| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 引言 | 第13-21页 |
| 第一章 微藻的筛选与鉴定 | 第21-38页 |
| 1. 材料与方法 | 第22-27页 |
| ·实验材料与试剂 | 第22页 |
| ·藻类分离与培养 | 第22-23页 |
| ·藻类的中性油脂染色方法 | 第23页 |
| ·显微镜下观察藻体细胞形态 | 第23页 |
| ·DNA 的提取与检测 | 第23-24页 |
| ·藻体rbcL 基因的扩增与 AT 克隆 | 第24-26页 |
| ·小球藻rbcL 基因的生物信息学分析 | 第26页 |
| ·藻体 ITS 基因的扩增与 AT 克隆 | 第26页 |
| ·小球藻 ITS 基因的生物信息学分析 | 第26-27页 |
| 2. 结果与分析 | 第27-36页 |
| ·微藻的中性油脂荧光染色结果与分析 | 第27-30页 |
| ·微藻形态观察结果与分析 | 第30页 |
| ·DNA 的提取结果 | 第30-31页 |
| ·rbcL 基因的PCR 扩增、AT 克隆及检测 | 第31-33页 |
| ·藻体的rbcL 序列分析 | 第33-34页 |
| ·藻体的 ITS 序列克隆 | 第34-35页 |
| ·藻体的 ITS 序列分析 | 第35-36页 |
| 3. 讨论 | 第36-38页 |
| 第二章：基因工程筛选标记的确定 | 第38-50页 |
| 第一节：不同浒苔对除草剂的抗性筛选 | 第38-42页 |
| 1. 材料与方法 | 第38-40页 |
| ·材料与藻种培养 | 第38页 |
| ·原生质体的获得 | 第38-39页 |
| ·原生质体的培养 | 第39页 |
| ·浒苔小苗对除草剂（Basta）的敏感性研究 | 第39页 |
| ·浒苔成体对除草剂（Basta）的敏感性研究 | 第39-40页 |
| 2 结果及分析 | 第40-41页 |
| ·浒苔小苗对除草剂（Basta）的敏感性研究 | 第40页 |
| ·浒苔成体对除草剂（Basta）的敏感性研究 | 第40-41页 |
| 3. 讨论 | 第41-42页 |
| 第二节：原始小球藻基因工程筛选标记的确定 | 第42-50页 |
| 1. 材料与方法 | 第42-43页 |
| ·材料与藻种培养 | 第42页 |
| ·原始小球藻的生长实验 | 第42页 |
| ·原始小球藻对6 种抗生素的敏感性的测定 | 第42页 |
| ·原始小球藻对氯霉素和除草剂（Basta）的敏感性研究 | 第42-43页 |
| ·不同浓度除草剂（Basta）对原始小球藻相对存活率的影响 | 第43页 |
| 2 结果及分析 | 第43-48页 |
| ·原始小球藻的生长曲线 | 第43页 |
| ·六种抗生素对原始小球藻生长的影响 | 第43-44页 |
| ·氯霉素和除草剂对原始小球藻生长的影响 | 第44-48页 |
| ·不同浓度除草剂（Basta）对原始小球藻相对存活率的影响 | 第48页 |
| 3. 讨论 | 第48-50页 |
| 第三章：工程藻株转化体系的建立 | 第50-57页 |
| 1. 材料与方法 | 第51-52页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·藻类培养 | 第51页 |
| ·长石莼（缘管浒苔）原生质体制备 | 第51页 |
| ·长石莼（缘管浒苔）原生质体的 PEG 法转化 | 第51-52页 |
| ·转化长石莼（缘管浒苔）原生质体筛选 | 第52页 |
| ·长石莼（缘管浒苔）转基因植株 PCR 检测 | 第52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-55页 |
| ·酶解 | 第52-53页 |
| ·长石莼（缘管浒苔）原生质体PEG 转化方法优化 | 第53-54页 |
| ·转化植株筛选与 PCR 检测 | 第54-55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| 第四章 原始小球藻 PEPC（磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶）基因的克隆与表达 | 第57-69页 |
| 1. 材料与方法 | 第58-62页 |
| ·实验材料与试剂 | 第58页 |
| ·藻类培养 | 第58页 |
| ·原始小球藻总 RNA 的提取 | 第58-59页 |
| ·原始小球藻cDNA 合成 | 第59-60页 |
| ·原始小球藻 PEPC 基因部分序列的克隆 | 第60页 |
| ·原始小球藻 PEPC 基因序列生物信息分析 | 第60-61页 |
| ·原始小球藻 PEPC 基因原核表达载体的构建 | 第61页 |
| ·pGEX-4T-1-PEPC 基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第61页 |
| ·PEPC 酶活性检测 | 第61-62页 |
| ·大肠杆菌总蛋白、总脂的提取与分析 | 第62页 |
| 2. 结果 | 第62-67页 |
| ·RNA 提取的结果 | 第62-63页 |
| ·PEPC 基因克隆产物的AT 克隆与测序 | 第63页 |
| ·PEPC 基因核苷酸序列系统树建立 | 第63-64页 |
| ·PEPC 氨基酸序列系统树建立 | 第64-65页 |
| ·原始小球藻 PEPC 基因原核表达载体的构建 | 第65-66页 |
| ·pGEX-4T-1-PEPC 基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第66-67页 |
| ·PEPC 酶活性检测 | 第67页 |
| ·大肠杆菌总蛋白、总脂的提取与分析 | 第67页 |
| 3. 讨论 | 第67-69页 |
| 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-79页 |
| 附录 | 第79-81页 |
| 攻读硕士学位期间科研工作情况 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
