金鱼Tgf2转座子的研究及其转基因应用
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 引言 | 第10-15页 |
| 第一章 金鱼Tgf2 转座酶基因的克隆及表达分析 | 第15-30页 |
| ·材料、仪器与试剂 | 第15-16页 |
| ·实验材料 | 第15页 |
| ·主要仪器 | 第15-16页 |
| ·主要试剂 | 第16页 |
| ·方法 | 第16-22页 |
| ·引物设计 | 第16-17页 |
| ·RNA 提取 | 第17页 |
| ·RT-PCR | 第17-18页 |
| ·RACE | 第18-19页 |
| ·电泳检测与目的片段回收 | 第19-20页 |
| ·连接与转化 | 第20页 |
| ·重组子鉴定 | 第20页 |
| ·原位杂交 | 第20-22页 |
| ·结果 | 第22-29页 |
| ·小片段扩增与序列比较 | 第22页 |
| ·转座酶基因cDNA 全长及序列分析 | 第22-27页 |
| ·转座酶表达的研究 | 第27-29页 |
| ·讨论 | 第29-30页 |
| 第二章 金鱼基因组中Tgf2 转座子的多态性 | 第30-37页 |
| ·材料、仪器与试剂 | 第30-31页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30-31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-33页 |
| ·引物设计 | 第31页 |
| ·DNA 提取 | 第31-32页 |
| ·PCR 扩增 | 第32页 |
| ·电泳检测与目的片段回收 | 第32-33页 |
| ·连接与转化 | 第33页 |
| ·重组子鉴定 | 第33页 |
| ·结果 | 第33-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 Tgf2 转基因系统的构建及转基因研究 | 第37-51页 |
| ·材料、仪器与试剂 | 第37-38页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37-38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-44页 |
| ·引物设计 | 第38-39页 |
| ·RNA 和DNA 提取 | 第39-40页 |
| ·PCR 扩增 | 第40页 |
| ·电泳检测与目的片段回收 | 第40-41页 |
| ·连接与转化 | 第41-42页 |
| ·重组子鉴定 | 第42页 |
| ·双酶切与质粒重组 | 第42-43页 |
| ·显微注射 | 第43-44页 |
| ·PCR 检测 | 第44页 |
| ·结果 | 第44-49页 |
| ·转基因系统 | 第44-46页 |
| ·胚胎期的荧光观察 | 第46-47页 |
| ·转基因阳性个体的PCR 检测 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 结论与展望 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 附录 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
