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红色亚栖热菌海藻糖合成酶相关基因的克隆、表达以及海藻糖代谢途径的研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-13页
第一章 绪论第13-37页
 第一节 海藻糖概述第13-20页
     ·海藻糖及其分布第13-14页
     ·海藻糖的生物学功能第14-17页
     ·海藻糖的应用价值第17-19页
     ·海藻糖的工业生产第19-20页
 第二节 海藻糖合成途径的研究进展第20-28页
     ·海藻糖的合成途径第20-24页
     ·海藻糖的分解途径第24-25页
     ·海藻糖合成途径的代谢调控第25-28页
 第三节 海藻糖合酶基因的研究进展第28-34页
     ·海藻糖合酶基因的克隆第28-29页
     ·海藻糖合酶的催化机制第29-33页
     ·嗜热菌海藻糖合酶的结构特点第33-34页
 第四节 选题依据和技术路线第34-37页
     ·选题依据第34-35页
     ·工作背景第35-36页
     ·技术路线第36-37页
第二章 生产海藻糖合酶菌株CBS-01的鉴定及其海藻糖合酶酶学性质的研究第37-55页
 第一节 实验材料第37-38页
     ·菌株第37页
     ·质粒第37页
     ·主要试剂第37页
     ·主要仪器第37-38页
 第二节 实验方法第38-46页
     ·培养基和试剂的配制第38-39页
     ·引物第39页
     ·表型特征鉴定第39-40页
     ·海藻糖合酶生产菌株的分子生物学鉴定第40-44页
     ·海藻糖合酶性质的初步研究第44-46页
 第三节 结果与分析第46-53页
     ·海藻糖合酶生产菌株的鉴定第46-51页
     ·红色亚栖热菌海藻糖合酶酶学性质的初步研究第51-53页
 第四节 讨论第53-54页
     ·海藻糖合酶生产菌株的筛选与鉴定第53页
     ·红色亚栖热菌CBS-01海藻糖合酶性质的初步研究第53-54页
 第五节 小结第54-55页
第三章 红色亚栖热菌海藻糖合成相关基因的克隆和序列分析第55-78页
 第一节 实验材料第55-56页
     ·菌株第55页
     ·质粒第55页
     ·主要试剂第55页
     ·主要仪器第55-56页
 第二节 实验方法第56-62页
     ·培养基和试剂的配制第56-57页
     ·引物第57页
     ·红色亚栖热菌海藻糖合酶基因部分DNA序列的PCR扩增第57-59页
     ·保守区侧翼未知DNA片断的扩增第59-61页
     ·红色亚栖热菌基因组DAN文库的构建及从文库中筛选海藻糖合酶基因第61-62页
     ·序列分析第62页
 第三节 结果与分析第62-73页
     ·红色亚栖热菌海藻糖合酶基因保守区序列的获得第62-64页
     ·海藻糖合酶基因保守区侧翼未知序列的获得第64-67页
     ·从红色亚栖热菌基因组DAN文库中筛选海藻糖合酶基因第67-73页
 第四节 讨论第73-77页
     ·红色亚栖热菌海藻糖合酶基因的克隆第73-74页
     ·红色亚栖热菌海藻糖合酶基因的序列分析第74-76页
     ·红色亚栖热菌TPS/TPP基因的氨基酸序列分析第76-77页
 第五节 小结第77-78页
第四章 红色亚栖热菌海藻糖合酶基因在大肠杆菌中的表达及其酶学性质研究第78-112页
 第一节 实验材料第78-79页
     ·菌株第78页
     ·质粒第78页
     ·主要试剂第78-79页
     ·主要仪器第79页
 第二节 实验方法第79-89页
     ·培养基和试剂的配制第79-80页
     ·引物第80-81页
     ·红色亚栖热菌海藻糖合酶基因的功能鉴定第81-84页
     ·红色亚栖热菌海藻糖合酶基因在大肠杆菌中表达条件的优化第84-85页
     ·重组海藻糖合酶的分离纯化第85-87页
     ·重组海藻糖合酶的酶学性质的测定第87-88页
     ·红色亚栖热菌海藻糖合酶结构与功能第88-89页
 第三节 结果与讨论第89-104页
     ·红色亚栖热菌海藻糖合酶基因的功能鉴定第89-92页
     ·红色亚栖热菌海藻糖合酶基因在大肠杆菌中表达条件的优化第92-96页
     ·重组海藻糖合酶的分离纯化第96-99页
     ·重组海藻糖合酶的酶学性质的鉴定第99-102页
     ·红色亚栖热菌海藻糖合酶结构与功能的关系第102-104页
 第四节 讨论第104-111页
     ·海藻糖合酶在大肠杆菌中高效表达的策略第104-107页
     ·海藻糖合酶的性质第107-109页
     ·海藻糖合酶的结构与功能第109-111页
 第五节 小结第111-112页
第五章 红色亚栖热菌海藻糖代谢途径的初步研究第112-121页
 第一节 实验材料第112-113页
     ·菌株第112页
     ·质粒第112页
     ·主要试剂第112页
     ·主要仪器第112-113页
 第二节 实验方法第113-116页
     ·培养基和试剂的配制第113页
     ·引物第113页
     ·红色亚栖热菌海藻糖合成酶基因tps、tpp的功能鉴定第113-115页
     ·红色亚栖热菌海藻糖合成酶基因tps、tpp的体内活性鉴定第115-116页
 第三节 结果与分析第116-119页
     ·红色亚栖热菌TPS、TPP基因的功能鉴定第116-118页
     ·红色亚栖热菌tps、tpp基因的体内活性鉴定第118-119页
 第四节 讨论第119-120页
 第五节 小结第120-121页
第六章 结论第121-123页
参考文献第123-136页
附录:缩写词一览表第136-137页
个人简历在学期间发表的学术论文与研究成果第137-138页
致谢第138页

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