摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
第1节 出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7 | 第12-17页 |
·出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7 | 第12-13页 |
·出血性大肠杆菌 EHEC O157:H7 的发现及其流行性 | 第13-14页 |
·出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7 的主要毒力因子 | 第14-16页 |
·出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7 最新研究进展 | 第16-17页 |
第2节 Ⅲ型分泌系统与效应蛋白 NLEL | 第17-22页 |
·细菌Ⅲ型分泌系统是病原菌将效应蛋白输送到真核细胞的机器 | 第17-19页 |
·NleL 是一种具有 E3 连接酶活性的效应蛋白 | 第19-22页 |
第二章 效应蛋白 NLEL 与宿主蛋白 ZBED1 相互作用的发现与验证 | 第22-56页 |
第1节 酵母双杂交实验筛选 NLEL 作用于宿主的底物蛋白 | 第22-26页 |
·实验材料和仪器 | 第22-23页 |
·酵母双杂交实验筛选 NleL 作用于宿主的底物蛋白 | 第23-25页 |
·试验结果与讨论 | 第25-26页 |
第2节 NLEL(GST-NLEL)的诱导表达和纯化 | 第26-34页 |
·材料材料和仪器 | 第26-29页 |
·EHEC O157 效应蛋白 NleL 的诱导表达 | 第29-30页 |
·融合蛋白 GST-NleL-His 的纯化 | 第30-32页 |
·试验结果与讨论 | 第32-34页 |
第3节 效应蛋白 NLEL 与宿主蛋白 ZBED1 结合与体外泛素化试验 | 第34-42页 |
·实验材料和仪器 | 第34-36页 |
·GST pull-down 检测蛋白之间的作用 | 第36-38页 |
·效应蛋白 NleL 与宿主蛋白 ZBED1 体外泛素化试验 | 第38页 |
·Western blot 检测信号 | 第38-39页 |
·试验结果与讨论 | 第39-42页 |
第4节 效应蛋白 NLEL 在真核细胞内表达与定位 | 第42-56页 |
·实验材料和仪器 | 第42-44页 |
·NleL 真核表达重组质粒 pCDNA3.0-UTR-EGFP-NleL-HA 的构建 | 第44-51页 |
·重组子 pCDNA3.0-UTR-EGFP-Nlel-HA 在真核细胞内表达与定位 | 第51-53页 |
·试验结果与讨论 | 第53-56页 |
参考文献 | 第56-64页 |
致谢 | 第64-66页 |
附:研究生期间撰写并发表的文章汇总 | 第66页 |