转GL融合蛋白基因水稻非预期成分分析与谷蛋白急性毒理研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 前言 | 第7-21页 |
| 1 转基因水稻的蛋白改良和毒理学评价 | 第7-15页 |
| ·稻米营养品质的评价与改良 | 第7-9页 |
| ·稻米营养品质的评价 | 第7页 |
| ·稻米的蛋白组成及稻米营养品质的改良 | 第7-8页 |
| ·转营养基因水稻的情况及营养成分 | 第8-9页 |
| ·稻米蛋白营养品质的改良方法 | 第9页 |
| ·基因育种 | 第9页 |
| ·分子标记辅助育种 | 第9页 |
| ·目的基因导入的方法 | 第9-11页 |
| ·基因枪法 | 第10页 |
| ·农杆菌接种法 | 第10-11页 |
| ·诱导法 | 第11页 |
| ·电击法 | 第11页 |
| ·转基因食品的安全性评价 | 第11-14页 |
| ·转基因食品的非预期性成分分析 | 第11-12页 |
| ·转基因食品的毒理学评价 | 第12页 |
| ·急性毒理评价 | 第12-13页 |
| ·致畸性评价 | 第13页 |
| ·亚慢性毒理学评价 | 第13-14页 |
| ·免疫毒理学评价 | 第14页 |
| ·外源基因漂移问题 | 第14-15页 |
| ·结语与展望 | 第15页 |
| 2 研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| ·课题背景 | 第15页 |
| ·课题材料介绍 | 第15页 |
| ·研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 3 研究方案 | 第16-18页 |
| ·研究目标 | 第16页 |
| ·研究内容 | 第16页 |
| ·研究方法 | 第16-18页 |
| ·非预期成分分析 | 第16页 |
| ·目标谷蛋白的提取 | 第16-17页 |
| ·大米蛋白质等电点(pI)的确定 | 第17页 |
| ·谷蛋白的大量提取 | 第17页 |
| ·小鼠急性经口毒性实验 | 第17-18页 |
| 参考文献 | 第18-21页 |
| 第一章 转GL基因水稻非预期成分分析 | 第21-34页 |
| 1 材料与方法 | 第22-25页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·试验试剂 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-25页 |
| ·水稻种子总蛋白质提取 | 第22页 |
| ·双向凝胶电泳 | 第22-24页 |
| ·蛋白质样品准备 | 第22页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第22-23页 |
| ·等电聚焦电泳 | 第23页 |
| ·胶条平衡 | 第23-24页 |
| ·第二向垂直平板SDS-PAGE电泳 | 第24页 |
| ·凝胶染色 | 第24-25页 |
| ·图像采集分析及差异点切取 | 第25页 |
| ·蛋白胶内酶解及质谱鉴定 | 第25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-30页 |
| ·水稻种子总蛋白的双向电泳分析 | 第25-28页 |
| ·差异表达蛋白点的质谱鉴定 | 第28-30页 |
| 3 讨论 | 第30-32页 |
| ·参与糖代谢和淀粉合成的蛋白 | 第31页 |
| ·参与蛋白质生物合成的蛋白 | 第31-32页 |
| ·其它代谢及胁迫相关蛋白 | 第32页 |
| 4 结论 | 第32页 |
| 参考文献 | 第32-34页 |
| 第二章 转GL基因水稻谷蛋白的提取 | 第34-40页 |
| 1 试验材料与仪器 | 第34-35页 |
| ·试验材料 | 第34-35页 |
| ·主要试验仪器 | 第35页 |
| ·试验试剂 | 第35页 |
| 2 试验方法 | 第35-37页 |
| ·稻米谷蛋白碱提工艺流程 | 第35-36页 |
| ·转GL基因稻米谷蛋白的提取 | 第36页 |
| ·转GL基因稻米谷蛋白等电点(pI)的确定 | 第36-37页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-38页 |
| ·转GL基因稻米谷蛋白等电点的确定 | 第37-38页 |
| 4 结论 | 第38页 |
| 参考文献 | 第38-40页 |
| 第三章 转GL基因稻米谷蛋白急性经口毒性实验 | 第40-52页 |
| 1 试验材料与仪器设备 | 第41页 |
| ·试验材料 | 第41页 |
| ·稻米谷蛋白 | 第41页 |
| ·试验动物 | 第41页 |
| ·试验试剂 | 第41页 |
| ·仪器与设备 | 第41页 |
| 2 试验方法 | 第41-43页 |
| ·试验分组 | 第41-42页 |
| ·小鼠中毒表现观察项目 | 第42-43页 |
| ·小鼠血常规的测定 | 第43页 |
| ·小鼠脏器系数的测定 | 第43页 |
| ·小鼠病理组织学检查 | 第43页 |
| ·数据处理 | 第43页 |
| 3 试验结果与分析 | 第43-50页 |
| ·小鼠一般情况 | 第43-44页 |
| ·小鼠表观行为与体症观察结果 | 第44页 |
| ·ICR小鼠体重增长 | 第44-46页 |
| ·半致死量(LD50)的确定 | 第46页 |
| ·血常规测定结果 | 第46-47页 |
| ·脏器系数测定结果 | 第47-48页 |
| ·小鼠组织病理学检查结果 | 第48-50页 |
| 4 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 攻读硕士期间发表论文情况 | 第53-54页 |
