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核桃(Juglans regia L.)JrVTE1基因的克隆与表达分析

中文摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 引言第12-21页
   ·核桃营养价值第12页
   ·核桃维生素 E 的含量第12-13页
   ·维生素 E 的生理功能第13-15页
     ·抗氧化功能第13-14页
     ·维生素 E 在细胞信号转导中的作用第14页
     ·抗不育功能第14-15页
   ·维生素 E 的生物合成第15-17页
     ·维生素 E 概述第15-16页
     ·维生素 E 的合成途径第16-17页
   ·维生素 E 代谢相关基因的克隆与基因工程第17-19页
     ·维生素 E 代谢相关基因的克隆第17-18页
     ·维生素 E 代谢相关基因的基因工程第18-19页
   ·植物基因功能研究方法第19-20页
   ·本研究目的意义第20-21页
2. 材料与方法第21-37页
   ·试验材料第21-24页
     ·植物材料第21页
     ·菌株、质粒及酶第21页
     ·生化试剂第21-22页
     ·培养基配方第22页
     ·抗生素及主要溶液配制第22-23页
     ·主要仪器第23页
     ·引物序列第23-24页
   ·试验方法第24-37页
     ·改良 CTAB 法提取核桃胚营养代谢盛期总 RNA第24-25页
     ·RNA 样品的纯度和浓度检测第25页
     ·cDNA 第一条链的合成第25页
     ·核桃 JrVTE1 基因的克隆第25-29页
     ·JrVTE1 基因序列及功能分析第29页
     ·JrVTE1 基因的实时定量表达分析第29-30页
     ·核桃 JrVTE1 基因的原核表达第30-35页
     ·核桃 JrVTE1 基因的转化第35-37页
3. 结果与分析第37-51页
   ·核桃 RNA 样品的检测第37页
   ·核桃 JrVTE1 基因克隆的结果第37-40页
     ·JrVTE1 中间片段的扩增结果第37-38页
     ·JrVTE13'-及 5'-RACE 的扩增结果第38-39页
     ·JrVTE1 基因全长的扩增结果第39-40页
   ·核桃 JrVTE1 基因生物信息学分析第40-42页
     ·JrVTE1 基因序列的同源性比较第40页
     ·JrVTE1 氨基酸序列的同源性比较第40-42页
     ·JrVTE1 基因编码的多肽序列特点分析第42页
     ·JrVTE1 基因编码蛋白的功能分析第42页
   ·核桃 JrVTE1 基因的表达分析第42-43页
   ·核桃 JrVTE1 基因原核表达第43-45页
     ·JrVTE1 基因阅读框的克隆结果第43-44页
     ·重组表达质粒 pET28a-JrVTE1 的构建与 PCR 鉴定第44-45页
     ·JrVTE1 基因的诱导表达第45页
   ·核桃 JrVTE1 植物表达载体的构建第45-47页
     ·ZJrVTE1 基因阅读框的克隆第45-46页
     ·植物表达质粒 pRI101-JrVTE1 的构建第46-47页
     ·重组表达质粒 pRI101-JrVTE1 酶切与 PCR 鉴定结果第47页
   ·核桃 JrVTE1 基因的转化第47-51页
     ·农杆菌转化第47-48页
     ·梨的遗传转化第48-49页
     ·酸枣的遗传转化第49-51页
4. 讨论第51-55页
   ·关于核桃 JrVTE1 基因克隆第51-52页
   ·核桃 JrVTE1 基因定量表达分析第52-53页
   ·核桃 JrVTE1 基因原核表达分析第53页
   ·关于核桃 JrVTE1 基因转化第53-55页
5. 结论第55-56页
   ·核桃 JrVTE1 基因全序列的获得第55页
   ·核桃 JrVTE1 基因的实时荧光定量 PCR 分析第55页
   ·核桃 JrVTE1 基因的原核表达第55页
   ·核桃 JrVTE1 基因植物表达载体的构建及遗传转化第55-56页
参考文献第56-65页
致谢第65-66页
攻读学位期间发表论文情况第66页

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