| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 苏云金芽孢杆菌Cry蛋白的研究进展 | 第13-45页 |
| ·Cry蛋白基本特性 | 第14-15页 |
| ·Cry蛋白的类型 | 第15-17页 |
| ·Cry蛋白的结构 | 第17-21页 |
| ·Cry蛋白的杀虫机理 | 第21-25页 |
| ·成孔模型 | 第21-25页 |
| ·信号传导模型 | 第25页 |
| ·靶标昆虫对Cry蛋白的抗性发生及其对策 | 第25-37页 |
| ·抗性发生 | 第25-28页 |
| ·抗性发生的机理 | 第28-30页 |
| ·应对昆虫抗性的策略 | 第30-37页 |
| ·Cry蛋白在商业化转基因作物中的应用 | 第37-39页 |
| ·Cry1Ab | 第39-43页 |
| ·Cry9Aa | 第43-44页 |
| ·研究目的和意义 | 第44-45页 |
| 2 材料与方法 | 第45-61页 |
| ·材料 | 第45-46页 |
| ·菌株 | 第45页 |
| ·受体植物材料 | 第45页 |
| ·质粒载体 | 第45页 |
| ·主要酶类 | 第45页 |
| ·试剂盒及核酸、蛋白分子量标准 | 第45页 |
| ·其他试剂 | 第45页 |
| ·仪器 | 第45-46页 |
| ·本论文用到的分子生物学实验方法 | 第46-57页 |
| ·CTAB法提取植物基因组DNA | 第46页 |
| ·质粒提取 | 第46-47页 |
| ·凝胶回收 | 第47-48页 |
| ·PCR产物纯化 | 第48页 |
| ·酶切反应 | 第48-49页 |
| ·连接反应 | 第49页 |
| ·大肠杆菌及根瘤农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第49-51页 |
| ·表达载体构建及表达 | 第51-52页 |
| ·蛋白的检测与分析 | 第52-55页 |
| ·DNA印记(Southern Blot) | 第55-57页 |
| ·本论文用到的水稻转基因的实验方法 | 第57-59页 |
| ·水稻成熟胚愈伤组织的诱导 | 第57-58页 |
| ·农杆菌与水稻愈伤的共培养 | 第58页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选 | 第58-59页 |
| ·转化植株的再生与培养 | 第59页 |
| ·本论文使用的生物测定方法 | 第59-61页 |
| ·原核表达蛋白的生物测定 | 第59页 |
| ·转基因植物测定 | 第59-61页 |
| 3 融合基因的构建、原核表达及活性分析 | 第61-91页 |
| ·方法 | 第61-69页 |
| ·crylAb、cry9Aa、cry9Aadel及其融合基因的载体构建 | 第61-68页 |
| ·crylAb、cry9Aa、cry9Aadel及其融合基因的表达及检测 | 第68-69页 |
| ·原核表达的融合蛋白的生物测定 | 第69页 |
| ·实验结果 | 第69-88页 |
| ·Cry蛋白及其融合蛋白表达载体的构建 | 第69-70页 |
| ·Cry蛋白的原核表达 | 第70-79页 |
| ·原核表达的融合蛋白的活性分析 | 第79-88页 |
| ·讨论 | 第88-91页 |
| 4 融合基因crylAb-cry9Aa和crylAb-cry9Aadel在转基因水稻中的应用 | 第91-109页 |
| ·水稻转化表达载体的构建 | 第91-96页 |
| ·融合基因两端引入启动子和终止子 | 第91-93页 |
| ·构建抗草甘膦基因载体 | 第93页 |
| ·构建抗虫抗草甘膦的T-DNA转化载体 | 第93-96页 |
| ·外源基因转化水稻 | 第96-97页 |
| ·转基因水稻的培养 | 第96页 |
| ·转基因水稻的鉴定 | 第96-97页 |
| ·转基因水稻的生物测定 | 第97页 |
| ·实验结果 | 第97-104页 |
| ·转基因载体的鉴定 | 第97-98页 |
| ·转基因水稻的获得 | 第98-100页 |
| ·外源基因与水稻基因组的整合 | 第100页 |
| ·外源基因在转基因水稻中的表达 | 第100-102页 |
| ·Southern blot检测外源基因 | 第102-104页 |
| ·转融合基因水稻的抗虫性能分析 | 第104-108页 |
| ·棉铃虫和斜纹夜蛾 | 第104-106页 |
| ·二化螟 | 第106-107页 |
| ·稻纵卷叶螟 | 第107-108页 |
| ·讨论 | 第108-109页 |
| 5 总讨论 | 第109-112页 |
| 参考文献 | 第112-136页 |
| 附录Ⅰ 分子生物学实验主要溶液 | 第136-140页 |
| 附录Ⅱ 水稻转化主要培养基 | 第140-143页 |
