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α-醇溶蛋白与小麦育种

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
符号说明第10-11页
第一章 前言第11-23页
   ·小麦种子储藏蛋白的组成及分类第11-13页
   ·小麦醇溶蛋白的染色体定位第13页
   ·α-醇溶蛋白基因的克隆及其结构第13-14页
   ·α-醇溶蛋白与乳糜泻疾病(CD)的关系第14-17页
   ·α-醇溶蛋白与小麦育种第17-18页
   ·小麦品质改良的研究现状第18-22页
   ·本研究的目的和意义第22-23页
第二章 二倍体长穗偃麦草和老芒麦α-醇溶蛋白基因的克隆与序列分析第23-38页
   ·材料与方法第23-28页
     ·植物材料第23页
     ·二倍体长穗偃麦草和老芒麦α-醇溶蛋白基因ORFs的克隆和测序第23-28页
       ·植物叶片DNA的提取第23-24页
       ·α-醇溶蛋白基因的基因组PCR扩增第24-25页
       ·PCR产物的克隆第25-27页
       ·阳性转化子的菌落PCR筛选第27-28页
       ·α-醇溶蛋白基因的序列分析第28页
       ·α-醇溶蛋白基因碱基突变分析第28页
   ·实验结果第28-36页
     ·二倍体长穗偃麦草和老芒麦α-醇溶蛋白基因分离和序列分析第28-30页
     ·基于α-醇溶蛋白基因推导的氨基酸序列的特点第30-33页
     ·乳糜泻抗原决定簇位点分析第33-34页
     ·α-醇溶蛋白基因的进化关系第34-36页
   ·讨论第36-38页
     ·α-醇溶蛋白基因组成、拷贝数和复杂性第36-37页
     ·从获得α-醇溶蛋白基因序列看其与十倍体长穗偃麦草的进化关系第37-38页
第三章 小麦体细胞杂种渐渗系11-12中α-醇溶蛋白基因的分子鉴定与来源研究第38-51页
   ·材料与方法第38-39页
     ·植物材料第38页
     ·体细胞杂种11-12中醇溶蛋白的A-PAGE分析第38-39页
     ·α-醇溶蛋白基因ORFs的克隆和测序第39页
     ·所获得α-醇溶蛋白的基因序列分析第39页
     ·α-醇溶蛋白基因碱基突变分析第39页
   ·结果第39-48页
     ·杂种中11-12中醇溶蛋白A-PAGE结果第39-40页
     ·α-醇溶蛋白基因的克隆、测序第40-42页
     ·α-醇溶蛋白基因以及推导氨基酸序列的特点第42-46页
     ·乳糜泻抗原决定簇位点分析第46-47页
     ·α-醇溶蛋白基因家族进化分析第47-48页
   ·讨论第48-51页
     ·体细胞杂种11-12中α-醇溶蛋白基因的组成和来源第48-49页
     ·杂种和双亲中α-醇溶蛋白基因碱基突变分析第49-50页
     ·杂种新α-醇溶蛋白基因对于面粉优质的贡献第50-51页
第四章 α-醇溶蛋白基因的原核、真核表达载体的构建和转化小麦研究第51-66页
   ·材料与方法第51-61页
     ·植物材料第51页
     ·原核表达载体的构建和原核表达第51-56页
       ·相关质粒的提取第51-52页
       ·目的片段两端加酶切位点PCR扩增第52-54页
       ·原核表达蛋白的提取及电泳分析第54-56页
     ·真核表达载体的构建第56-58页
       ·目的片段的准备第56-57页
       ·载体片段的准备第57-58页
       ·目的片段与载体片段的连接转化第58页
       ·阳性转化子的筛选鉴定第58页
     ·农杆菌介导的小麦苗端转化第58-60页
     ·转基因植株的PCR筛选第60-61页
   ·结果第61-64页
     ·原核表达载体构建及原核表达第61-62页
     ·真核表达载体构建第62-63页
     ·小麦转化及转基因阳性植株的鉴定第63-64页
   ·讨论第64-66页
     ·所选择的两个α-醇溶蛋白基因的特点第64页
     ·农杆菌介导转化小麦新方法——苗端转化法第64-65页
     ·谷蛋白转化的一些思考第65-66页
第五章 杂种来源的HMW-GS 1Bx17-H1Dx5基因的真核表达载体的构建第66-73页
   ·材料与方法第66-70页
     ·所用载体和H1Dx5基因的来源第66页
     ·真核表达载体的构建第66-70页
       ·中间过渡载体的构建第66-69页
       ·目的片段与最终真核表达载体片段的连接第69-70页
   ·结果第70-72页
     ·H1Dx5基因与启动子的连接第70页
     ·H1Dx5基因与真核表达载体阳性转化子的筛选鉴定第70-72页
   ·讨论第72-73页
参考文献第73-79页
在读期间发表和投稿的论文:第79-80页
致谢第80-81页
学位论文评阅及答辩情况表第81页

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