摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略语 | 第6-7页 |
目录 | 第7-10页 |
第一章 引言 | 第10-19页 |
·PON1 的概述 | 第10-15页 |
·PON1 的性质及其研究背景 | 第11-12页 |
·PON1 的多态性现象 | 第12-13页 |
·PON1 与疾病的关系 | 第13-15页 |
·杆状病毒表达系统概述 | 第15-19页 |
·杆状病毒 | 第15页 |
·昆虫杆状病毒表达系统 | 第15-16页 |
·杆状病毒表达系统与其他表达系统的比较 | 第16-17页 |
·BmNPV 表达系统与 AcMNPV 表达系统相比较的优势 | 第17页 |
·Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统系统 | 第17-19页 |
第二章 实验方案设计 | 第19-21页 |
·研究的目的和意义 | 第19页 |
·研究内容 | 第19-20页 |
·实验流程图 | 第20-21页 |
第三章 PON1 基因的生物信息学分析 | 第21-23页 |
·生物信息学分析工具 | 第21页 |
·生物信息学分析结果 | 第21-22页 |
·PON1 基因的同源性分析 | 第21页 |
·疏水性分析 | 第21-22页 |
·信号肽分析 | 第22页 |
·讨论 | 第22-23页 |
第四章 大肠杆菌中 PON1 的表达与纯化 | 第23-35页 |
·材料与试剂 | 第23-24页 |
·实验内容与方法 | 第24-30页 |
·pET-32a-PON1 重组表达载体的构建 | 第24-25页 |
·pET-32a-PON1 重组质粒的鉴定 | 第25-27页 |
·pET-32a-PON1重组质粒的转化与鉴定 | 第27页 |
·重组蛋白PON1在大肠杆菌中的表达及其分析 | 第27页 |
·重组蛋白PON1的 Western bloting 鉴定 | 第27-28页 |
·重组蛋白PON1的大量表达及纯化 | 第28-30页 |
·实验结果 | 第30-34页 |
·pET-32a-PON1的构建 | 第30-31页 |
·重组蛋白PON1的诱导表达及 Western blotting 鉴定 | 第31-32页 |
·重组蛋白PON1的纯化 | 第32-34页 |
·讨论 | 第34-35页 |
第五章 多克隆抗体的制备及纯化 | 第35-42页 |
·材料与试剂 | 第35-36页 |
·实验内容与方法 | 第36-39页 |
·多克隆抗体的制备 | 第36页 |
·ELISA 检测多克隆抗体效价 | 第36-37页 |
·PON1多克隆抗体的纯化 | 第37-39页 |
·结果 | 第39-41页 |
·PON1多克隆抗体的特异性检测 | 第39-40页 |
·PON1多克隆抗体的效价 | 第40页 |
·PON1多克隆抗体的纯化 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41-42页 |
第六章 PON1在家蚕杆状病毒表达系统中的表达与鉴定 | 第42-60页 |
·材料与试剂 | 第42页 |
·实验内容与方法 | 第42-50页 |
·重组转移载体 pFastBacHTA-PON1的构建 | 第42-43页 |
·重组转移载体 pFastBacHTA-PON1的序列测定 | 第43页 |
·重组质粒 Bacmid-PON1的构建 | 第43页 |
·重组 Bacmid-PON1的提取与鉴定 | 第43-45页 |
·家蚕卵巢细胞(BmN)的复苏、培养与冻存 | 第45-46页 |
·重组病毒 vBmPON1的构建 | 第46-47页 |
·PON1在家蚕生物反应器中的表达 | 第47-48页 |
·家蚕血淋巴中表达的 PON1的纯化 | 第48-49页 |
·家蚕血淋巴中 PON1含量的 ELISA 检测 | 第49-50页 |
·结果 | 第50-59页 |
·重组质粒 pFastBacHTA-PON1的鉴定 | 第50-51页 |
·重组质粒 Bacmid-PON1 的 PCR 鉴定 | 第51页 |
·重组病毒 vBmPON1 的鉴定 | 第51-53页 |
·PON1 在家蚕生物反应器中的表达 | 第53-55页 |
·家蚕幼虫血淋巴表达的 PON1 的纯化 | 第55-57页 |
·质谱分析结果 | 第57-58页 |
·蚕血淋巴中 PON1 含量的 ELISA 检测 | 第58-59页 |
·讨论 | 第59-60页 |
第七章 重组表达 PON1 活性及功能的初步研究 | 第60-67页 |
·材料与试剂 | 第60页 |
·实验内容及方法 | 第60-63页 |
·重组表达 PON1 与天然 PON1 的活性检测及比较 | 第60-62页 |
·PON1 对于敌敌畏染毒小鼠的解毒效果的研究 | 第62-63页 |
·结果 | 第63-65页 |
·重组表达的 PON1 活性检测结果 | 第63-65页 |
·PON1 对敌敌畏的解毒效果 | 第65页 |
·讨论 | 第65-67页 |
结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-72页 |
致谢 | 第72页 |