首页--农业科学论文--园艺论文--果树园艺论文--仁果类论文--梨论文

农杆菌介导DSACO基因转化‘明水梨的研究

中文摘要第1-11页
ABSTRACT第11-13页
缩略词(Abbreviation)第13-14页
前言第14-16页
第一章 文献综述第16-34页
 1 果实成熟相关的研究进展第16-25页
   ·影响果实成熟衰老的因素第16-18页
     ·活性氧的代谢第16-17页
     ·植物激素第17页
     ·细胞壁水解导致果实衰老第17页
     ·脂类的代谢第17-18页
     ·水分平衡第18页
   ·果实成熟衰老相关酶第18-25页
     ·与乙烯合成和作用相关的酶第18-22页
     ·抑制细胞壁的降解与细胞壁降解有关的酶第22-24页
     ·脂氧合酶(LOX)第24-25页
 2 RNA干扰研究进展第25-29页
   ·RNAi的发现第25-26页
   ·RNAi的作用机制第26-27页
   ·RNAi的特点第27-28页
     ·高度特异性第27页
     ·高效性第27-28页
   ·RNAi的应用第28-29页
     ·RNAi技术用于改良植物品质、改善植物营养价值第28页
     ·改良植物花色上的应用第28页
     ·植物抗病的遗传改良上的应用第28页
     ·RNAi果树改良上的应用第28-29页
 3 梨基因工程研究进展第29-34页
   ·梨转化的主要方法——农杆菌介导法第29页
   ·梨的转基因影响因素第29-31页
     ·高效稳定的再生系统第30页
     ·农杆菌菌株第30页
     ·菌液侵染条件第30-31页
     ·共培养条件第31页
     ·抗生素及转化植株选择策略第31页
   ·梨转基因研究中外源基因的类型第31-34页
     ·提高抗病虫能力第32页
     ·提高生根能力,矮化植株第32页
     ·改善果实鲜食与加工品质第32-33页
     ·提高抗非生物胁迫的能力第33-34页
第二章 农杆菌介导DSACO和DSLOX基因转化‘江蔬14号’番茄第34-44页
 1 材料和方法第34-37页
   ·材料第34-35页
     ·植物材料第34页
     ·植物表达载体第34-35页
     ·植物激素和生化试剂第35页
   ·方法第35-37页
     ·番茄再生体系的建立第35页
     ·番茄遗传转化体系的优化第35-36页
     ·转基因植株的检测第36-37页
 2 结果与分析第37-42页
   ·番茄再生体系的建立第37-38页
   ·遗传转化体系的优化第38-40页
     ·筛选压Kan浓度确定第38-39页
     ·农杆菌侵染时间第39-40页
     ·Cef浓度确定第40页
   ·抗性苗的检测第40-42页
     ·抗性苗的GUS染色第40-41页
     ·PCR检测第41-42页
 3 讨论第42-44页
第三章 植物表达载体pYF028-DSACO和pYL028-DSLOX改造第44-52页
 1 材料和方法第44-49页
   ·材料第44-45页
     ·菌株和载体第44页
     ·主要生化试剂第44-45页
     ·PCR引物第45页
   ·方法第45-49页
     ·植物表达载体pYF028-DSACO和pYL028-DSLOX的活化第45页
     ·农杆菌质粒的提取第45页
     ·质粒和菌液的PCR检测第45-46页
     ·质粒转化大肠杆菌第46页
     ·大肠杆菌质粒提取及其验证第46-48页
     ·大肠杆菌质粒酶切和连接第48-49页
     ·重组质粒转化农杆菌感受态第49页
 2 结果与分析第49-51页
   ·表达载体活化及质粒提取及PCR检测第49-50页
   ·pYF028-DSACO质粒PCR验证第50页
   ·大肠杆菌质粒提取并酶切第50页
   ·pYH4215-ACOi菌液PCR检测第50-51页
 3 讨论第51-52页
第四章 农杆菌介导ACOi转化番茄‘江蔬14号’第52-60页
 1.材料和方法第52-55页
   ·材料第52-53页
     ·植物材料第52页
     ·植物表达载体第52页
     ·生化试剂第52-53页
