| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 符号及缩略说明表 | 第15-16页 |
| 上篇 文献综述 | 第16-57页 |
| 第—章 水稻白叶枯病菌和水稻条斑病菌研究进展 | 第17-31页 |
| 1 Xoo和Xooc的发现及分类地位 | 第17页 |
| 2 Xoo和Xooc的病原物生物学研究 | 第17-18页 |
| 3 水稻白叶枯病和水稻条斑病的症状 | 第18-19页 |
| ·水稻白叶枯病的症状 | 第18页 |
| ·水稻条斑病的症状 | 第18-19页 |
| 4 水稻白叶枯病和水稻条斑病的病害循环 | 第19-20页 |
| ·水稻白叶枯病的病害循环 | 第19页 |
| ·水稻条斑病的病害循环 | 第19-20页 |
| 5 水稻白叶枯病和水稻条斑病的综合防治 | 第20-23页 |
| ·加强植物检疫工作,严格执行检疫制度 | 第20页 |
| ·选用抗病良种 | 第20页 |
| ·培育无病壮秧 | 第20页 |
| ·加强肥水管理 | 第20页 |
| ·生物防治 | 第20-21页 |
| ·化学防治 | 第21-23页 |
| ·种子处理剂 | 第21页 |
| ·化学药剂 | 第21-22页 |
| ·生物制剂 | 第22-23页 |
| 6 水稻白叶枯病菌和水稻条斑病菌遗传操作系统研究 | 第23-29页 |
| ·目的基因的插入突变体系 | 第23-24页 |
| ·转座子介导的基因突变体系 | 第24页 |
| ·无标记基因的缺失突变体系 | 第24-25页 |
| ·外源DNA向黄单胞菌转移的方式 | 第25页 |
| ·大片段基因组文库构建及应用 | 第25-29页 |
| ·基因组文库定义 | 第25-26页 |
| ·大片段基因组文库分类 | 第26页 |
| ·大片段基因组文库发展史 | 第26-27页 |
| ·大片段DNA文库的鉴定 | 第27-28页 |
| ·大片段DNA文库的应用 | 第28-29页 |
| 参考文献 | 第29-31页 |
| 第二章 噻枯唑杀细菌剂研究现状 | 第31-41页 |
| 1 噻枯唑的基本性质 | 第32-33页 |
| 2 噻枯唑的毒性、残留及降解 | 第33-34页 |
| 3 噻枯唑防治水稻白叶枯病研究现状 | 第34-36页 |
| ·水稻白叶枯病菌对噻枯唑的抗药性 | 第34-35页 |
| ·噻枯唑对水稻白叶枯病菌的作用机理研究 | 第35-36页 |
| 4 问题与展望 | 第36-38页 |
| 参考文献 | 第38-41页 |
| 第三章 链霉素作用机制及其抗性研究进展 | 第41-57页 |
| 1 链霉素的作用机制 | 第42-43页 |
| 2 链霉素抗性研究 | 第43-53页 |
| ·链霉素抗性菌株的出现和抗性监测 | 第43页 |
| ·氨基糖苷类抗生素的耐药性机制 | 第43-44页 |
| ·链霉素抗性机制研究进展 | 第44-48页 |
| ·核糖体结合位点的改变 | 第45-46页 |
| ·氨基糖苷类修饰酶的存在 | 第46-48页 |
| ·链霉素的残留检测方法 | 第48-50页 |
| ·理化检测方法 | 第48页 |
| ·生物学检测方法 | 第48-49页 |
| ·免疫检测方法 | 第49-50页 |
| ·氨基糖苷类抗生素的抗性分子检测研究 | 第50-53页 |
| ·PCR/UHG | 第50页 |
| ·探针检测LiPA(line probe assay) | 第50页 |
| ·错配分析(mismatch analysis) | 第50页 |
| ·变性梯度凝胶电泳(DGGE) | 第50-51页 |
| ·单链构象多态性(SSCP) | 第51页 |
| ·限制性片段长度多态性(RFLP) | 第51页 |
| ·RT-PCR | 第51页 |
| ·定量PCR | 第51页 |
