致谢 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
第一章 前言 | 第11-22页 |
·胚胎干细胞及诱导多能干细胞 | 第11-12页 |
·基因组稳定性 | 第12-15页 |
·干细胞基因组稳定性 | 第15-18页 |
·ING3研究进展 | 第18-20页 |
·DFO研究进展 | 第20-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-31页 |
·实验材料 | 第22-25页 |
·细胞系 | 第22页 |
·质粒 | 第22-23页 |
·ING3 mRNA水平检测RT-qPCR引物 | 第23页 |
·主要试剂或试剂盒 | 第23-25页 |
·仪器设备 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-31页 |
·小鼠胚胎成纤维细胞的分离与培养 | 第25-26页 |
·滋养层的制备 | 第26页 |
·细胞培养 | 第26-27页 |
·质粒扩增与提取 | 第27页 |
·慢病毒包装与感染 | 第27-28页 |
·蛋白免疫印迹(Western Blot) | 第28-29页 |
·Real-time PCR | 第29页 |
·碱性磷酸酶染色 | 第29页 |
·免疫荧光 | 第29-30页 |
·ROS水平流式检测 | 第30页 |
·细胞周期流式检测 | 第30-31页 |
第三章 结果与分析 | 第31-46页 |
·干细胞的培养与鉴定 | 第31-33页 |
·实验室在养干细胞具有正常的克隆形态 | 第31页 |
·实验室在养干细胞高水平表达碱性磷酸酶 | 第31-32页 |
·实验室在养干细胞具有经典四因子的高水平表达 | 第32-33页 |
·小分子DFO对干细胞基因组稳定性的影响研究 | 第33-37页 |
·DFO抑制干细胞的增殖 | 第33-34页 |
·DFO处理导致干细胞周期阻滞以及凋亡的发生 | 第34-36页 |
·DFO处理不会导致干细胞的分化 | 第36页 |
·DFO在合适的浓度范围内对干细胞多能性基因的表达有明显的促进作用 | 第36-37页 |
·ROS水平并不是干细胞内γH2AX高本底水平表达的原因 | 第37-42页 |
·干细胞中存在高水平的γH2AX本底表达 | 第37-39页 |
·干细胞与体细胞IR后均可正常形成γH2AX foci | 第39页 |
·干细胞具有与体细胞相同甚至更低的ROS水平 | 第39-41页 |
·γH2AX上游蛋白在干细胞中无与γH2AX一致性的高水平表达现象 | 第41-42页 |
·ING3对干细胞基因组稳定性影响的研究 | 第42-46页 |
·干细胞内高水平表达肿瘤抑制蛋白ING3 | 第42页 |
·干细胞内ING3 mRNA水平高于体细胞 | 第42-43页 |
·IR后干细胞内ING3的蛋白表达下调 | 第43页 |
·UV照射不影响干细胞内ING3表达 | 第43-44页 |
·在分化后的干细胞中ING3表达水平下调 | 第44-46页 |
第四章 结论与讨论 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
中英文对照表 | 第54-55页 |
作者简介及在学期间主要研究成果 | 第55页 |