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嗜碱芽孢杆菌N16-5碱性甘露聚糖酶的研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
第一章 绪论第11-26页
   ·甘露聚糖与甘露聚糖酶第11-15页
     ·甘露聚糖第11-12页
     ·甘露聚糖酶系的组成及作用特点第12-15页
   ·β-甘露聚糖酶的来源第15-17页
     ·高等植物甘露聚糖酶第15-16页
     ·动物来源的甘露聚糖酶第16页
     ·微生物来源的甘露聚糖酶第16-17页
   ·甘露聚糖酶的分离纯化与表征第17-20页
     ·甘露聚糖酶的纯化第17-19页
     ·β-甘露聚糖酶的晶状结构第19-20页
     ·催化中心的氨基酸残基第20页
   ·β-甘露聚糖酶基因克隆第20-21页
     ·一级序列特征第20页
     ·催化域和结合域第20-21页
   ·β-甘露聚糖酶的生产第21-22页
   ·甘露聚糖酶的应用第22-24页
     ·饲料添加剂第23页
     ·在食品加工中应用第23页
     ·在甘露寡糖生产中的应用第23页
     ·造纸洗涤等行业中的应用第23-24页
   ·本论文的研究目的及意义第24-26页
第二章 碱湖嗜碱菌多样性分析及碱性甘露聚糖酶产生菌嗜碱芽孢杆菌N16-5 的筛选、鉴定第26-50页
   ·材料与方法第26-29页
     ·样品来源第26-27页
     ·培养基第27页
     ·菌株的分离纯化和保存第27页
     ·菌株的分类特征第27-28页
     ·碱湖沉积物中的165 rDNA 文库构建第28-29页
   ·结果与讨论第29-48页
     ·碱湖中细菌多样性的分子生态学研究第29-34页
     ·碱湖中微生物菌株的分离和分子发育系统分析第34-40页
     ·产水解酶的嗜碱菌多样性研究第40-44页
     ·碱性甘露聚糖酶产生菌――嗜碱菌N16-5 的特征第44-48页
   ·本章主要结论第48-50页
第三章 嗜碱芽孢杆菌N16-5 碱性甘露聚糖酶的发酵条件与粗酶性质第50-63页
   ·材料与方法第50-52页
     ·菌种第50页
     ·培养基及培养条件第50-51页
     ·粗酶的制备第51页
     ·粗酶性质的研究第51页
     ·N16-5 粗甘露聚糖酶对木聚糖的降解及产物分析第51-52页
     ·菌体生长测定第52页
     ·总糖的测定第52页
     ·还原糖的测定第52页
     ·谷氨酸钠的测定第52页
     ·甘露聚糖酶的活性测定第52页
   ·结果与讨论第52-62页
     ·菌株N16-5 产β-甘露聚糖酶的条件第52-55页
     ·16L 自控罐试验中菌株N16-5 甘露聚糖酶的发酵工艺研究第55-58页
     ·N16-5 碱性甘露聚糖酶的250L 及1000L 罐发酵试验第58-59页
     ·菌株N16-5 产甘露聚糖酶的性质第59-61页
     ·讨论第61-62页
   ·本章主要结论第62-63页
第四章 嗜碱芽孢杆菌N16-5 碱性甘露聚糖酶的纯化及酶学性质第63-70页
   ·材料与方法第63-64页
     ·菌种与粗酶的制备第63页
     ·主要仪器与试剂第63页
     ·蛋白质测定第63页
     ·电泳分析第63页
     ·N16-5 甘露聚糖酶对甘露聚糖降解产物的分析第63页
     ·甘露聚糖酶的活性测定第63-64页
   ·结果与讨论第64-69页
     ·碱性β-甘露聚糖酶的纯化第64-65页
     ·酶的基本性质第65-69页
   ·本章的主要结论第69-70页
第五章 嗜碱芽孢杆菌N16-5 碱性甘露聚糖酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达第70-83页
   ·材料与方法第70-71页
     ·菌株、质粒和培养方法第70页
     ·非变性胶活性电泳及N-末端氨基酸测序第70页
     ·基因克隆操作步骤第70-71页
     ·ManA 基因在毕赤酵母中的表达第71页
     ·甘露聚糖酶测定第71页
   ·结果与讨论第71-81页
     ·菌株N16-5 的β-甘露聚糖酶M1 的基本特性第71-72页
     ·甘露聚糖酶ManA(M1)基因的克隆及序列分析第72-74页
     ·ManA(M1)蛋白的一级结构分析第74-78页
     ·甘露聚糖酶ManA(M1)基因在毕氏酵母中的表达第78-81页
   ·本章的主要结论第81-83页
第六章 嗜碱芽孢杆菌N16-5 碱性甘露聚糖酶嗜碱性分子机制的初步研究第83-91页
   ·材料与方法第83-85页
     ·菌株、质粒和培养方法第83页
     ·碱性甘露聚糖酶基因的突变第83-84页
     ·碱性甘露聚糖酶活性的测定第84-85页
   ·结果与讨论第85-89页
     ·β-甘露聚糖酶氨基酸组成特征第85页
     ·酶基因C 末端酶切与活性分析第85页
     ·携带有最适pH 变化的突变型酶基因重组子的筛选结果第85-86页
     ·突变型酶蛋白质(ManAM)序列和与野生型酶(ManA)蛋白质序列比较结果第86-87页
     ·野生型甘露聚糖酶及其几种突变型甘露聚糖酶的特性比较第87-88页
     ·野生型甘露聚糖酶及其几种突变型甘露聚糖酶的预测三维结构的比较第88-89页
   ·本章主要结论第89-91页
第七章 嗜碱芽孢杆菌N16-5 碱性β-甘露聚糖酶的应用研究第91-102页
   ·材料与方法第91-93页
     ·菌种及酶的制备第91页
     ·酶法制备甘露寡糖的工艺第91-92页
     ·压裂液破胶评价第92-93页
   ·结果与讨论第93-100页
     ·酶法制备甘露寡糖小试工艺的研究第93-97页
     ·甘露寡糖酶法制备工艺的放大研究第97-99页
     ·石油压裂液的酶法破胶试验第99-100页
   ·本章主要结论第100-102页
论文的主要结论、创新点及展望第102-106页
参考文献第106-114页
致谢第114-115页
攻读博士论文期间取得与本论文相关的成绩第115页

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