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具有催化核苷酰化反应活性的微生物脂肪酶定位及鉴定的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-10页
目录第10-14页
第一章 绪论第14-31页
   ·全细胞催化反应第14-16页
     ·全细胞催化第14页
     ·全细胞催化剂来源及其形式第14-15页
     ·全细胞生物转化的研究现状第15-16页
   ·微生物脂肪酶第16-22页
     ·脂肪酶简介第16-17页
     ·微生物脂肪酶的种类第17-18页
     ·脂肪酶的活性表征第18-19页
     ·微生物脂肪酶的分离纯化方法第19-22页
   ·全细胞连接脂肪酶的研究进展第22-27页
     ·酶在细胞中定位的方法第22-25页
     ·全细胞连接酶在细胞中定位的研究进展第25-27页
   ·本论文的立题意义与主要研究内容第27-31页
     ·本论文的研究目的与意义第27-29页
     ·本论文的主要研究内容第29-31页
第二章 具有催化核苷酰化反应活性的脂肪酶在微生物细胞中的定位第31-50页
   ·材料第32页
     ·菌种第32页
     ·主要试剂第32页
   ·主要仪器设备第32-33页
   ·实验方法第33-37页
     ·菌种保藏、接种及菌体收集第33页
     ·细胞组分的制备第33-34页
     ·米曲霉微观形态观察第34页
     ·微生物全细胞及细胞各组分催化阿糖胞苷酰化反应第34页
     ·高效液相色谱(HPLC)分析阿糖胞苷乙酰化结果第34-35页
     ·底物转化率、区域选择性的计算第35页
     ·米曲霉脂肪酶活力的测定方法第35-36页
     ·米曲霉蛋白酶活力的测定方法第36页
     ·粗酶蛋白 SDS-PAGE 检测第36-37页
   ·结果与讨论第37-48页
     ·米曲霉细胞超声波破碎效果的 SEM 分析第37-38页
     ·米曲霉细胞不同组分催化阿糖胞苷酰化反应的研究第38-39页
     ·反应时间对米曲霉不同细胞组分催化酰化反应的影响第39-41页
     ·米曲霉细胞各组分蛋白的 SDS-PAGE 图谱第41-42页
     ·米曲霉细胞各组分脂肪酶水解活力的研究第42-43页
     ·米曲霉细胞各组分脂肪酶合成活力及催化效率的研究第43-45页
     ·米曲霉细胞各组分具有合成活力脂肪酶的生产模式第45-46页
     ·米曲霉细胞各组分脂肪酶的区域选择性分析第46-47页
     ·蛋白酶水解活力在米曲霉细胞各组分中随时间变化情况第47-48页
   ·本章小结第48-50页
第三章 米曲霉细胞中可催化阿糖胞苷酰化反应的脂肪酶诱导合成机制的研究第50-63页
   ·实验材料第51页
     ·菌种第51页
     ·主要试剂第51页
   ·主要仪器设备第51页
   ·实验方法第51-52页
     ·不同表面活性剂作为碳源诱导剂时对脂肪酶合成活力分布的影响第51页
     ·生长及碳源对米曲霉脂肪酶合成影响的研究第51-52页
     ·米曲霉全细胞胞内反应底物/产物运送机制的研究第52页
     ·扫描电镜检测反应时微生物微观形态的变化第52页
   ·结果与讨论第52-61页
     ·不同表面活性剂作为碳源诱导剂时对脂肪酶合成活力分布的影响第52-54页
     ·生长及碳源对米曲霉脂肪酶合成影响的研究第54-57页
     ·米曲霉全细胞胞内反应底物/产物运送机制的分析第57-60页
     ·丙酮处理及在反应体系中米曲霉菌丝的形态变化第60-61页
   ·本章小结第61-63页
第四章 米曲霉中具有催化核苷酰化反应活性脂肪酶分子的鉴定第63-78页
   ·材料第63-64页
     ·菌种第63-64页
     ·主要试剂第64页
   ·主要仪器设备第64页
   ·实验方法第64-66页
     ·米曲霉各组分蛋白质的 SDS-PAGE 分析第64页
     ·米曲霉在不同碳源作为诱导剂时 SDS-PAGE 图谱检测第64页
     ·酶合成活力的检测第64页
     ·酶水解活力的检测第64页
     ·蛋白含量检测第64-65页
     ·米曲霉脂肪酶的提取与纯化第65页
     ·催化阿糖胞苷酰化反应脂肪酶的质谱鉴定第65-66页
   ·结果与讨论第66-76页
     ·添加吐温 80 和葡萄糖培养时米曲霉脂肪酶蛋白的 SDS-PAGE 分析第66-69页
     ·碳源诱导剂种类不同时米曲霉脂肪酶表达量的 SDS-PAGE 检测第69-70页
     ·米曲霉催化 ara-C 酰化反应脂肪酶表达随时间变化情况第70-72页
     ·米曲霉脂肪酶的分离纯化结果第72-75页
     ·米曲霉中具有催化核苷酰化反应活性的脂肪酶蛋白的鉴定第75-76页
     ·具有催化 ara-C 酰化反应脂肪酶抗体的制备第76页
   ·本章小结第76-78页
主要结论与展望第78-82页
 主要研究结论第78-80页
 论文创新点第80页
 研究展望第80-82页
参考文献第82-94页
附录第94-99页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第99-100页
致谢第100-101页
附件第101页

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