| ·分子信标 | 第51-52页 |
| ·DNA序列测定 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 下篇 研究内容 | 第57-126页 |
| 第—章 水稻白叶枯病菌抗噻枯唑菌株粘粒基因组文库构建 | 第57-75页 |
| 1 材料与方法 | 第58-67页 |
| ·供试材料 | 第58-59页 |
| ·白叶枯病菌噻枯唑抗性菌株2-1-1基因组(DNA)的提取 | 第59-60页 |
| ·试剂 | 第59-60页 |
| ·提取步骤 | 第60页 |
| ·总DNA的部分酶切预试验 | 第60-61页 |
| ·总DNA不完全酶切,回收>23.13Kb片段(采用电洗脱法) | 第61-62页 |
| ·试剂 | 第61页 |
| ·透析袋处理 | 第61页 |
| ·回收方法 | 第61-62页 |
| ·粘粒(pUFR034)的提取、酶切和去磷酸化 | 第62-65页 |
| ·pUFR034的物理图谱 | 第62页 |
| ·pUFR034的提取(采用碱裂解法) | 第62-64页 |
| ·pUFR034的酶切 | 第64页 |
| ·pUFR034的去磷酸化 | 第64-65页 |
| ·粘粒(pUFR034)和外源片断的连接 | 第65页 |
| ·包装蛋白(BHB2688,BHB2690)的提取 | 第65-66页 |
| ·试剂 | 第65-66页 |
| ·提取步骤 | 第66页 |
| ·包装蛋白效价测定 | 第66-67页 |
| ·包装连接产物 | 第67页 |
| ·转化子的验证 | 第67页 |
| 2 结果与分析 | 第67-71页 |
| ·2-1-1的基因组提取 | 第67-68页 |
| ·2-1-1总DNA的部分酶切,并回收>23.13kb片断 | 第68-69页 |
| ·pUFR034粘粒提取(碱裂解法) | 第69页 |
| ·包装蛋白的提取,提取于溶源菌BHB2688、BHB2690 | 第69页 |
| ·成功构建抗噻枯唑白叶枯菌株2-1-1粘粒基因组文库 | 第69-70页 |
| ·基因文库的扩增 | 第70-71页 |
| ·重组质粒的保存 | 第71页 |
| ·文库克隆质量评价 | 第71页 |
| 3 讨论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-75页 |
| 第二章 粘粒基因组文库的活体筛选和基因分析 | 第75-89页 |
| 1 材料与方法 | 第76-77页 |
| ·供试材料 | 第76页 |
| ·供试菌株和药剂 | 第76页 |
| ·培养基及抗生素 | 第76页 |
| ·用两亲交配法进行基因文库互补 | 第76-77页 |
| ·两亲交配(接合)感受态细胞的制备 | 第76-77页 |
| ·黄单胞菌接合重组子的筛选 | 第77页 |
| ·克隆构建及DNA重组 | 第77页 |
| ·测序 | 第77页 |
| 2 结果与分析 | 第77-84页 |
| ·将文库每个克隆导入受体菌PX099 | 第77-79页 |
| ·两亲交配的接合频率 | 第79页 |
| ·具有互补抗药功能的克隆筛选 | 第79页 |
| ·酶切图谱的构建和亚克隆的筛选 | 第79-81页 |
| ·测序分析 | 第81-84页 |
| 3 讨论 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-89页 |
| 第三章 水稻白叶枯病菌和条斑病菌抗链霉素分子机理研究 | 第89-113页 |
| 1 材料与方法 | 第90-97页 |
| ·供试材料 | 第90页 |
| ·培养基及抗生素 | 第90-91页 |
| ·抗药突变体的诱导和致病性 | 第91-92页 |
| ·紫外诱变 | 第91页 |
| ·药剂驯服 | 第91页 |
