| 第一章 前言 | 第1-34页 |
| Ⅰ 文献综述 | 第12-32页 |
| ·细胞色素P450 酶系与细胞色素P450 | 第12-20页 |
| ·细胞色素P450 酶系 | 第12页 |
| ·细胞色素P450 | 第12-14页 |
| ·细胞色素P450 的基因 | 第14-18页 |
| ·P450 的多样性 | 第18-20页 |
| ·昆虫P450 酶系的重要功能 | 第20-24页 |
| ·P450 酶系催化内源性物质代谢 | 第20-21页 |
| ·P450 酶系催化外源性物质代谢 | 第21-24页 |
| ·分离昆虫细胞色素P450 的方法 | 第24-25页 |
| ·通过蛋白纯化 | 第24页 |
| ·用已知的P450 基因做探针 | 第24-25页 |
| ·设计简并引物 | 第25页 |
| ·基因组测序 | 第25页 |
| ·差异或差减筛选 | 第25页 |
| ·棉铃虫P450 酶系 | 第25-28页 |
| ·棉铃虫P450 基因 | 第26页 |
| ·P450 蛋白的结构 | 第26-27页 |
| ·P450 与棉铃虫抗药性 | 第27-28页 |
| ·昆虫细胞色素P450 基因的异源表达 | 第28-30页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第28页 |
| ·杆状病毒介导的昆虫细胞表达系统 | 第28-29页 |
| ·酵母表达系统 | 第29-30页 |
| ·mRNA差异显示技术 | 第30-32页 |
| ·m RNA差异显示技术的原理 | 第30页 |
| ·DDRT-PCR 技术的优缺点及改进 | 第30-32页 |
| Ⅱ 本研究的立题依据及主要研究内容 | 第32-34页 |
| ·立题依据 | 第32-33页 |
| ·P450 重要的生物学意义 | 第32页 |
| ·棉铃虫的经济学意义 | 第32页 |
| ·棉铃虫细胞色素P450 的分子生物学研究薄弱 | 第32-33页 |
| ·本研究的主要内容 | 第33-34页 |
| 第二章 棉铃虫细胞色素P450 基因EST序列的获得 | 第34-48页 |
| ·材料与方法 | 第34-41页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-44页 |
| ·棉铃虫中肠组织中总RNA 提取 | 第41-42页 |
| ·mRNA差异显示分析 | 第42页 |
| ·目标片段的再次扩增 | 第42-43页 |
| ·目标条带的亚克隆 | 第43页 |
| ·DNA 片段的序列测定和分析 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-48页 |
| ·棉铃虫细胞色素P450 EST序列的获得 | 第44-45页 |
| ·P450 非简并特异性引物设计及其优点 | 第45页 |
| ·mRNA差异显示技术条件的优化 | 第45-47页 |
| ·染色技术 | 第47-48页 |
| 第三章 棉铃虫细胞色素P450 5′端CDNA基因的克隆 | 第48-62页 |
| ·材料与方法 | 第48-50页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-59页 |
| ·棉铃虫细胞色素P450 EST片段的5′RACE 扩增 | 第50页 |
| ·5′RACE片段的克隆 | 第50-51页 |
| ·棉铃虫细胞色素P450 5′端序列分析 | 第51-53页 |
| ·棉铃虫细胞色素P450 CYP9A17 cDNA 全序列分析 | 第53-55页 |
| ·棉铃虫细胞色素P450 CYP9A17 理化特性及二级结构预测分析 | 第55-56页 |
| ·棉铃虫CYP9A17 和其它细胞色素P450 的9 家族序列的相似性分析 | 第56-58页 |
| ·CYP9A17 的进化分析 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-62页 |
| ·5′RACE技术的应用 | 第59页 |
| ·棉铃虫细胞色素P450 CYP9A17 全长序列分析 | 第59-60页 |
| ·有关CYP9A17 推导的氨基酸的功能预测 | 第60-62页 |
| 第四章 棉铃虫细胞色素P450 CYP9A17 全长CDNA克隆的构建 | 第62-68页 |
| ·材料与方法 | 第62-63页 |
| ·材料 | 第62页 |
| ·方法 | 第62-63页 |
| ·结果与分析 | 第63-66页 |
| ·CYP9A17 全长cDNA的扩增 | 第63-64页 |
| ·目的片段的回收及鉴定 | 第64页 |
| ·目标片段的序列分析 | 第64-66页 |
| ·讨论 | 第66-68页 |
| 第五章 CYP9A17 在棉铃虫不同发育阶段的表达 | 第68-72页 |
| ·材料与方法 | 第68-69页 |
| ·材料 | 第68页 |
| ·实验方法 | 第68-69页 |
| ·结果与分析 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| 第六章 棉铃虫细胞色素P450 CYP6B7 基因的克隆和表达 | 第72-86页 |
| ·材料与方法 | 第72-76页 |
| ·材料 | 第72页 |
| ·实验方法 | 第72-76页 |
| ·结果与分析 | 第76-85页 |
| ·棉铃虫细胞色素P450 CYP6B7 基因的克隆 | 第76-81页 |
| ·棉铃虫CYP6B7 内含子的消除 | 第81-83页 |
| ·棉铃虫CYP6B7 在大肠杆菌中的表达 | 第83-85页 |
| ·讨论 | 第85-86页 |
| ·CYP6B7 基因的克隆 | 第85页 |
| ·有关CYP6B7 表达的研究 | 第85-86页 |
| 第七章 总结 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 作者简介 | 第98页 |
