中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-20页 |
1 家禽就巢性的研究进展 | 第9-11页 |
·内分泌调控就巢行为 | 第9-10页 |
·环境调控就巢行为 | 第10-11页 |
·就巢行为的遗传控制 | 第11页 |
2 CDNA-AFLP 技术及其应用 | 第11-15页 |
·CDNA-AFLP 技术的原理 | 第11-12页 |
·CDNA-AFLP 技术的特点 | 第12-13页 |
·CDNA-AFLP 技术的应用 | 第13-15页 |
3 候选基因的功能和研究进展 | 第15-19页 |
4 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
第二章 CDNA-AFLP 技术筛选番鸭就巢相关基因 | 第20-35页 |
1 试验材料 | 第20页 |
·实验动物 | 第20页 |
·主要仪器设备 | 第20页 |
·实验主要试剂 | 第20页 |
2 试验方法 | 第20-28页 |
·番鸭脑垂体总RNA 的提取 | 第20-21页 |
·提取方法 | 第20-21页 |
·RNA 琼脂糖凝胶电泳的检测 | 第21页 |
·CDNA-AFLP 体系的建立 | 第21-24页 |
·脑垂体总RNA 逆转录合成CDNA | 第21-22页 |
·CDNA-AFLP 接头和引物序列 | 第22页 |
·CDNA 酶切 | 第22-23页 |
·连接 | 第23页 |
·预扩增 | 第23-24页 |
·选择性扩增 | 第24页 |
·选择性扩增产物检测 | 第24页 |
·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第24-26页 |
·配制变性聚丙烯酰胺凝胶 | 第24-25页 |
·选择性扩增产物的处理 | 第25页 |
·电解质梯度电泳 | 第25页 |
·硝酸银染色 | 第25-26页 |
·差异片段回收和二次扩增 | 第26-27页 |
·差异片段回收 | 第26页 |
·差异条带的二次扩增 | 第26-27页 |
·产物测序和序列分析 | 第27页 |
·半定量RT-PCR | 第27-28页 |
3 结果与分析 | 第28-32页 |
·RNA 提取效果的检测 | 第28页 |
·CDNA-AFLP 各步产物的检测 | 第28-29页 |
·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第29-30页 |
·差异回收条带的测序和序列比对结果 | 第30-31页 |
·半定量RT-PCR 验证结果 | 第31-32页 |
4. 讨论 | 第32-35页 |
·影响CDNA-AFLP 技术的因素 | 第32-33页 |
·差异条带回收时应注意的一些问题 | 第33页 |
·CDNA-AFLP 技术对番鸭就巢与非就巢差异表达基因的分析 | 第33-35页 |
第三章 就巢相关候选基因的多态性分析 | 第35-47页 |
1 试验材料 | 第35-36页 |
·试验鸭来源及采样方法 | 第35页 |
·主要仪器设备与试剂 | 第35-36页 |
·主要仪器设备 | 第35页 |
·实验主要试剂与配制 | 第35-36页 |
2 试验方法 | 第36-40页 |
·鸭血基因组DNA 的小量提取 | 第36-37页 |
·提取方法 | 第36-37页 |
·血样DNA 的纯度和浓度的检测 | 第37页 |
·PCR 引物设计与合成 | 第37-38页 |
·引物设计的方法与原则 | 第37页 |
·用于PCR 扩增的引物 | 第37-38页 |
·PCR 条件的建立 | 第38页 |
·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第38-39页 |
·PCR 产物的SSCP 检测 | 第39-40页 |
·6%非变性聚丙烯酰胺凝胶制备及电泳 | 第39页 |
·硝酸银染色 | 第39-40页 |
3 统计分析方法 | 第40页 |
·基因频率和等位基因频率的计算 | 第40页 |
·HARDY-WEINBERG 检验 | 第40页 |
4 结果与分析 | 第40-44页 |
·鸭血液DNA 提取结果 | 第40-41页 |
·PCR 扩增产物的琼脂糖检测 | 第41页 |
·SSCP 方法检测结果 | 第41-43页 |
·番鸭基因SSCP 分析及其与生产性能关系的研究 | 第43-44页 |
·GNRH、GH 基因多态性位点的基因频率和基因型频率及适合性检验 | 第43页 |
·候选基因多态与番鸭生产性能相关分析 | 第43-44页 |
5 讨论 | 第44-47页 |
·样本含量与采样方法 | 第44页 |
·影响PCR-SSCP 分析的主要因素 | 第44-45页 |
·候选基因多态性讨论 | 第45页 |
·候选基因多态位点与其生产性能关系分析 | 第45-47页 |
第四章 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-56页 |
致谢 | 第56页 |