| ·EC_(50)值的测定 | 第91-92页 |
| ·MIC的测定 | 第92页 |
| ·致病力的测定 | 第92页 |
| ·基因组提取(CTAB法) | 第92页 |
| ·PCR产物扩增及测序 | 第92页 |
| ·PCR产物克隆 | 第92-93页 |
| ·序列同源性分析 | 第93页 |
| ·粘粒的微量提取 | 第93-94页 |
| ·粘粒的转化 | 第94-95页 |
| ·电转化感受态细胞的制备 | 第94-95页 |
| ·电击穿孔转化步骤 | 第95页 |
| ·pUFR034表达载体重组粘粒的构建 | 第95-96页 |
| ·pUFR034的物理图谱 | 第95页 |
| ·外源片断的克隆 | 第95-96页 |
| ·外源片断的酶切 | 第96页 |
| ·载体pUFR034的酶切 | 第96页 |
| ·载体pUFR034的去磷酸化 | 第96页 |
| ·外源片断与载体的连接 | 第96页 |
| ·RpsL基因抗药功能验证 | 第96-97页 |
| ·抗药性功能 | 第96页 |
| ·与致病性的研究 | 第96-97页 |
| 2 结果与分析 | 第97-107页 |
| ·水稻条斑病菌对链霉素的诱导抗性、抗药性水平和致病力 | 第97-98页 |
| ·水稻白叶枯病菌对链霉素的诱导抗性、抗药性水平和致病力 | 第98-99页 |
| ·条斑病菌rpsL基因扩增及主要特征 | 第99页 |
| ·rpsL基因单位点突变与链霉素抗性的关系 | 第99-102页 |
| ·水稻条斑病菌rpsL基因与其它常见病原细菌同源性比较 | 第102页 |
| ·28种细菌rpsL基因的进化树 | 第102-104页 |
| ·粘粒载体pUFRRS和pUFRRX的构建 | 第104-105页 |
| ·PpsL抗药性功能 | 第105-106页 |
| ·致病力测定 | 第106-107页 |
| 3 讨论 | 第107-109页 |
| 参考文献 | 第109-113页 |
| 第四章 水稻白叶枯病菌、条斑病菌、大白菜软腐病菌以及柑橘溃疡病菌链霉素抗性基因rpsL的分子检测 | 第113-126页 |
| 1 材料与方法 | 第114-116页 |
| ·供试材料 | 第114页 |
| ·供试菌株及药剂 | 第114页 |
| ·培养基及抗生素 | 第114页 |
| ·NB液体培养基(培养水稻条斑病菌、白叶枯病菌、大白菜软腐病菌、柑橘溃疡病菌和番茄细菌性斑点病菌) | 第114页 |
| ·NA固体培养基 | 第114页 |
| ·抗药突变体的诱导 | 第114-115页 |
| ·基因组提取(小量快速提取) | 第115页 |
| ·PCR产物扩增 | 第115-116页 |
| ·PCR产物纯化 | 第116页 |
| ·PCR-RFLP | 第116页 |
| ·PCR产物测序 | 第116页 |
| 2 结果与分析 | 第116-123页 |
| ·水稻条斑病菌、白叶枯病菌、大白菜软腐病菌、柑橘溃疡病菌和番茄细菌性斑点病菌对链霉素的敏感性 | 第116-117页 |
| ·链霉素诱导抗性 | 第117-118页 |
| ·出发菌株与抗药突变体rpsL基因检测 | 第118-119页 |
| ·PCR-RFLP分析 | 第119-121页 |
| ·DNA测序分析 | 第121-123页 |
| 3 讨论 | 第123-125页 |
| 参考文献 | 第125-126页 |
| Detection of mutation at codon 43 of the rpsL gene in Xoo、Xooc、Ec and Xac by PCR-RFLP | 第126-127页 |
| 全文小结 | 第127-129页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文(第一作者) | 第129-131页 |
| 致谢 | 第131页 |
