| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-19页 |
| ·木聚糖 | 第13页 |
| ·木聚糖酶的概述 | 第13-14页 |
| ·木聚糖酶的分类 | 第13-14页 |
| ·木聚糖酶的分子结构 | 第14页 |
| ·真菌来源的的木聚糖酶基因的克隆和表达的研究进展 | 第14-15页 |
| ·木聚糖酶的应用 | 第15-16页 |
| ·在饲料行业的应用 | 第15-16页 |
| ·在造纸行业的应用 | 第16页 |
| ·在其他方面的应用 | 第16页 |
| ·木聚糖酶的基因工程和蛋白质工程研究进展 | 第16-17页 |
| ·毕赤酵母表达系统 | 第17页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第17-19页 |
| 第二章 瓶霉 G5 来源的木聚糖酶基因xyn10G5 和xyn11G5 的克 | 第19-39页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·菌株和质粒 | 第19页 |
| ·引物合成与核酸序列测序 | 第19页 |
| ·工具酶，试剂盒和生化试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·培养基和常用溶液 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-28页 |
| ·瓶霉Phialophora sp. G5 菌株基因组DNA 的提取 | 第20页 |
| ·木聚糖酶基因同源克隆及简并引物的设计 | 第20页 |
| ·木聚糖酶基因片段的获得 | 第20-21页 |
| ·木聚糖酶基因完整序列的获得 | 第21-25页 |
| ·木聚糖酶cDNA 的克隆 | 第25-28页 |
| ·结果与讨论 | 第28-38页 |
| ·简并引物的设计和同源克隆 | 第28-29页 |
| ·木聚糖酶基因全长序列的获得 | 第29-31页 |
| ·木聚糖酶基因cDNA 的克隆 | 第31-32页 |
| ·两个木聚糖酶基因序列的分析 | 第32-38页 |
| ·讨论与小结 | 第38-39页 |
| 第三章 木聚糖酶基因xyn10G5和xyn11G5在毕赤酵母中的表达和纯 | 第39-52页 |
| ·实验材料 | 第39-40页 |
| ·质粒和菌株 | 第39页 |
| ·引物合成和核酸序列测定 | 第39页 |
| ·试剂盒，工具酶和化学试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·培养基和溶液 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-47页 |
| ·重组表达载体pPIC9- xyn10G5 和pPIC9- xyn10G5 的构建 | 第40-43页 |
| ·木聚糖酶基因xyn10G5 和xyn11G5 在毕赤酵母中的表达 | 第43-46页 |
| ·木聚糖酶活性的测定 | 第46页 |
| ·重组木聚糖酶XYN10G5 和XYN11G5 的纯化 | 第46-47页 |
| ·木聚糖酶XYN10G5 和XYN11G5 的质谱鉴定 | 第47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-50页 |
| ·重组表达载体 pPIC9- xyn10G5 和 pPIC9- xyn10G5 的构建 | 第47-48页 |
| ·木聚糖酶基因 xyn10G5 和 xyn11G5 在毕赤酵母中的表达 | 第48页 |
| ·重组木聚糖酶XYN10G5 和XYN11G5 的纯化 | 第48-50页 |
| ·讨论与小结 | 第50-52页 |
| 第四章 重组木聚糖酶 XYN10G5 和 XYN11G5 酶学性质的研究 | 第52-67页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·实验材料 | 第52页 |
| ·试剂盒、工具酶和生化试剂 | 第52页 |
| ·主要仪器 | 第52页 |
| ·主要溶液 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-55页 |
| ·最适pH 与pH 稳定性的测定 | 第52-53页 |
| ·最适温度与热稳定性的测定 | 第53页 |
| ·不同金属离子及化学试剂对酶活力的影响 | 第53页 |
| ·抗蛋白酶能力的测定 | 第53页 |
| ·底物特异性的测定 | 第53-54页 |
| ·比活的测定 | 第54页 |
| ·重组酶的Km值、Vmax 和kcat的测定 | 第54页 |
| ·产物分析 | 第54页 |
| ·木聚糖酶XYN10G5 在模拟人工胃液条件下水解能力的测定 | 第54-55页 |
| ·木聚糖酶XYN10G5 在模拟人工胃液条件下对大麦豆粕型饲料粘度的影响 | 第55页 |
| ·结果与分析 | 第55-65页 |
| ·最适pH 与pH 稳定性的测定 | 第55-56页 |
| ·最适温度与热稳定性的测定 | 第56-57页 |
| ·不同金属离子及化学试剂对酶活力的影响 | 第57-60页 |
| ·重组酶的抗蛋白酶能力测定 | 第60-62页 |
| ·底物特异性的测定 | 第62-63页 |
| ·重组酶比活的测定 | 第63页 |
| ·重组酶的K_m值、V_(max) 和k_(cat)的测定 | 第63页 |
| ·产物分析 | 第63-64页 |
| ·木聚糖酶XYN10G5 在模拟人工胃液条件下水解能力的测定 | 第64页 |
| ·木聚糖酶XYN10G5 在模拟人工胃液条件下对大麦豆粕型饲料粘度的影响 | 第64-65页 |
| ·讨论与小结 | 第65-67页 |
| 全文总结 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第76页 |