   ·方法第53-55页
     ·筛选压Hyg浓度对外植体的影响第53页
     ·菌液浓度和侵染时间确定第53页
     ·抑菌素Cef和Carb选择和浓度确定第53页
     ·共培养时间的确定第53页
     ·抗性苗的GUS染色第53页
     ·抗性苗的PCR检测第53页
     ·抗性苗的RT-PCR检测第53-55页
 2.结果与分析第55-59页
   ·筛选压Hyg浓度对外植体的影响第55页
   ·菌液浓度和侵染时间确定第55-57页
   ·抑菌素确定第57页
   ·共培养时间的确定第57-58页
   ·转基因番茄的GUS染色第58页
   ·转基因植株的PCR检测第58页
   ·转基因植株的RT-PCR检测第58-59页
 3.讨论第59-60页
第五章 ‘明水’梨叶片不定芽再生体系的建立第60-70页
 1 材料和方法第60-62页
   ·材料第60-61页
   ·方法第61-62页
     ·无菌苗的获得、继代与增殖培养第61页
     ·叶片不定芽再生第61-62页
 2 结果与分析第62-67页
   ·无菌苗的获得第62-63页
   ·继代培养与增殖培养第63-64页
   ·不同基本培养基对‘明水’梨叶片不定芽再生的影响第64-65页
   ·不同BA和NAA组合对叶片不定芽再生的影响第65页
   ·不同浓度TDZ和IBA组合对叶片不定芽再生的影响第65-66页
   ·不同暗培养时间对叶片不定芽再生的影响第66-67页
   ·不同浓度AgNO_3对叶片不定芽再生的影响第67页
 3 讨论第67-70页
第六章 农杆菌介导DSACO基因转化‘明水’梨第70-78页
 1 材料与方法第70-72页
   ·材料第70-71页
     ·转化受体植物材料第70页
     ·供试菌株第70-71页
     ·生化试剂和激素第71页
   ·方法第71-72页
     ·不同浓度的Kan对叶片不定芽再生的影响第71页
     ·不同的菌液浓度和侵染时间对转化效率的影响第71页
     ·共培养时间对转化的影响第71页
     ·抑菌素浓度的选择第71页
     ·GUS瞬间表达第71页
     ·梨的遗传转化步骤第71-72页
 2 结果与分析第72-75页
   ·筛选压Kan对再生的影响第72-73页
   ·菌液浓度的确定第73页
   ·侵染时间的确定第73-74页
   ·共培养时间对转化的影响第74页
   ·抑菌素浓度的选择第74-75页
 3 讨论第75-78页
第七章 农杆菌介导ACOi基因转化‘明水’梨体系的优化第78-84页
 1 材料和方法第78-79页
   ·材料第78-79页
     ·植物材料第78页
     ·植物表达载体第78页
     ·生化试剂和激素第78-79页
   ·方法第79页
     ·筛选压Hyg浓度确定第79页
     ·菌液侵染时间的确定第79页
     ·抑菌素浓度的确定第79页
 2 结果与分析第79-81页
   ·Hyg浓度的筛选第79-80页
   ·菌液侵染时间筛选第80页
   ·抑菌素浓度的确定第80-81页
 3 讨论第81-84页
第八章 转DSACO基因‘明水’梨植株的检测第84-88页
 1 材料与方法第84-85页
   ·材料第84页
     ·植物材料第84页
     ·试剂第84页
   ·方法第84-85页
     ·GUS染色第84页
     ·PCR扩增检测第84-85页
     ·RT-PCR检测第85页
 2 结果与分析第85-86页
   ·转基因植株的GUS组织化学染色检测第85-86页
   ·转基因植株的PCR检测第86页
   ·转基因植株的RT-PCR检测第86页
 3 讨论第86-88页
全文结论以及后续研究第88-90页
 1.全文结论第88页
 2.后续研究第88-90页
参考文献第90-100页
附录第100-110页
 附录1.本论文中所用培养基的配置第101-103页
 附录2.本论文中农杆菌EHA105感受态的制备第103-104页
 附录3.本论文中所用感受态CCM80的制备第104-106页
 附录4.图第106-110页
致谢第110页

论文共110页,点击 下载论文
上一篇:我国杏核心种质的构建
下一篇:中国李果实软化相关基因的克隆及表达分析