| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-28页 |
| ·大豆类黄酮的研究 | 第13-17页 |
| ·类黄酮的结构与作用 | 第13页 |
| ·大豆异黄酮生物合成途径 | 第13-15页 |
| ·f3h 的研究 | 第15-17页 |
| ·RNAi 的研究 | 第17-21页 |
| ·RNAi 的发现 | 第17页 |
| ·RNAi 的原理 | 第17-18页 |
| ·RNAi 在植物基因工程中的应用 | 第18-19页 |
| ·植物基因功能的研究 | 第18-19页 |
| ·植物抗逆方面的研究 | 第19页 |
| ·植物的品质改良 | 第19页 |
| ·RNAi 植物表达载体的构建 | 第19-21页 |
| ·载体结构的选择 | 第20-21页 |
| ·目的基因片段的选择 | 第21页 |
| ·毛状根的研究进展与应用 | 第21-26页 |
| ·发根农杆菌与Ri 质粒 | 第22页 |
| ·发根农杆菌转化机制 | 第22-23页 |
| ·毛状根的应用 | 第23-26页 |
| ·用毛状根生产次生代谢产物 | 第23-25页 |
| ·毛状根培养技术在理论研究中的应用 | 第25-26页 |
| ·毛状根再生获得转基因植物和培育作物新品种 | 第26页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第26-28页 |
| 第二章 材料与方法 | 第28-51页 |
| ·材料和试剂 | 第28-31页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·质粒和菌种 | 第28页 |
| ·实验试剂 | 第28-29页 |
| ·培养基和溶液配方 | 第29-31页 |
| ·PCR 扩增所用引物列表 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-51页 |
| ·植物总RNA 的提取（TRIzol 法）及检测 | 第31-34页 |
| ·cDNA 的合成 | 第34-35页 |
| ·目的片段的克隆PCR 反应 | 第35页 |
| ·目的片段的电泳回收 | 第35-36页 |
| ·从琼脂糖凝胶中回收DNA | 第35-36页 |
| ·从溶液中回收DNA | 第36页 |
| ·载体pMD18-T vector 和目的DNA 片断的连接 | 第36页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第36-38页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备（CaC12 法） | 第36-37页 |
| ·转化大肠杆菌感受态细胞（热激法） | 第37-38页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第38-40页 |
| ·质粒的少量提取与鉴定（碱法） | 第38-39页 |
| ·质粒的大量提取 | 第39-40页 |
| ·f3h RNAi 植物表达载体（P1304+-F3h-RNAi）的构建 | 第40-42页 |
| ·pHANNIBAL-F3h 的构建 | 第40-41页 |
| ·pHANNIBAL-F3h-RNAi 的构建 | 第41-42页 |
| ·P1304+-F3h-RNAi 的构建 | 第42页 |
| ·植物表达载体导入农杆菌 | 第42-44页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备（CaC12 法） | 第42-43页 |
| ·植物表达载体导入感受态农杆菌（冻融法） | 第43-44页 |
| ·发根农杆菌诱导大豆毛状根的生成 | 第44-45页 |
| ·种子消毒和萌发（合丰47） | 第44页 |
| ·农杆菌的预培养 | 第44-45页 |
| ·农杆菌侵染 | 第45页 |
| ·农杆菌的去除 | 第45页 |
| ·植物基因组DNA 提取 | 第45-47页 |
| ·毛状根PCR 检测 | 第47-48页 |
| ·定量PCR 分析 | 第48-50页 |
| ·半定量PCR | 第48-49页 |
| ·Real Time PCR 分析 | 第49-50页 |
| ·HPLC 测定毛状根中类黄酮含量 | 第50-51页 |
| 第三章 结果与分析 | 第51-66页 |
| ·植物不同组织总RNA 的提取 | 第51-52页 |
| ·目的基因克隆 | 第52-53页 |
| ·f3h 基因RNAi 植物表达载体的构建 | 第53-57页 |
| ·pHANNIBAL-F3h-RNAi 的构建 | 第53-54页 |
| ·P1304+-F3h-RNAi 的构建 | 第54-57页 |
| ·植物表达载体导入农杆菌 | 第57-58页 |
| ·毛状根的生成情况分析 | 第58-59页 |
| ·毛状根的PCR 检测 | 第59-61页 |
| ·定量PCR 分析 | 第61-64页 |
| ·半定量PCR | 第62页 |
| ·Real Time PCR 反应分析 | 第62-64页 |
| ·HPLC 分析毛状根中类黄酮的含量变化 | 第64-66页 |
| 第四章 讨论 | 第66-69页 |
| ·RNAi 植物表达载体的构建 | 第66-67页 |
| ·发根农杆菌介导的植物转化 | 第67-68页 |
| ·转化毛状根的分析 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第80-82页 |
| 上海交通大学硕士学位论文答辩决议书 | 第82页 |