| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-24页 |
| ·生物农药分类 | 第9-10页 |
| ·生物农药的优越性 | 第10-12页 |
| ·抗生素在生物防治中的作用 | 第12-13页 |
| ·吩嗪类化合物 | 第13-14页 |
| ·吩嗪衍生物合成基因及途径 | 第14-16页 |
| ·植物根际促生细菌和假单胞菌 | 第16-18页 |
| ·植物根基促生细菌介绍 | 第16-17页 |
| ·假单胞菌介绍 | 第17-18页 |
| ·绿针假单胞菌GP72 研究 | 第18-20页 |
| ·PCA 转化为2-OH-PHZ 分子机理的研究进展 | 第20-22页 |
| ·工作背景和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 绿针假单胞菌GP72 基因phzO 扩增及分析 | 第24-40页 |
| ·材料与方法 | 第24-33页 |
| ·菌株和质粒 | 第24-25页 |
| ·酶类及DNA Marker | 第25页 |
| ·主要培养基& 其他试剂 | 第25页 |
| ·目的片段phzO 与载体pME6032 的制备 | 第25-30页 |
| ·GP72 基因组DNA 的提取 | 第25-26页 |
| ·聚合酶链式（PCR）反应 | 第26-28页 |
| ·电泳定性检验DNA | 第28页 |
| ·PCR 产物的回收纯化及测序 | 第28-29页 |
| ·提取载体质粒pME6032 | 第29-30页 |
| ·双酶切质粒载体和phzO 片段 | 第30页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳观察酶切产物 | 第30页 |
| ·重组质粒pME6032-phzO 的构建及克隆 | 第30-32页 |
| ·载体pME6032 与phzO 连接 | 第30-31页 |
| ·DH5α感受态细胞的制备、转化 | 第31页 |
| ·感受态细胞转化 | 第31页 |
| ·双酶切鉴定重组质粒pME6032-phzO 和序列分析 | 第31-32页 |
| ·生长曲线测定及2-OH-PHZ 提取和定量测定 | 第32-33页 |
| ·菌体生长曲线测定 | 第32页 |
| ·菌株的发酵培养条件 | 第32-33页 |
| ·活性物质提取和测定方法 | 第33页 |
| ·结果 | 第33-38页 |
| ·phzO 基因的验证和扩增 | 第33-34页 |
| ·过表达重组质粒的构建 | 第34-35页 |
| ·过表达菌株的获得 | 第35页 |
| ·phzO 基因过表达对2-OH-PHZ 合成的影响 | 第35-38页 |
| ·讨论分析 | 第38-40页 |
| 第三章 phzO 基因异源转化PCA 为2-OH-PHZ 研究 | 第40-53页 |
| ·材料与方法 | 第40-45页 |
| ·材料 | 第40-42页 |
| ·菌株和质粒 | 第40页 |
| ·培养基和抗生素 | 第40-41页 |
| ·DNA 常规操作技术 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41-42页 |
| ·其他材料 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-45页 |
| ·PCA 的制备 | 第42-43页 |
| ·重组菌的诱导表达 | 第43-44页 |
| ·SDS-PAGE 鉴定表达产物 | 第44页 |
| ·SDS-PAGE 检测表达产物位置 | 第44-45页 |
| ·PhzO 蛋白酶异源转化PCA 为2-OH-PHZ | 第45页 |
| ·异源转化PCA 为2-OH-PHZ 条件探索 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-50页 |
| ·PCA 的制备 | 第45-46页 |
| ·PhzO 蛋白表达鉴定 | 第46页 |
| ·PhzO 蛋白表达位置鉴定 | 第46-47页 |
| ·PhzO 蛋白酶异源转化PCA 为2-OH-PHZ | 第47-48页 |
| ·异源转化PCA 为2-OH-PHZ 条件探索 | 第48-50页 |
| ·讨论分析 | 第50-53页 |
| 第四章 外源基因phzE 及PCA 浓度对GP72 中2-OH-PHZ 产量影响研究 | 第53-60页 |
| ·材料与方法 | 第53-55页 |
| ·菌株和质粒 | 第53页 |
| ·酶类及DNA Marker | 第53-54页 |
| ·主要培养基& 其他试剂 | 第54页 |
| ·DNA 常规操作技术 | 第54页 |
| ·假单胞菌M18-pME6032-phzO 菌株的获得 | 第54页 |
| ·phzE 基因及底物PCA 影响2-OH-PHZ 产量实验 | 第54-55页 |
| ·结果 | 第55-57页 |
| ·假单胞菌M18-pME6032-phzO 菌株的获得 | 第55-56页 |
| ·phzE 基因及底物PCA 对2-OH-PHZ 产量的影响 | 第56-57页 |
| ·讨论分析 | 第57-60页 |
| 第五章 总结与展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 附录1. 实验中所用的仪器设备 | 第69-70页 |
| 附录2. 菌株 GP72 phzO 测序结果 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-73页 |
