| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-18页 |
| ·马铃薯病毒病概况 | 第10-11页 |
| ·马铃薯病毒的检测 | 第11-17页 |
| ·马铃薯病毒常规检测法 | 第11-12页 |
| ·免疫学检测法 | 第12-13页 |
| ·核酸斑点杂交技术(NASH) | 第13-14页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第14-16页 |
| ·实时荧光定量PCR检测技术 | 第16页 |
| ·基因芯片技术 | 第16-17页 |
| ·马铃薯病毒病分子检测试剂盒的研究与开发 | 第17-18页 |
| 第2章 引言 | 第18-19页 |
| 第3章 实验材料与方法 | 第19-28页 |
| ·供试材料 | 第19-21页 |
| ·毒源 | 第19页 |
| ·所用主要仪器设备及试剂 | 第19-20页 |
| ·常用缓冲液与抽提液配方 | 第20-21页 |
| ·方法 | 第21-28页 |
| ·毒源采集 | 第21页 |
| ·病毒RNA提取 | 第21-22页 |
| ·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第22-24页 |
| ·一步法RT-PCR和两步法RT-PCR检测法比较 | 第24页 |
| ·DAS-ELISA检测 | 第24页 |
| ·RT-PCR产物的克隆和测序 | 第24-26页 |
| ·PCR检测性能测定 | 第26-27页 |
| ·生物大分子固相稳定技术及马铃薯病毒分子检测试剂盒 | 第27页 |
| ·检测试剂储存稳定性试验 | 第27页 |
| ·马铃薯病毒病的实际检测 | 第27-28页 |
| 第4章 研究结果与分析 | 第28-42页 |
| ·马铃薯病毒的提取 | 第28-30页 |
| ·4种马铃薯病毒ssRNA提取方法比较 | 第28-29页 |
| ·浸提法制备病毒RNA的优化 | 第29-30页 |
| ·马铃薯病毒的两步法RT-PCR检测 | 第30-36页 |
| ·单重RT-PCR反应 | 第30-31页 |
| ·二重RT-PCR反应 | 第31-32页 |
| ·三重RT-PCR反应 | 第32-35页 |
| ·多重RT-PCR反应 | 第35-36页 |
| ·一步法RT-PCR检测马铃薯病毒 | 第36页 |
| ·单重RT-PCR反应 | 第36页 |
| ·二重和多重RT-PCR反应 | 第36页 |
| ·一步法RT-PCR和两步法RT-PCR检测法比较 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR扩增产物的克隆与测序 | 第37-38页 |
| ·PCR检测性能测定 | 第38-39页 |
| ·多重RT-PCR试剂固相化及实际运用 | 第39-42页 |
| 第5章 讨论 | 第42-49页 |
| ·马铃薯病毒RNA的制备 | 第42-43页 |
| ·两步法RT-PCR检测体系 | 第43-44页 |
| ·一步法RT-PCR与两步法RT-PCR检测体系的比较 | 第44页 |
| ·RT-PCR反应产物的克隆与测序 | 第44-45页 |
| ·检测体系的稳定性，特异性与灵敏度 | 第45-46页 |
| ·RT-PCR检测法与ELISA检测法比较 | 第46-47页 |
| ·固相化分子检测试剂盒及实际检测应用 | 第47-48页 |
| ·常规RT-PCR，定量RT-PCR和基因芯片检测法的比较 | 第48-49页 |
| 结论与展望 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 附录 | 第55-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 发表论文及参加课题 | 第66页 |
