| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-20页 |
| 符号说明 | 第20-22页 |
| 第一章 引言 | 第22-29页 |
| 第一节 研究背景介绍 | 第22-27页 |
| 第二节 本实验研究目的及课题思路 | 第27-29页 |
| 第二章 miR-34a在抗Thy1增殖性肾炎大鼠模型中的表达研究 | 第29-57页 |
| 第一节 前言 | 第29-31页 |
| 第二节 实验材料 | 第31-34页 |
| ·实验动物 | 第31页 |
| ·实验试剂 | 第31页 |
| ·实验仪器 | 第31-33页 |
| ·其他材料 | 第33-34页 |
| 第三节 实验方法 | 第34-44页 |
| ·小鼠预免疫 | 第34页 |
| ·细胞培养 | 第34页 |
| ·腹水处理 | 第34页 |
| ·Protein A亲和层析法纯化 | 第34-36页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第36页 |
| ·间接免疫荧光 | 第36页 |
| ·抗Thy1系膜增殖性肾炎大鼠模型的置备及鉴定 | 第36-37页 |
| ·肾组织Western Blot鉴定 | 第37-40页 |
| ·实验大鼠分组及标本留取 | 第40页 |
| ·大鼠肾小球蛋白质的提取 | 第40页 |
| ·免疫组化 | 第40-41页 |
| ·TaqMan(?)Real-Time PCR检测miR-34a在组织中的表达 | 第41-43页 |
| ·统计学方法 | 第43-44页 |
| 第四节 实验结果 | 第44-53页 |
| ·抗体浓度测定 | 第44页 |
| ·SDS-PAGE电泳鉴定抗体纯度 | 第44-45页 |
| ·间接免疫荧光检测抗体特异性 | 第45页 |
| ·抗Thy1大鼠系膜细胞增殖性肾炎模型病理变化 | 第45-46页 |
| ·抗Thy1大鼠系膜增殖性肾炎模型个病理时间点肾小球增殖细胞核抗原Ki-67的表达变化 | 第46-48页 |
| ·抗Thy1大鼠系膜增殖性肾炎各病理时间点细胞周期相关蛋白表达变化 | 第48-50页 |
| ·抗Thy大鼠系膜增殖性肾炎各病理时间点cyclin D1组化表达变化 | 第50-51页 |
| ·TaqMan(?)Real-Time PCR检测抗Thy1肾炎大鼠模型中肾小球中miR-34a的表达变化 | 第51-52页 |
| ·大鼠肾功能检测 | 第52-53页 |
| 第五节 讨论 | 第53-56页 |
| 第六节 小结 | 第56-57页 |
| 第三章 mIR-34a通过靶基因PDGFR-β和cyclin E/CDK2调控系膜细胞增殖的研究 | 第57-80页 |
| 第一节 前言 | 第57-60页 |
| 第二节 实验材料 | 第60-63页 |
| ·实验动物 | 第60页 |
| ·实验试剂 | 第60-61页 |
| ·实验仪器 | 第61-62页 |
| ·其他材料 | 第62-63页 |
| 第三节 实验方法 | 第63-70页 |
| ·细胞培养方法及实验分组 | 第63页 |
| ·细胞增殖能力的测定 | 第63页 |
| ·流式细胞仪检测细胞周期 | 第63-64页 |
| ·细胞RNA提取 | 第64页 |
| ·Western Blot检测蛋白表达变化 | 第64-66页 |
| ·双荧光素酶报告质粒的构建及检测 | 第66-69页 |
| ·统计学方法 | 第69-70页 |
| 第四节 实验结果 | 第70-75页 |
| ·CCK-8检测siPDGFR-β转染大鼠系膜细胞后对于增殖能力的影响 | 第70-71页 |
| ·siPDGFR-β对大鼠系膜细胞细胞周期的影响 | 第71页 |
| ·siPDGFR-β对于miR-34a靶基因PDGFR-β的影响 | 第71-72页 |
| ·siPDGFR-β对于Ras/MAPK信号通路的调控作用 | 第72页 |
| ·siPDGFR-β对于细胞周期相关蛋白的影响 | 第72-74页 |
| ·双荧光素酶实验检测miR-34a与可能靶基因cyclin E/CDK2之间关系 | 第74-75页 |
| 第五节 讨论 | 第75-79页 |
| 第六节 小结 | 第79-80页 |
| 第四章 miR-34a拮抗20%FBS诱导的大鼠系膜细胞增殖效应研究 | 第80-95页 |
| 第一节 前言 | 第80-82页 |
| 第二节 实验材料 | 第82-85页 |
| ·实验动物 | 第82页 |
| ·实验试剂 | 第82-83页 |
| ·实验仪器 | 第83-84页 |
| ·其他材料 | 第84-85页 |
| 第三节 实验方法 | 第85-88页 |
| ·细胞培养方法及实验分组 | 第85页 |
| ·细胞增殖能力的检测 | 第85页 |
| ·流式细胞仪检测细胞周期蛋白 | 第85页 |
| ·Western Blot检测蛋白表达变化 | 第85-87页 |
| ·统计学方法 | 第87-88页 |
| 第四节 实验结果 | 第88-92页 |
| ·CCK-8检测miR-34a拮抗20%FBS刺激后大鼠系膜细胞增殖能力的影响 | 第88-89页 |
| ·miR-34a拮抗20%FBS刺激后细胞周期的改变 | 第89-90页 |
| ·miR-34a拮抗20%FBS刺激后对于miR-34a白基因PDGFR-β的影响 | 第90页 |
| ·miR-34a拮抗20%FBS刺激后Ras/MAPK信号通路的调控作用 | 第90页 |
| ·miR-34a拮抗20%FBS刺激后细胞周期相关蛋白表达变化 | 第90-92页 |
| 第五节 讨论 | 第92-94页 |
| 第六节 小结 | 第94-95页 |
| 第五章 全文总结 | 第95-97页 |
| 本研究的创新点 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-104页 |
| 附录 实验所需主要试剂配置 | 第104-106页 |
| 文献综述一 | 第106-119页 |
| 参考文献 | 第111-119页 |
| 文献综述二 | 第119-152页 |
| 参考文献 | 第138-152页 |
| 致谢 | 第152-153页 |
| 个人简历 在学期间发表的学术论文与研究成果致谢 | 第153-154页 |
