| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 1 文献综述 | 第7-12页 |
| ·14-3-3蛋白研究进展 | 第7-12页 |
| ·14-3-3蛋白 | 第7页 |
| ·14-3-3蛋白的结构特点 | 第7-8页 |
| ·14-3-3蛋白的特异性 | 第8页 |
| ·14-3-3蛋白的生物学功能 | 第8-9页 |
| ·14-3-3蛋白在临床上的应用 | 第9-12页 |
| 2 引言 | 第12-14页 |
| ·课题的研究目的与意义 | 第12页 |
| ·课题研究的主要内容 | 第12-13页 |
| ·技术路线 | 第13-14页 |
| 3 材料与方法 | 第14-23页 |
| ·实验材料 | 第14页 |
| ·仪器与试剂 | 第14-17页 |
| ·主要实验仪器 | 第14页 |
| ·主要生化试剂 | 第14-15页 |
| ·常用溶液的配制 | 第15-17页 |
| ·实验方法 | 第17-23页 |
| ·柞蚕组织的收集 | 第17页 |
| ·柞蚕总RNA的提取 | 第17页 |
| ·提取的总RNA的质量检测 | 第17-18页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第18页 |
| ·引物设计和PCR扩增 | 第18-19页 |
| ·PCR扩增后目的产物的纯化 | 第19页 |
| ·目的片段的连接和转化 | 第19-20页 |
| ·柞蚕14-3-3序列的拼接 | 第20页 |
| ·柞蚕14-3-3基因的原核表达 | 第20-21页 |
| ·柞蚕14-3-3ORF的扩增 | 第20页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第20-21页 |
| ·蛋白的诱导表达 | 第21页 |
| ·SDS-PAGE电泳分析 | 第21页 |
| ·Westernblot分析 | 第21-22页 |
| ·纯化目的蛋白 | 第22-23页 |
| 4 结果与分析 | 第23-31页 |
| ·柞蚕总RNA的检测 | 第23页 |
| ·柞蚕14-3-3蛋白基因序列的测定和分析 | 第23-24页 |
| ·柞蚕14-3-3蛋白与其他物种14-3-3蛋白的同源性分析 | 第24-27页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第27-29页 |
| ·柞蚕14-3-3全长ORF的扩增 | 第27-28页 |
| ·双酶切鉴定 | 第28-29页 |
| ·柞蚕14-3-3蛋白的原核表达 | 第29页 |
| ·IPTG不同诱导浓度的原核表达 | 第29页 |
| ·14-3-3蛋白的纯化 | 第29-30页 |
| ·Westernblot检测 | 第30-31页 |
| 5 讨论 | 第31-32页 |
| ·柞蚕14-3-3蛋白基因全长与序列分析 | 第31页 |
| ·柞蚕14-3-3蛋白的原核表达 | 第31页 |
| ·柞蚕14-3-3蛋白的原核表达后蛋白纯化 | 第31-32页 |
| 6 结论 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-38页 |
| 致谢 | 第38-39页 |
| 个人简介 | 第39页 |
| 读研期间发表的论文 | 第39页 |