| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-12页 |
| ·昆虫 VgR 的研究概述 | 第9页 |
| ·昆虫 VgR 属于低密度脂蛋白受体家族 | 第9-11页 |
| ·昆虫 VgR 的调节 | 第11-12页 |
| 2 引言 | 第12-14页 |
| ·研究的目的及意义 | 第12页 |
| ·研究内容 | 第12-13页 |
| ·野桑蚕卵黄原蛋白受体基因序列的测定 | 第12页 |
| ·野桑蚕卵黄原蛋白受体的原核表达及多抗制备 | 第12页 |
| ·野桑蚕卵黄原蛋白受体的表达分析 | 第12-13页 |
| ·技术路线 | 第13-14页 |
| 3 材料与方法 | 第14-28页 |
| ·实验材料 | 第14页 |
| ·仪器与试剂 | 第14-17页 |
| ·主要实验仪器 | 第14页 |
| ·主要生化试剂 | 第14-15页 |
| ·常用溶液的配制 | 第15-17页 |
| ·实验方法 | 第17-28页 |
| ·野桑蚕卵黄原蛋白受体基因的克隆 | 第17-21页 |
| ·野桑蚕的饲养 | 第17页 |
| ·野桑蚕组织的收集 | 第17页 |
| ·野桑蚕总 RNA 的提取 | 第17-18页 |
| ·提取的总 RNA 的质量检测 | 第18页 |
| ·第一链 cDNA 的合成 | 第18-19页 |
| ·引物设计和 PCR 扩增 | 第19-20页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第20-21页 |
| ·目的片段与 pMD - 19T 连接和转化 | 第21页 |
| ·序列的测序，拼接与分析 | 第21页 |
| ·野桑蚕卵黄原蛋白受体主要功能域的原核表达 | 第21-23页 |
| ·引物设计及 PCR 特异性扩增 | 第21页 |
| ·质粒抽提 | 第21-22页 |
| ·目的片段和 pET- 28a 的双酶切 | 第22页 |
| ·连接目的基因和表达载体 | 第22-23页 |
| ·重组蛋白诱导表达 | 第23页 |
| ·重组蛋白表达及纯化 | 第23-24页 |
| ·SDS- PAGE 电泳检测 | 第23页 |
| ·重组蛋白纯化 | 第23-24页 |
| ·重组蛋白的可溶性分析 | 第23页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第23-24页 |
| ·Western Blot 分析 | 第24页 |
| ·多克隆抗体制备 | 第24-26页 |
| ·蛋白定量 | 第24-25页 |
| ·多抗制备 | 第25-26页 |
| ·免疫动物及抗血清的收集 | 第25页 |
| ·ELISA 测抗体效价 | 第25-26页 |
| ·野桑蚕 VgR 的表达分析 | 第26-28页 |
| ·野桑蚕 VgR 在不同组织中的表达分析 | 第26-27页 |
| ·野桑蚕各组织的收集 | 第26页 |
| ·野桑蚕各组织总 RNA 的提取 | 第26页 |
| ·野桑蚕各组织总蛋白的抽取 | 第26页 |
| ·野桑蚕 VgR 的 RT-PCR 分析 | 第26-27页 |
| ·野桑蚕 VgR 在不同时期的表达分析 | 第27页 |
| ·野桑蚕各组织的收集 | 第27页 |
| ·野桑蚕各组织总 RNA 的提取 | 第27页 |
| ·野桑蚕各组织总蛋白的抽取 | 第27页 |
| ·野桑蚕 VgR 的荧光定量 PCR 分析 | 第27页 |
| ·野桑蚕VgR的多抗免疫印迹分析 | 第27-28页 |
| 4 结果与分析 | 第28-43页 |
| ·野桑蚕总 RNA 的检测 | 第28页 |
| ·野桑蚕 VgR 基因序列的测定和分析 | 第28-33页 |
| ·野桑蚕 VgR 与其他昆虫 VgR 的同源性分析 | 第33-34页 |
| ·野桑蚕 VgR 配体结合域 LBD1 ， LBD2 的扩增 | 第34-35页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第35-37页 |
| ·LDB1 /2 基因在 T 载体上的克隆鉴定 | 第35页 |
| ·双酶切鉴定 | 第35-36页 |
| ·菌落 PCR 鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白 His - BmaLBD1/2 的原核表达及纯化 | 第37-39页 |
| ·SDS- PAGE 检测 | 第37页 |
| ·重组蛋白纯化 | 第37-38页 |
| ·Western Blot 分析 | 第38-39页 |
| ·多克隆抗体制备 | 第39-41页 |
| ·BCA 法蛋白定量 | 第39-40页 |
| ·ELISA 检测 | 第40-41页 |
| ·野桑蚕 VgR 的表达分析 | 第41-43页 |
| ·半定量 PCR | 第41页 |
| ·荧光定量 PCR | 第41-42页 |
| ·免疫印迹分析 | 第42-43页 |
| 5 讨论 | 第43-44页 |
| ·野桑蚕的室内饲养 | 第43页 |
| ·野桑蚕卵黄原蛋白受体基因全长与序列分析 | 第43页 |
| ·野桑蚕卵黄原蛋白受体的原核表达 | 第43页 |
| ·荧光定量 PCR 和 Western Blot | 第43-44页 |
| 6 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 个人简介 | 第52页 |
| 攻读硕士期间发表论文情况 | 第52页 |
