| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 縮略词表 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-41页 |
| ·大肠杆菌不同系列的特点和应用 | 第15-21页 |
| ·大肠杆菌的不同系列 | 第15-17页 |
| ·大肠杆菌K-12系列与B系列菌株的差异—基因水平 | 第17-18页 |
| ·大肠杆菌K-12系列与B系列菌株的差异—代谢水平 | 第18-21页 |
| ·大肠杆菌K-12系列与B系列菌株的应用前景 | 第21页 |
| ·大肠杆菌的代谢与调控 | 第21-29页 |
| ·大肠杆菌的中心碳代谢 | 第21-23页 |
| ·ptsG基因在全局代谢调控中的作用 | 第23-26页 |
| ·核黄素的作用及在大肠杆菌中的合成途径 | 第26-29页 |
| ·~(13)C标记的代谢流分析 | 第29-41页 |
| ·~(13)C标记的代谢流分析简介 | 第29-31页 |
| ·GC-MS功能简介 | 第31-33页 |
| ·~(13)C标记的代谢流分析的数据处理原理 | 第33-41页 |
| ·关键节点的代谢流量比例计算方法 | 第33-38页 |
| ·全局代谢流量分布情况 | 第38-41页 |
| 第二章 BL21和MG1655好氧情况下的代谢比较 | 第41-59页 |
| ·导言 | 第41-42页 |
| ·实验材料与方法 | 第42-50页 |
| ·实验材料 | 第42-45页 |
| ·菌株和质粒 | 第42页 |
| ·培养基 | 第42-43页 |
| ·常用试剂盒 | 第43-44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·分子生物学常用工具酶 | 第44-45页 |
| ·常用溶液的配置 | 第45-46页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳相关试剂配制 | 第45页 |
| ·SDS-PAGE有关溶液的配制 | 第45-46页 |
| ·感受态细胞用CaCl_2溶液 | 第46页 |
| ·仪器和设备 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-50页 |
| ·培养条件 | 第47页 |
| ·分析方法 | 第47页 |
| ·~(13)C标记的代谢流分析的实验方法 | 第47-48页 |
| ·好氧代谢流分析计算方法 | 第48-49页 |
| ·细菌全基因组RNA提取办法及反转录方法 | 第49-50页 |
| ·实验结果 | 第50-56页 |
| ·生长情况 | 第50-51页 |
| ·代谢产物分布比较 | 第51-52页 |
| ·关键节点的代谢流比例 | 第52-53页 |
| ·全局代谢流分布比较 | 第53-54页 |
| ·ptsG基因在BL21中的敲除 | 第54-55页 |
| ·ptsG基因对BL21和MG1655代谢的影响 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| ·本章小结 | 第58-59页 |
| 第三章 BL21核黄素积累的相关机理研究 | 第59-72页 |
| ·导言 | 第59页 |
| ·实验材料与方法 | 第59-62页 |
| ·实验材料 | 第59-61页 |
| ·菌株和质粒 | 第59-60页 |
| ·测定RibF酶活的反应体系 | 第60-61页 |
| ·实验方法 | 第61-62页 |
| ·培养条件 | 第61页 |
| ·分析方法 | 第61页 |
| ·RibF蛋白表达及酶活测定方法 | 第61-62页 |
| ·质粒pRibbhis和pRibmhis的构建过程 | 第62页 |
| ·实验结果 | 第62-69页 |
| ·核黄素的发现与鉴定 | 第62-65页 |
| ·核黄素在BL21和MG1655中的分泌曲线 | 第65-66页 |
| ·核黄素的积累对细胞内FAD水平的影响 | 第66页 |
| ·培养基外添核黄素对MG1655生长和代谢的影响 | 第66-67页 |
| ·核黄素产生的原因研究 | 第67-69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| ·本章小结 | 第71-72页 |
| 第四章 BL21和MG1655的厌氧代谢情况比较 | 第72-82页 |
| ·导言 | 第72页 |
| ·材料与方法 | 第72-75页 |
| ·实验材料 | 第72-74页 |
| ·菌株和质粒 | 第72-73页 |
| ·一步等温法组装体系的配制 | 第73-74页 |
| ·实验方法 | 第74-75页 |
| ·培养条件 | 第74页 |
| ·分析方法 | 第74页 |
| ·一步等温法构建质粒pCtB的过程 | 第74-75页 |
| ·实验结果 | 第75-80页 |
| ·生长情况 | 第75-76页 |
| ·代谢流分布比较 | 第76-77页 |
| ·ptsG基因的敲除对BL21和MG1655厌氧代谢的影响 | 第77-78页 |
| ·pCtB的构建 | 第78-79页 |
| ·表达pflB后对BL21代谢的影响 | 第79-80页 |
| ·讨论 | 第80-81页 |
| ·本章小结 | 第81-82页 |
| 全文总结 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第91-92页 |
| 附件 | 第92页 |
