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诱导水稻抗虫性的活性分子筛选及相关分子2,4-D的诱导机理研究

致谢第1-10页
中文摘要第10-12页
Abstract第12-14页
第一章 文献综述第14-32页
 1 植物的诱导抗虫反应第14-25页
   ·诱导的直接防御反应第14-16页
   ·诱导的间接防御反应第16-17页
   ·木聚糖酶抑制剂(XIs)在植物防御中的作用第17-20页
   ·植物诱导防御反应相关的主要信号转导途径第20-23页
   ·活性小分子对植物诱导抗性的激发作用第23-25页
 2 化学遗传学及其在研究植物生物学与防御反应中的作用第25-30页
   ·化学遗传学的基本研究方法第26-29页
   ·化学遗传学在研究植物生物学和植物防御反应中的作用第29-30页
 3 本研究的目的和意义第30-32页
第二章 高通量筛选生物活性分子模型的建立第32-46页
 1 材料与方法第32-40页
   ·试验材料第32-33页
   ·水稻基因组提取第33页
   ·水稻总RNA的提取、电泳及cDNA第一链合成第33-35页
   ·定量PCR反应第35页
   ·水稻OsLIS基因启动子的克隆第35-38页
   ·农杆菌介导法转化水稻第38-39页
   ·转基因植株鉴定第39页
   ·转基因水稻GUS活性荧光检测第39-40页
   ·水稻茉莉酸(JA)处理第40页
   ·数据分析第40页
 2 结果与分析第40-44页
   ·水稻OsLIS基因启动子片段的克隆及载体构建第40-41页
   ·转基因植株T_0代转化植株的PCR检测第41-42页
   ·转基因植株纯合子的获得及杂交鉴定第42页
   ·转基因对水稻生长发育的影响第42-43页
   ·高通量筛选体系的建立第43-44页
 3 讨论第44-46页
第三章 2,4-二氯苯氧乙酸对水稻防御反应的影响及其机理第46-67页
 1 材料与方法第47-51页
   ·实验材料第47页
   ·水稻总RNA的提取、电泳及cDNA第一链合成第47页
   ·定量PCR反应第47页
   ·水稻处理第47-49页
   ·GUS活性荧光测定第49页
   ·信号分子JA、SA和ET的测定第49页
   ·胰蛋白酶抑制剂(TrypPIs)的测定第49页
   ·生物测定第49-50页
   ·挥发物的收集、分离与鉴定第50页
   ·田间试验第50-51页
   ·数据分析第51页
 2 结果与分析第51-63页
   ·外源施用2,4-D处理提高GUS蛋白活性第51-52页
   ·外源施用2,4-D通过提高TrypPIs水平增强对SSB的抗性第52-53页
   ·外源利用2,4-D可诱导挥发物的释放并增强对BPH的间接抗性第53-56页
   ·外源施用2,4-D提高水稻MAPKs,OsWRKY53和OsPLDa4表达水平第56-58页
   ·外源施用2,4-D能提高水稻内源JA,ET合成,抑制SA的合成第58-61页
   ·2,4-D通过调控JA和ET途径提高水稻的抗虫性第61-63页
 3 讨论第63-67页
第四章 OsHI-XIP,一个筛选抗虫激发子的潜在分子标记的功能分析第67-83页
 1 材料与方法第67-71页
   ·实验材料第67-68页
   ·水稻处理第68页
   ·水稻RNA的提取与cDNA合成第68页
   ·水稻基因组DNA的提取第68页
   ·水稻OsHI-XIP基因的克隆第68-69页
   ·OsHI-XIP蛋白亚细胞定位第69页
   ·定量PCR反应第69-70页
   ·OsHI-XIP过量表达载体的构建第70页
   ·OsHI-XIP过量表达突变体的获得及Southern检测第70页
   ·二化螟生物测定第70页
   ·木聚糖酶抑制剂活性测定第70-71页
 2 结果与分析第71-80页
   ·OsHI-XIP基因的克隆及序列分析第71-73页
   ·OsHI-XIP在水稻植株中的表达特征及编码蛋白的亚细胞定位第73-74页
   ·二化螟、机械损伤、茉莉酸及褐飞虱诱导OsHI-XIP基因的表达第74-75页
   ·OsHI-XIP过量表达载体的构建及鉴定第75-76页
   ·OsHI-XIP过量表达突变体的获得及Southern杂交鉴定第76-77页
   ·过量表达OsHI-XIP转基因品系表达量检测第77-78页
   ·过量表达OsHI-XIP对二化螟幼虫生长和XIs活性的影响第78-79页
   ·过量表达OsHI-XIP对茉莉酸和TrypPIs含量的影响第79-80页
 3 讨论第80-83页
第五章 全文总结与今后研究第83-85页
参考文献第85-102页
附录A第102-104页
附录B第104-107页
附录C第107-111页
作者简介第111页

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