摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略语 | 第8-10页 |
1 文献综述 | 第10-16页 |
·链霉菌简介 | 第10-11页 |
·链霉菌分化发育生物学 | 第11-12页 |
·抗生素合成途径 | 第12-13页 |
·课题相关背景介绍 | 第13-15页 |
·本研究的工作基础、目的和意义 | 第15-16页 |
2 材料与方法 | 第16-32页 |
·菌株和质粒 | 第16-18页 |
·菌株 | 第16页 |
·质粒 | 第16-18页 |
·引物 | 第18-19页 |
·培养基和化学试剂 | 第19-22页 |
·抗生素及其使用浓度 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-32页 |
·链霉菌培养及菌种保藏 | 第22-23页 |
·碱裂解法提取大肠杆菌质粒DNA | 第23页 |
·DNA溶液中蛋白质及RNA的去除 | 第23页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法)及转化 | 第23-24页 |
·PCR-Targeting技术中大肠杆菌电转化感受态制备及电转化 | 第24-25页 |
·DNA片段凝胶回收 | 第25页 |
·载体的去磷酸化 | 第25页 |
·酶连反应 | 第25-26页 |
·大肠杆菌质粒的快速检测 | 第26页 |
·PCR及相关技术 | 第26-27页 |
·质粒从大肠杆菌向链霉菌的两亲本接合转移 | 第27页 |
·链霉菌总DNA的提取 | 第27页 |
·Southern杂交 | 第27-28页 |
·天蓝色链霉菌钙依赖抗生素 | 第28-29页 |
·RNA基本操作 | 第29-32页 |
3 结果与分析 | 第32-52页 |
·PCR-Targeting技术基本原理 | 第32-33页 |
·基因SCO1593功能的研究 | 第33-35页 |
·基因SCO1593简介 | 第33-34页 |
·基因SCO1593中断质粒的构建 | 第34页 |
·天蓝色链霉菌A3(2)M145菌株中SCO1593基因的中断 | 第34-35页 |
·基因nsdB功能的研究 | 第35-49页 |
·基因nsdB简介 | 第35-36页 |
·基因nsdB中断质粒的构建 | 第36-37页 |
·天蓝色链霉菌A3(2)M145菌株中nsdB基因的中断 | 第37-39页 |
·nsdB基因互补质粒pHL422的构建 | 第39-40页 |
·nsdB基因中断菌株及互补菌株放线紫红素产量的检测 | 第40-41页 |
·nsdB基因中断菌株及互补菌株CDA产量的检测 | 第41-42页 |
·用RT-PCR检测不同时间nsdB表达的规律 | 第42-43页 |
·nsdA和nsdB基因间的相互作用 | 第43-44页 |
·将nsdB基因引入nsdA基因中断菌株LW9的载体构建 | 第44-46页 |
·基因间相互作用菌株表型观察 | 第46-48页 |
·RT-PCR分析两个基因间的关系 | 第48-49页 |
·含类TPR结构的蛋白的生物信息学分析 | 第49-52页 |
4 总结与展望 | 第52-54页 |
·总结 | 第52-53页 |
·展望 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
致谢 | 第60页 |