中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-8页 |
引言 | 第8-10页 |
一、研究背景和立题依据 | 第8页 |
二、本文的研究内容和意义 | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-22页 |
一、酪氨酸磷酸酶 | 第10-16页 |
(一) PTPases 的分类和特性 | 第10-11页 |
(二) PTPs的调控 | 第11-12页 |
(三) PTPs调控细胞信号途径 | 第12-13页 |
(四) PTPs的肿瘤抑制作用 | 第13-15页 |
(五) 原癌PTPs | 第15-16页 |
二、受体型蛋白酪氨酸磷酸酶O | 第16-18页 |
(一) PTPRO与肾小球功能的关系 | 第17页 |
(二) PTPRO在神经组织发育中的作用 | 第17页 |
(三) PTPRO抑制增殖和维持分化的性能 | 第17-18页 |
(四) PTPRO在肿瘤中的潜在作用 | 第18页 |
三、细胞周期调控和肿瘤 | 第18-22页 |
(一) 细胞周期及其调控概述 | 第18-19页 |
(二) 细胞周期调控因子 | 第19-22页 |
第二章 实验材料和方法 | 第22-29页 |
一、实验材料 | 第22页 |
(一) 细胞系及培养试剂 | 第22页 |
(二) 质粒 | 第22页 |
(三) 实验设备及仪器 | 第22页 |
二、实验方法 | 第22-29页 |
(一) 分子克隆 | 第22页 |
(二) DNA的琼脂糖电泳 | 第22页 |
(三) 质粒的大量制备 | 第22-24页 |
(四) 哺乳动物细胞培养 | 第24页 |
(五) 磷酸钙瞬时转染 | 第24-25页 |
(六) 脂质体转染 | 第25页 |
(七) 荧光素酶分析 | 第25页 |
(八) 细胞周期同步化 | 第25-26页 |
(九) 流式细胞术分析 | 第26页 |
(十) 哺乳动物细胞总RNA的提取 | 第26-27页 |
(十一) 逆转录PCR | 第27页 |
(十二) Real-Time PCR反应 | 第27-29页 |
第三章 实验结果与分析 | 第29-35页 |
一、PTPRO的表达具有周期性,在G1/S期上调 | 第29-30页 |
(一) 细胞周期同步化 | 第29-30页 |
(二) 检测PTPRO的表达情况 | 第30页 |
二、PTPRO能够被E2F1 转录激活 | 第30-32页 |
(一) 对PTPRO启动子上潜在的E2F1 结合位点的分析 | 第30-31页 |
(二) Real-time PCR检测外源过表达 E2F1 对内源PTPRO的表达的影响 | 第31页 |
(三) 荧光素酶报告基因实验检测外源过表达 E2F1 对PTPRO转录水平的影响 | 第31-32页 |
三、PTPRO对细胞周期相关基因的影响 | 第32-33页 |
四、PTPRO对p73 和p21 的影响 | 第33-35页 |
第四章 讨论 | 第35-37页 |
一、PTPRO的表达表现出周期性,在G1/S期表达最高 | 第35页 |
二、PTPRO与细胞周期相关性研究 | 第35-37页 |
(一) PTPRO受E2F1 转录激活 | 第35-36页 |
(二) PTPRO对E2F1 靶基因cyclin E,cyclin A和p73,p21 的影响 | 第36-37页 |
第五章 结论 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-43页 |
致谢 | 第43页 |