中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-10页 |
1 绪论 | 第10-20页 |
·问题的提出及研究意义 | 第10-12页 |
·问题的提出 | 第10-11页 |
·研究意义 | 第11-12页 |
·国内外研究现状 | 第12-15页 |
·柑桔木虱研究现状 | 第12-13页 |
·昆虫内共生菌研究现状 | 第13页 |
·共生菌Wolbachia 概况 | 第13-15页 |
·16sRNA 基因在微生物多样性中的应用 | 第15-17页 |
·变性梯度凝胶电泳和温度梯度凝胶电泳技术 | 第15-16页 |
·限制性片段长度多态性分析技术 | 第16-17页 |
·小结 | 第17页 |
·本文研究的目的和研究内容 | 第17-19页 |
·本文研究的目的 | 第17页 |
·本文研究的主要内容与技术路线 | 第17-19页 |
·创新之处 | 第19-20页 |
2 柑桔木虱体内细菌多样性的 PCR-RFLP 法分析 | 第20-32页 |
·引言 | 第20页 |
·材料与仪器 | 第20-21页 |
·研究材料 | 第20-21页 |
·试验仪器 | 第21页 |
·试验试剂 | 第21页 |
·实验方法与步骤 | 第21-26页 |
·柑桔木虱细菌总DNA 的提取 | 第21-22页 |
·细菌16SrDNA 的PCR 扩增 | 第22-23页 |
·PCR 产物的纯化 | 第23页 |
·高效感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
·16SrDNA 文库的构建 | 第24页 |
·阳性克隆的筛选 | 第24-25页 |
·质粒DNA 的提取 | 第25-26页 |
·RFLP 酶切分型和系统进化关系分析 | 第26页 |
·结果与分析 | 第26-30页 |
·16SrDNA 的PCR 扩增 | 第26页 |
·阳性克隆的PCR 验证 | 第26-27页 |
·RFLP 分析结果 | 第27-29页 |
·系统发育分析 | 第29-30页 |
·本章小结 | 第30-32页 |
3 不同寄主及地区的柑桔木虱体内细菌多样性分析 | 第32-42页 |
·引言 | 第32页 |
·材料与仪器 | 第32-33页 |
·研究材料 | 第32-33页 |
·实验试剂 | 第33页 |
·实验仪器 | 第33页 |
·实验方法与步骤 | 第33-36页 |
·柑桔木虱体内细菌总DNA 的提取 | 第33页 |
·16SrDNA V3 区序列片段的PCR 扩增 | 第33-34页 |
·PCR 产物的DGGE 分离 | 第34-35页 |
·DGGE 胶上分离的DNA 条带回收及纯化 | 第35-36页 |
·16SrDNA 片段的PCR 再次扩增 | 第36页 |
·16SrDNA 片段的克隆测序 | 第36页 |
·结果与分析 | 第36-40页 |
·16SrDNA 片段的PCR 扩增 | 第36-37页 |
·扩增产物的变性梯度凝胶电泳(DGGE) | 第37-39页 |
·柑桔木虱体内细菌序列比对与系统发育分析 | 第39-40页 |
·本章小结 | 第40-42页 |
4 共生菌 Wolbachia 的检测及系统发育分析 | 第42-54页 |
·引言 | 第42-43页 |
·材料与仪器 | 第43-44页 |
·研究材料 | 第43-44页 |
·实验仪器 | 第44页 |
·实验试剂 | 第44页 |
·实验方法与步骤 | 第44-45页 |
·柑桔木虱总DNA 的提取 | 第44页 |
·PCR 扩增目的基因 | 第44-45页 |
·PCR 产物的回收及克隆测序 | 第45页 |
·序列分析 | 第45页 |
·实验结果 | 第45-53页 |
·PCR 扩增结果 | 第45-47页 |
·序列分析及系统发育树的建立 | 第47-53页 |
·本章小结 | 第53-54页 |
5 总结与讨论 | 第54-57页 |
·柑桔木虱体内细菌多样性及其功能 | 第54-55页 |
·我国部分地区柑桔木虱体内Wolbachia 的感染及应用前景 | 第55-56页 |
·研究方法的评价 | 第56-57页 |
6 后续工作与展望 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
附录 | 第65页 |