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一株产纤维素酶真菌的筛选鉴定、酶学性质和发酵产酶条件的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第一章 前言第11-19页
 1 纤维素第11-14页
   ·纤维素资源第11-12页
   ·芒草资源第12-14页
     ·芒草的简介第12-13页
     ·芒草的开发利用现状第13-14页
 2 纤维素酶简介第14-17页
   ·纤维素酶的来源第14页
   ·产纤维素酶菌株选育研究进展及发酵条件研究的进展第14-16页
   ·纤维素酶组成第16页
   ·纤维素酶的应用第16-17页
 3 本论文选题依据、研究的目的与意义第17-19页
第二章 产纤维素酶真菌的筛选第19-26页
 1 试验材料与仪器第19-20页
   ·试验试剂与药品第19页
   ·主要仪器第19页
   ·试验材料第19页
   ·主要试剂配制第19-20页
   ·培养基配方第20页
 2 试验方法第20-22页
   ·产纤维素酶真菌的初筛第20页
   ·孢子悬浮液制备及粗酶液的提取第20-21页
   ·葡萄糖标准曲线制作第21-22页
   ·酶活定义以及测定方法第22页
     ·酶活定义第22页
     ·羧甲基纤维素钠酶活力测定第22页
     ·滤纸酶活测定第22页
 3 结果与分析第22-25页
   ·产纤维素酶真菌的初筛第22-24页
   ·DNS法筛选高产纤维素酶真菌第24-25页
 4 讨论第25-26页
第三章 Z90菌种鉴定第26-33页
 1 试验材料与仪器第26页
   ·试验试剂与药品第26页
   ·主要仪器第26页
 2 试验方法第26-29页
   ·菌种常规鉴定第26-27页
     ·形态学观察第26-27页
     ·菌落特征和菌株培养特性第27页
   ·内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列分析第27-29页
     ·真菌总DNA提取方法第27页
     ·PCR扩增ITS片段第27-28页
     ·PCR扩增产物回收并连接载体第28页
     ·真菌阳性克隆检测第28-29页
     ·PCR产物测序结果第29页
     ·菌株同源性比对第29页
 3 结果与分析第29-32页
   ·菌种常规鉴定第29-30页
     ·待测菌株形态特征第29页
     ·菌落特征和菌株培养特性第29-30页
   ·ITS序列分析第30-32页
     ·真菌总DNA提取第30页
     ·PCR扩增ITS片段第30-31页
     ·PCR检测重组的质粒DNA第31页
     ·测序结果同源性比对第31-32页
 4 讨论第32-33页
第四章 Z90紫外诱变第33-39页
 1 试验材料与仪器第33页
   ·试验试剂与药品第33页
   ·主要试验仪器第33页
   ·培养及配方第33页
 2 试验方法第33-35页
   ·最适诱变时间确定及正突变的定义第33-34页
   ·紫外诱变菌初筛第34页
   ·紫外诱变菌复筛第34页
   ·孢子悬浮液制备和粗酶液的提取第34页
   ·酶活测定方法第34页
   ·诱变菌株传代稳定性研究第34-35页
 3 结果与分析第35-38页
   ·最佳诱变时间第35-36页
   ·诱变菌的初筛结果第36-37页
   ·诱变菌的复筛结果第37页
   ·诱变菌的传代稳定性结果第37-38页
 4 讨论第38-39页
第五章 酶学性质初步研究第39-46页
 1 试剂与仪器第39-40页
   ·试验试剂与药品第39页
   ·常用实验仪器第39页
   ·培养及配方第39-40页
 2 试验方法第40-41页
   ·酶促反应中pH对酶活力的影响及酸碱稳定研究第40页
   ·酶促反应中温度对酶活力的影响及热稳定性性研究第40页
   ·酶促反应中金属离子对酶活力的影响第40页
   ·酶促反应中金属离子对酶活力的影响第40-41页
   ·酶活测定方法第41页
 3 结果与分析第41-45页
   ·pH对纤维素酶活性的影响第41页
   ·纤维素酶的酸碱稳定性研究第41-42页
   ·温度对纤维素酶活性的影响第42-43页
   ·纤维素酶的热稳定性研究第43-44页
   ·不同金属离子对对Z90-19所产纤维素酶活性的影响第44-45页
 4 讨论第45-46页
第六章 Z90-19发酵产纤维素酶条件的优化第46-65页
 1 试验试剂与仪器第46-47页
   ·试验试剂第46页
   ·常用仪器第46页
   ·培养基配方第46-47页
 2 试验方法第47-49页
   ·产酶培养基的优化第47-48页
     ·最适碳源的研究第47页
     ·最适氮源的研究第47页
     ·最适K_2HPO_4含量的研究第47页
     ·响应面分析法优化产酶培养基第47-48页
   ·培养条件的优化第48-49页
     ·最适温度的研究第48页
     ·最适pH的研究第48页
     ·最适接种量的研究第48页
     ·响应面分析发优化培养条件第48-49页
   ·酶活测定方法第49页
 3 结果与分析第49-63页
   ·最适碳源的确定第49-50页
   ·最适氮源的确定第50-51页
   ·最适K_2HPO_4含量的确定第51-52页
   ·响应面法优化产酶培养基第52-57页
     ·Box-behnken试验结果第52-53页
     ·二次回归模型建立及显著性分析第53-54页
     ·响应面法优化培养基第54-57页
   ·Z90-19产酶最适温度的确定第57页
   ·Z90-19产酶最适pH的确定第57-58页
   ·Z90-19产酶最适接种量的确定第58-59页
   ·响应面法优化产酶条件第59-63页
     ·发酵产酶二次多项式模型方程建立第59-61页
     ·响应面法优化培养条件第61-63页
 4 讨论第63-65页
第七章 总结创新点及下一步工作计划第65-67页
 1 总结第65页
 2 创新点第65-66页
 3 下一步工作计划第66-67页
参考文献第67-70页
致谢第70-71页
作者简介第71页

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