| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 引言 | 第9-20页 |
| ·文心兰简介 | 第9-11页 |
| ·文心兰在分子生物学上的研究进展 | 第10-11页 |
| ·文心兰切花衰老研究概况 | 第11页 |
| ·植物切花衰老分子机制的研究进展 | 第11-16页 |
| ·乙烯的概述 | 第11-12页 |
| ·乙烯合成途径及其与切花衰老的关系 | 第12-14页 |
| ·分子水平调控乙烯合成 | 第14-16页 |
| ·RACE技术的应用 | 第16-18页 |
| ·获取全长cDNA | 第16-17页 |
| ·RACE原理 | 第17页 |
| ·RACE技术在植物基因工程上的应用 | 第17-18页 |
| ·研究内容及其目的意义 | 第18-19页 |
| ·技术路线 | 第19-20页 |
| 2 实验材料与方法 | 第20-39页 |
| ·实验材料与试剂 | 第20-21页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·菌种与载体 | 第20页 |
| ·生化试剂和试剂盒 | 第20页 |
| ·主要仪器和设备 | 第20-21页 |
| ·实验方法与步骤 | 第21-39页 |
| ·CTAB-LiCl法提取文心兰总RNA | 第21-22页 |
| ·cDNA的合成 | 第22页 |
| ·文心兰ACC合成酶基因中间片段的分离 | 第22-24页 |
| ·文心兰ACC合成酶基因3’末端序列克隆 | 第24-26页 |
| ·文心兰ACC合成酶基因5’末端序列克隆 | 第26-29页 |
| ·文心兰ACC合成酶基因cDNA全长的扩增 | 第29-30页 |
| ·OnACS2全长基因组序列的获得 | 第30-31页 |
| ·OnACS2基因全长的信息学分析 | 第31页 |
| ·OnACS2基因的原核表达 | 第31-35页 |
| ·不同花期不同花器官乙烯释速率的测定 | 第35-36页 |
| ·文心兰切花衰老过程中OnACS2基因的表达分析 | 第36-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-60页 |
| ·总RNA提取结果 | 第39页 |
| ·文心兰ACC合成酶基因OnACS2的分离 | 第39-43页 |
| ·OnACS2基因中间片段的获得 | 第39-41页 |
| ·OnACS2基因3’端的扩增 | 第41页 |
| ·OnACS2基因5’端序列的克隆 | 第41-42页 |
| ·OnACS2基因全长序列的扩增 | 第42-43页 |
| ·文心兰OnACS2基因的生物信息学分析 | 第43-49页 |
| ·OnACS2基因的序列分析 | 第43-46页 |
| ·OnACS2基因推导蛋白结构分析 | 第46-48页 |
| ·ACS基因进化树的分析 | 第48-49页 |
| ·文心兰OnACS2基因的原核表达 | 第49-53页 |
| ·原核表达产物分析 | 第50-51页 |
| ·ACC合成酶活性的测定 | 第51-53页 |
| ·文心兰OnACS2基因的表达特征分析 | 第53-60页 |
| ·瓶插期间OnACS2在文心兰切花各器官中的乙烯释放状况 | 第53-56页 |
| ·相对荧光定量分析OnACS2基因的表达量 | 第56-58页 |
| ·花蕊柱中OnACS2基因的表达量与乙烯释放速率的关系 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-64页 |
| ·OnACS2基因的特征分析 | 第60-61页 |
| ·OnACS2基因的原核表达 | 第61页 |
| ·OnACS2基因的特异性表达分析 | 第61-64页 |
| ·荧光定量PCR | 第61-62页 |
| ·OnACS2基因在文心兰不同组织中的表达特征 | 第62页 |
| ·文心兰花器官衰老、乙烯释放和OnACS2基因表达三者的关联 | 第62-64页 |
| 5 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 附录 | 第71-74页 |
| 英文缩写词表(List of abbreviation) | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
