐胁迫对抗氧化酶的诱导 | 第41-43页 |
·盐胁迫对植物激素的诱导 | 第43页 |
·盐胁迫对光合作用的影响 | 第43-44页 |
·盐胁迫抗性的分子生物学机制 | 第44页 |
3 小结 | 第44-46页 |
第二部分 研究报告 | 第46-166页 |
第三章 拟南芥锌指蛋白基因ATSRZ5的功能研究 | 第46-118页 |
1 材料和方法 | 第46-66页 |
·植物材料 | 第46-47页 |
·细菌菌株及质粒 | 第47页 |
·植物材料的培养 | 第47页 |
·胁迫处理 | 第47-49页 |
·CTAB法提取拟南芥基因组DNA | 第49页 |
·总RNA的提取和cDNA第一链的合成及半定量PCR | 第49-51页 |
·AtSRZ5的克隆 | 第51页 |
·大肠杆菌质粒DNA抽提 | 第51-52页 |
·DNA片段的回收与连接 | 第52-53页 |
·转基因载体构建 | 第53页 |
·重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第53页 |
·重组质粒转化农杆菌感受态细胞 | 第53-54页 |
·农杆菌侵染拟南芥花序遗传转化 | 第54页 |
·转基因拟南芥植株的PCR检测 | 第54页 |
·T-DNA插入突变体的PCR检测 | 第54-55页 |
·差异表达基因分析 | 第55页 |
·miRNA的反转录和qRT-PCR分析 | 第55-56页 |
·蛋白表达载体的构建和纯化 | 第56-57页 |
·RNA结合实验 | 第57-58页 |
·GST Pull Down体外分析蛋白互作 | 第58-59页 |
·Pull Down结果的Western bolt验证 | 第59-60页 |
·细胞定位实验 | 第60-62页 |
·植物激素提取与测定 | 第62-63页 |
·qRT-PCR分析 | 第63-66页 |
2 结果与分析 | 第66-111页 |
·AtSRZ5的克隆与序列分析 | 第66-69页 |
·AtSRZ5突变体和过量表达株系的验证 | 第69-71页 |
·AtSRZ5在不同逆境处理下的表达 | 第71-72页 |
·AtSRZ5突变体和过量表达株系的耐盐性分析 | 第72-79页 |
·AtSRZ5突变体和过量表达株系对ABA的敏感性 | 第79-85页 |
·差异表达基因分析 | 第85-90页 |
·AtSRZ5突变体对生长素信号途径的影响 | 第90-97页 |
·AtSRZ5突变体对ABA信号途径的影响 | 第97-100页 |
·AtSRZ5突变体中激素含量测定 | 第100-101页 |
·AtSRZ5与AGO1蛋白结合能力分析 | 第101页 |
·AtSRZ5的RNA结合能力分析 | 第101-107页 |
·AtSRZ5的亚细胞定位分析 | 第107-109页 |
·AtSRZ5突变体对蓝光响应的分析 | 第109-111页 |
3 讨论 | 第111-118页 |
·SRZ5参与了ABA对种子萌发的抑制 | 第111页 |
·SRZ5影响了ABA信号途径中ABI3和ABI5的表达 | 第111-112页 |
·SRZ5通过影响miRNA对ARF的转录后调控促进ABI3的表达 | 第112-113页 |
·SRZ5与miR160和miR167A间的协同和竞争作用 | 第113-114页 |
·SRZ5参与了ABI5 mRNA前体的剪接 | 第114-115页 |
·研究SRZ5的意义 | 第115页 |
·总结 | 第115-118页 |
第四章 盐胁迫下水稻叶片蛋白质组学分析 | 第118-166页 |
1 材料和方法 | 第118-126页 |
·植物材料的盐胁迫处理 | 第119页 |
·三氯乙酸法(TCA)提取水稻总蛋白质 | 第119页 |
·iTRAQ定量分析 | 第119-120页 |
·利用Mascot软件对蛋白质进行鉴定 | 第120页 |
·蛋白质相对定量分析 | 第120页 |
·对iTRAQ结果的GO分析 | 第120-121页 |
·差异蛋白的GO富集分析 | 第121页 |
·水稻总RNA提取和cDNA第一链合成 | 第121页 |
·qRT-PCR分析 | 第121-124页 |
·水稻植株中总抗氧化能力测定 | 第124页 |
·水稻植株中过氧化物酶活性测定 | 第124-125页 |
·水稻植株中谷胱甘肽S-转移酶活性测定 | 第125页 |
·水稻植株中还原型谷胱甘肽含量测定 | 第125页 |
·水稻植株中总ATP酶活性测定 | 第125-126页 |
·水稻叶片中叶绿素含量测定 | 第126页 |
2 结果与分析 | 第126-158页 |
·水稻盐胁迫前后总蛋白的质谱分析 | 第126-128页 |
·水稻盐胁迫处理前后差异总蛋白的定量分析 | 第128-133页 |
·对iTRAQ结果的GO富集分析 | 第133-140页 |
·差异表达蛋白编码基因的qRT-PCR分析 | 第140-148页 |
·盐胁迫处理后水稻中抗氧化物质的测定 | 第148-149页 |
·盐胁迫处理后水稻中叶绿素含量的测定 | 第149-150页 |
·盐胁迫处理后水稻中ATP酶活性的测定 | 第150-151页 |
·盐胁迫对水稻氧化磷酸化作用的影响 | 第151-152页 |
·盐胁迫对水稻体内抗氧化物质的影响 | 第152-153页 |
·盐胁迫对水稻光合作用的影响 | 第153-155页 |
·盐胁迫对水稻转录和翻译的影响 | 第155-158页 |
3 讨论 | 第158-166页 |
·光系统Ⅰ对盐胁迫的响应 | 第158-159页 |
·盐胁迫下抗氧化物质对光合作用的影响 | 第159-161页 |
·盐胁迫对水稻细胞离子调节功能的影响 | 第161-162页 |
·盐胁迫对水稻转录的影响 | 第162-163页 |
·盐胁迫对水稻转录后调控的影响 | 第163页 |
·盐胁迫对水稻蛋白合成的影响 | 第163页 |
·盐胁迫对水稻蛋白降解的影响 | 第163-166页 |
全文结论 | 第166-168页 |
本研究创新点 | 第168-170页 |
参考文献 | 第170-186页 |
附录 | 第186-194页 |
致谢 | 第194页 |