| 第一章 前言 | 第1-27页 |
| 1 经济价值和用途 | 第9-11页 |
| ·木薯的饲料用途 | 第9-10页 |
| ·木薯的食用价值 | 第10页 |
| ·木薯是重要的工业原料 | 第10页 |
| ·木薯是一种可再生的资源 | 第10-11页 |
| 2 木薯的科研现状 | 第11-14页 |
| ·木薯种质资源的收集、保存和利用 | 第12页 |
| ·遗传育种研究 | 第12-13页 |
| ·栽培技术研究 | 第13-14页 |
| ·加工利用研究 | 第14页 |
| 3 转基因植物育种现状 | 第14-16页 |
| 4 双子叶植物的遗传转化 | 第16-23页 |
| ·双子叶植物遗传转化的受体系统 | 第16页 |
| ·双子叶植物遗传转化的受体的再生系统及特性 | 第16-17页 |
| ·愈伤组织再生系统 | 第16页 |
| ·直接分化再生系统 | 第16-17页 |
| ·胚状体再生系统 | 第17页 |
| ·生殖细胞再生系统 | 第17页 |
| ·原生质体再生系统 | 第17页 |
| ·双子叶植物遗传转化的载体系统 | 第17-18页 |
| ·病毒载体系统 | 第17-18页 |
| ·农杆菌质粒载体系统 | 第18页 |
| ·转基因植物的构建方法 | 第18-22页 |
| ·农杆菌介导的转化法 | 第18-22页 |
| ·基因枪轰击法 | 第22页 |
| ·花粉管导入法 | 第22页 |
| ·转基因植物中外源基因的遗传行为 | 第22-23页 |
| ·外源基因在后代(T_0)植物中的遗传多样性 | 第23页 |
| 5 植酸酶PHYA基因 | 第23-26页 |
| ·植酸酶基因工程 | 第24页 |
| ·植酸酶的应用前景 | 第24-26页 |
| ·提高植酸P利用率降低环境污染 | 第25页 |
| ·解除植酸盐的抗营养作用，提高饲料中矿质元素和蛋白质的利用率，提高动物的生产性能 | 第25-26页 |
| ·在食品工业中的应用 | 第26页 |
| 6 本研究工作的范围和意义 | 第26-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-46页 |
| 1 试验材料 | 第27-28页 |
| ·木薯材料 | 第27页 |
| ·细菌菌株种类 | 第27-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-46页 |
| ·主要实验仪器和器皿 | 第28-29页 |
| ·培养基及其溶液的种类与组成 | 第29-31页 |
| ·细菌培养基 | 第29-30页 |
| ·木薯组织培养和转化的培养基 | 第30-31页 |
| ·溶液的配制 | 第31页 |
| ·抗生素的配制~([70]) | 第31页 |
| ·乙酰丁香酮的配制 | 第31页 |
| ·木薯生长调节剂的种类与配制 | 第31页 |
| ·培养基条件及菌种保存 | 第31-32页 |
| ·木薯培养条件 | 第31-32页 |
| ·细菌培养条件 | 第32页 |
| ·菌种保存 | 第32页 |
| ·木薯无菌苗的培养 | 第32-33页 |
| ·木薯腋芽(顶芽)的取材 | 第32页 |
| ·消毒灭菌 | 第32-33页 |
| ·木薯无菌苗的诱导 | 第33页 |
| ·基因的克隆及分子操作 | 第33-40页 |
| ·常用溶液及缓冲液 | 第33-34页 |
| ·米曲霉总DNA的提取与纯化 | 第34-35页 |
| ·快速碱裂解法少量提取质粒DNA | 第35页 |
| ·质粒DNA的大量提取 | 第35-36页 |
| ·引物设计 | 第36-37页 |
| ·内切酶反应与连接反应 | 第37页 |
| ·PCR反应 | 第37-38页 |
| ·凝胶电泳 | 第38页 |
| ·DNA片段浓度、大小测算 | 第38-39页 |
| ·从凝胶中回收目的DNA片段 | 第39页 |
| ·JM109感受态细胞的制备 | 第39页 |
| ·电脉冲转化 | 第39-40页 |
| ·用三亲结合的方法向农杆菌导入目的质粒 | 第40页 |
| ·转基因木薯植株的获得 | 第40-46页 |
| ·根癌农杆菌的培养 | 第41页 |
| ·预培养 | 第41页 |
| ·共培养 | 第41页 |
| ·筛选培养 | 第41页 |
| ·抗性植株壮苗、炼苗及移栽 | 第41-42页 |
| ·木薯的分子检测 | 第42-46页 |
| 第三章 结果与分析 | 第46-67页 |
| 1 植酸酶基因片段的获得及测定 | 第46-48页 |
| ·植酸酶基因片段PCR扩增 | 第46页 |
| ·植酸酶基因的测序结果 | 第46-48页 |
| 2 植物表达载体的构建 | 第48-51页 |
| ·将植酸酶基因克隆到表达载体P81121中 | 第48-51页 |
| 3 根癌农杆菌介导的木薯转化的主要条件的确定 | 第51-59页 |
| ·木薯无菌苗的培养 | 第51-58页 |
| ·非不定途径诱导木薯的培养基最佳浓度的确定 | 第51-54页 |
| ·不定途径诱导木薯的培养基最佳浓度的确定 | 第54-58页 |
| ·不同浓度Amp对农杆菌生长的影响 | 第58页 |
| ·木薯外植体对卡那霉素的敏感性 | 第58-59页 |
| 4 植酸酶基因对木薯的转化及再生 | 第59-63页 |
| ·外植体的制备 | 第59-60页 |
| ·对木薯的转化和筛选 | 第60页 |
| ·拟转基因植株的获得 | 第60-63页 |
| 5 转化效率分析 | 第63页 |
| 6 木薯植株的分子鉴定 | 第63-67页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第63-66页 |
| ·转基因植株的Southern检测 | 第66-67页 |
| 第四章 讨论 | 第67-71页 |
| 1 建立良好的木薯基因转化的受体系统 | 第67-68页 |
| 2 根癌农杆菌介导木薯遗传转化效率的影响 | 第68-69页 |
| ·要建立高效的离体培养和植株再生技术 | 第68页 |
| ·外植体的制备对转化的影响 | 第68-69页 |
| ·农杆菌的恰当使用对转化的影响 | 第69页 |
| ·拟转基因苗的筛选 | 第69页 |
| 3 用基因工程改良木薯的前景 | 第69-70页 |
| 4 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第76页 |