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番鸭就巢差异表达基因的筛选及性状关联分析

中文摘要第1-8页
ABSTRACT第8-9页
第一章 文献综述第9-20页
 1 家禽就巢性的研究进展第9-11页
   ·内分泌调控就巢行为第9-10页
   ·环境调控就巢行为第10-11页
   ·就巢行为的遗传控制第11页
 2 CDNA-AFLP 技术及其应用第11-15页
   ·CDNA-AFLP 技术的原理第11-12页
   ·CDNA-AFLP 技术的特点第12-13页
   ·CDNA-AFLP 技术的应用第13-15页
 3 候选基因的功能和研究进展第15-19页
 4 本研究的目的和意义第19-20页
第二章 CDNA-AFLP 技术筛选番鸭就巢相关基因第20-35页
 1 试验材料第20页
   ·实验动物第20页
   ·主要仪器设备第20页
   ·实验主要试剂第20页
 2 试验方法第20-28页
   ·番鸭脑垂体总RNA 的提取第20-21页
     ·提取方法第20-21页
     ·RNA 琼脂糖凝胶电泳的检测第21页
   ·CDNA-AFLP 体系的建立第21-24页
     ·脑垂体总RNA 逆转录合成CDNA第21-22页
     ·CDNA-AFLP 接头和引物序列第22页
     ·CDNA 酶切第22-23页
     ·连接第23页
     ·预扩增第23-24页
     ·选择性扩增第24页
     ·选择性扩增产物检测第24页
   ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测第24-26页
     ·配制变性聚丙烯酰胺凝胶第24-25页
     ·选择性扩增产物的处理第25页
     ·电解质梯度电泳第25页
     ·硝酸银染色第25-26页
   ·差异片段回收和二次扩增第26-27页
     ·差异片段回收第26页
     ·差异条带的二次扩增第26-27页
   ·产物测序和序列分析第27页
   ·半定量RT-PCR第27-28页
 3 结果与分析第28-32页
   ·RNA 提取效果的检测第28页
   ·CDNA-AFLP 各步产物的检测第28-29页
   ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测第29-30页
   ·差异回收条带的测序和序列比对结果第30-31页
   ·半定量RT-PCR 验证结果第31-32页
 4. 讨论第32-35页
   ·影响CDNA-AFLP 技术的因素第32-33页
   ·差异条带回收时应注意的一些问题第33页
   ·CDNA-AFLP 技术对番鸭就巢与非就巢差异表达基因的分析第33-35页
第三章 就巢相关候选基因的多态性分析第35-47页
 1 试验材料第35-36页
   ·试验鸭来源及采样方法第35页
   ·主要仪器设备与试剂第35-36页
     ·主要仪器设备第35页
     ·实验主要试剂与配制第35-36页
 2 试验方法第36-40页
   ·鸭血基因组DNA 的小量提取第36-37页
     ·提取方法第36-37页
     ·血样DNA 的纯度和浓度的检测第37页
   ·PCR 引物设计与合成第37-38页
     ·引物设计的方法与原则第37页
     ·用于PCR 扩增的引物第37-38页
   ·PCR 条件的建立第38页
   ·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳检测第38-39页
   ·PCR 产物的SSCP 检测第39-40页
     ·6%非变性聚丙烯酰胺凝胶制备及电泳第39页
     ·硝酸银染色第39-40页
 3 统计分析方法第40页
   ·基因频率和等位基因频率的计算第40页
   ·HARDY-WEINBERG 检验第40页
 4 结果与分析第40-44页
   ·鸭血液DNA 提取结果第40-41页
   ·PCR 扩增产物的琼脂糖检测第41页
   ·SSCP 方法检测结果第41-43页
   ·番鸭基因SSCP 分析及其与生产性能关系的研究第43-44页
     ·GNRH、GH 基因多态性位点的基因频率和基因型频率及适合性检验第43页
     ·候选基因多态与番鸭生产性能相关分析第43-44页
 5 讨论第44-47页
   ·样本含量与采样方法第44页
   ·影响PCR-SSCP 分析的主要因素第44-45页
   ·候选基因多态性讨论第45页
   ·候选基因多态位点与其生产性能关系分析第45-47页
第四章 结论第47-48页
参考文献第48-56页
致谢第56页

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