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温敏性表面的制备及其在贴壁型细胞培养与收获中的应用

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
引言第12-13页
1 文献综述第13-31页
   ·温敏性材料概述第13-22页
     ·刺激响应性聚合物简介第13页
     ·温度敏感性聚合物的特性和种类第13-15页
     ·PNIPAAm的结构与温敏性机理第15-16页
     ·PNIPAAm在细胞培养与收获方面的应用第16-22页
   ·壳聚糖的特性及其在生物医学领域的应用第22-29页
     ·壳聚糖的结构及性质第22-23页
     ·CS的改性第23-26页
     ·CS在生物医学领域的应用第26-29页
   ·本文的选题依据及研究内容第29-31页
2 温敏性微载体的制备与表征第31-44页
   ·概述第31-32页
   ·实验材料与仪器第32-33页
     ·实验仪器与设备第32页
     ·药品与试剂第32-33页
   ·实验方法第33-35页
     ·药品与试剂的预处理第33页
     ·Piranha溶液的配制第33-34页
     ·样品表面处理第34页
     ·用TMSPM修饰微载体/玻璃片第34页
     ·微载体表面的自由基共聚合反应第34-35页
     ·微载体表面温敏材料的表征第35页
   ·实验结果与讨论第35-43页
     ·硅烷偶联剂使用条件的筛选第35-38页
     ·温敏性微载体的表观形貌第38-39页
     ·温敏性微载体的红外图谱及能谱分析第39-41页
     ·温敏性微载体的制备路线分析第41-43页
   ·小结第43-44页
3 BMMSCs在温敏性微载体上的培养与收获第44-57页
   ·概述第44页
   ·实验仪器与材料第44-46页
     ·实验仪器与设备第44-45页
     ·药品与试剂第45-46页
   ·实验方法第46-49页
     ·实验中使用试剂的配制第46-47页
     ·培养瓶和微载体的预处理第47页
     ·BMMSCs的分离和纯化第47页
     ·BMMSCs的细胞免疫抗原鉴定第47-48页
     ·BMMSCs在微载体上的接种和培养第48页
     ·BMMSCs在微载体上粘附曲线的测定第48页
     ·BMMSCs在微载体上生长曲线的测定第48-49页
     ·BMMSCs从微载体上收获及收获前后的Calcein/PI荧光染色第49页
     ·收获的BMMSCs的再培养第49页
     ·统计学分析第49页
   ·结果与讨论第49-56页
     ·BMMSCs的生长状况第49-50页
     ·BMMSCs的细胞免疫抗原鉴定第50-51页
     ·BMMSCs在微载体上的生长状态第51-52页
     ·BMMSCs在微载体上的粘附曲线第52-53页
     ·BMMSCs在微载体上的生长曲线第53-54页
     ·降温脱附法收获BMMSCs前后细胞活性对比第54-56页
     ·从微载体上收获BMMSCs的再培养第56页
   ·小结第56-57页
4 旋转涂膜法制备温敏性壳聚糖膜第57-69页
   ·概述第57页
   ·实验材料与仪器第57-58页
     ·实验仪器与设备第57-58页
     ·药品与试剂第58页
   ·实验方法第58-60页
     ·实验器材及试剂的前期处理第58页
     ·壳聚糖接枝共聚物双层膜的制备第58-59页
     ·壳聚糖和共聚物的化学交联第59-60页
     ·制备的温敏性壳聚糖膜的红外检测第60页
     ·人乳腺癌细胞、Hela细胞和脂肪干细胞的培养第60页
     ·MCF-7细胞、Hela细胞和ADSCs在温敏膜上的接种与培养第60页
     ·MCF-7细胞、Hela细胞和ADSCs在温敏膜上的降温脱附第60页
   ·结果与讨论第60-67页
     ·温敏性壳聚糖膜的红外检测第60-61页
     ·MCF-7细胞在膜表面的粘附与脱附第61-64页
     ·Hela细胞在膜表面的粘附与脱附第64-65页
     ·ADSCs细胞在膜表面的粘附与脱附第65页
     ·共聚物接枝密度对细胞粘附能力的影响第65-67页
   ·小结第67-69页
5 化学交联法制备温敏性P(CS-g-TMSPM-g-NIP AAm)共聚物第69-78页
   ·概述第69-70页
   ·实验仪器与材料第70-71页
     ·实验仪器与设备第70页
     ·药品与试剂第70-71页
   ·实验方法第71-73页
     ·药品与玻璃片的预处理第71页
     ·P(CS-g-TMSPM-g-NIPAAm)膜的制备第71-72页
     ·聚合物膜的红外表征第72页
     ·OB细胞和转染BMP-2的ADSCs的培养第72页
     ·细胞在膜上的接种和培养第72-73页
   ·结果与讨论第73-77页
     ·热处理前后CS/TMSPM复合物的红外分析第73-74页
     ·P(CS-g-TMSPM-g-NIPAAm)的表征第74-76页
     ·TMSPM含量对细胞粘附性能的影响第76-77页
   ·小结第77-78页
结论第78-79页
工作展望第79-80页
参考文献第80-89页
附录A 英文缩略词第89-91页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第91-92页
致谢第92-94页
大连理工大学学位论文版权使用授权书第94页

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