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假单胞菌株M18中pqsR基因的功能鉴定及las和rhl群体感应系统级联关系研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
第一章 文献综述第9-28页
   ·假单胞菌简介第9页
   ·假单胞菌的生物防治机理第9-11页
   ·抗生素在生物防治中的作用第11-18页
     ·藤黄绿菌素(Plt)第12-13页
     ·吩嗪及其衍生物第13-16页
     ·2,4-二乙酰藤黄酚(Phl)第16-17页
     ·硝吡咯菌素(Prn)第17页
     ·粘质酰胺(viscosinamide)第17页
     ·氢氰酸(hydrogen cyanide, HCN)第17-18页
   ·群体感应(quorum sensing ,QS)系统第18-26页
     ·革兰氏阴性菌(G~-)的QS 系统第19-26页
   ·研究目的和主要内容第26-28页
     ·研究目的第26-27页
     ·研究内容第27-28页
第二章 材料和方法第28-32页
   ·培养基第28页
   ·菌株培养和保藏条件第28页
   ·抗生素的使用第28-29页
   ·DNA 常规操作技术第29页
   ·Plt 和 PCA 的定量分析第29页
   ·β-半乳糖苷酶活性的测定第29-30页
   ·大肠杆菌和假单胞菌感受态细胞的制备第30页
   ·高丝氨酸内酯信号分子的提取第30-31页
   ·高丝氨酸内酯的生物学检测第31-32页
第三章 假单胞菌M18 中pqsR 基因的鉴定及其功能研究第32-56页
   ·材料与方法第32-37页
     ·菌株和与质粒第32-33页
     ·pqsR 基因突变菌株M18PRG 的构建第33-35页
     ·过表达质粒pOPQR 构建第35页
     ·RNA 的提取和反转录第35-36页
     ·半定量RT-PCR第36-37页
   ·结果第37-51页
     ·pqsR 基因的PCR 克隆和测序第37-38页
     ·pqsR 基因对假单胞菌M18 生长的影响第38-39页
     ·pqsR 基因对假单胞菌M18 色素产生能力的影响第39-40页
     ·pqsR 基因对Plt 和PCA 合成的影响第40-44页
     ·pqsR 在转录水平上调控Plt 和PCA 合成基因簇的表达第44-48页
     ·pqsR 基因对于 pltR 表达的影响第48-49页
     ·pqsR 基因对于HHL 和BHL 合成的影响第49-51页
   ·讨论第51-56页
第四章 假单胞菌 M18 中 las 和 rhl QS 系统的级联关系研究第56-65页
   ·材料与方法第56-57页
     ·菌株和与质粒第56-57页
     ·lasR rhlI 基因双突变菌株 M18IR 的构建第57页
   ·结果第57-61页
     ·QS 系统对 PCA 合成的影响第57-58页
     ·las QS 系统对 rhlI’-‘lacZ 翻译融合表达的调控第58-60页
     ·las QS 系统对 rhlR’-‘lacZ 翻译融合表达的调控第60页
     ·QS 系统对 BHL 和 HHL 信号分子合成的调控第60-61页
   ·讨论第61-65页
     ·假单胞菌 M18 中存在一个新的、复杂的 las 和 rhl 级联调控系统第62-63页
     ·luxR 家族基因的表达不完全与其相应的 luxI 家族基因相偶联第63-64页
     ·las QS 系统影响 rhlI 和 rhlR 最高表达时间和强度第64-65页
参考文献第65-79页
附录 实验所用试剂及仪器设备第79-80页
致谢第80-82页
攻读硕士期间论文(待)发表情况和所获奖励第82-84页

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