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光合细菌降解拟除虫菊酯类农药残留物研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-17页
第一章 前言第17-32页
   ·降解菌的分离第24-26页
   ·酶学的研究第26页
   ·不同光学异构体的降解研究第26-28页
   ·降解途径的研究第28-30页
   ·降解基因克隆第30页
   ·研究意义第30-32页
第二章 甲氰菊酯残留物IC-ELISA检测方法的建立第32-40页
   ·材料与方法第32-35页
     ·试剂第32页
     ·ELISA测定所用试剂第32-33页
     ·仪器第33页
     ·甲氰菊酯免疫抗原的合成与鉴定第33-34页
     ·甲氰菊酯多克隆抗体的制备第34页
     ·间接ELISA法测定包被原最佳工作浓度和抗血清效价第34页
     ·FA多抗交叉反应测定与标准曲线的建立第34-35页
   ·结果与分析第35-38页
     ·甲氰菊酯半抗原的紫外扫描分析第35-36页
     ·甲氰菊酸半抗原结合比第36页
     ·包被抗原工作质量浓度和抗体效价的确定第36页
     ·标准曲线的建立第36-37页
     ·交叉反应试验第37-38页
   ·讨论第38-39页
   ·结论第39-40页
第三章 降解拟除虫菊酯类农药残留物复合菌群的驯化第40-53页
   ·材料与方法第40-45页
     ·主要培养基、试剂和仪器第40-41页
     ·菌群的驯化第41页
     ·菌群细胞的获得第41页
     ·菌群JZ-1生物量测定第41-42页
     ·菌群降解拟除虫菊酯类农药残留物特点第42页
     ·拟除虫菊酯类农药残留量测定第42页
     ·16S rDNA扩增第42-43页
     ·16S rDNA文库构建及筛选第43页
     ·重组子16S rDNA PCR扩增及RFLP分析第43-44页
     ·测序与系统进化树分析第44页
     ·核酸序列注册登记号第44-45页
   ·结果与分析第45-51页
     ·驯化结果第45页
     ·菌群的降解特点第45-47页
     ·16S rDNA的PCR扩增第47页
     ·16S rDNA的文库构建及PCR扩增第47-48页
     ·RFLP和测序分析第48-51页
   ·讨论第51-52页
   ·结论第52-53页
第四章 光合细菌降解菌的分离与鉴定第53-63页
   ·材料与方法第53-56页
     ·培养基、主要试剂和仪器第53页
     ·降解菌的分离第53-54页
     ·降解菌的快速IC-ELISA筛选第54页
     ·电镜样品制备及观察第54页
     ·活细胞吸收光谱的测定第54-55页
     ·菌株的生理生化特征的测定第55页
     ·菌体16S rDNA序列的测定及系统发育分析第55-56页
     ·降解菌降解效率第56页
     ·甲氰菊酯残留量的测定第56页
   ·结果与分析第56-61页
     ·IC-ELISA快速筛选降解菌第56页
     ·菌株分离及其生理生化特性第56-59页
     ·菌体吸收光谱第59-60页
     ·16S rDNA序列同源性及其系统发育树分析第60-61页
     ·降解菌鉴定结果第61页
     ·降解菌降解效率第61页
   ·讨论第61-62页
   ·结论第62-63页
第五章 光合细菌PSB07-15降解拟除虫菊酯类农药残留物的特性第63-72页
   ·材料与方法第63-66页
     ·培养基、试剂与主要仪器第63页
     ·降解菌第63-64页
     ·对甲氰菊酯的耐受第64页
     ·不同初始条件降解效率第64页
     ·最适条件下降解效率第64页
     ·降解谱第64页
     ·代谢方式第64-65页
     ·降解菌粗酶液提取第65页
     ·降解酶活力测定第65页
     ·拟除虫菊酯类农药残留量的测定第65-66页
   ·结果与分析第66-70页
     ·对甲氰菊酯的耐受浓度第66页
     ·最适降解条件第66-68页
     ·最适条件下降解效率第68-69页
     ·代谢方式第69页
     ·降解酶定位第69-70页
   ·讨论第70页
   ·结论第70-72页
第六章 光合细菌PSB07-15降解甲氰菊酯残留物的机理第72-77页
   ·材料和方法第72-73页
     ·培养基、试剂和主要仪器第72页
     ·降解菌第72-73页
     ·降解过程中pH变化第73页
     ·试验处理及样品前处理第73页
     ·代谢中间产物检测第73页
   ·结果与分析第73-75页
     ·pH变化第73-74页
     ·代谢产物分析第74-75页
   ·讨论第75-76页
   ·结论第76-77页
第七章 光合细菌PSB07-15对作物生长的影响第77-82页
   ·材料与方法第77-79页
     ·试剂、培养基与仪器第77页
     ·降解菌第77页
     ·降解菌产吲哚乙酸的含量第77-78页
     ·降解菌ACC脱氨酶活性第78-79页
     ·降解菌对玉米根长的影响第79页
     ·数据处理第79页
   ·结果与分析第79-81页
     ·菌株PSB07-15产吲哚乙酸(IAA)量第79-80页
     ·菌株PSB07-15 ACC脱氨酶活性第80页
     ·菌株PSB07-15对玉米胚根生长的影响第80-81页
   ·讨论第81页
   ·结论第81-82页
第八章 光合细菌PSB07-15对水培黄瓜体系中甲氰菊酯污染的生物修复第82-92页
   ·材料与方法第82-86页
     ·培养基、试剂和主要仪器第82-83页
     ·降解菌与黄瓜品种第83页
     ·水培装置第83页
     ·黄瓜苗的准备与移植第83-84页
     ·处理设计第84页
     ·黄瓜生长情况测定第84页
     ·黄瓜根活力测定第84-85页
     ·黄瓜根H_2O_2酶活性测定第85页
     ·甲氰菊酯含量测定第85-86页
     ·数据分析方法第86页
   ·结果与分析第86-90页
     ·黄瓜生长情况第86-87页
     ·黄瓜根活力第87-88页
     ·黄瓜根H_2O_2酶活性第88页
     ·光合细菌PSB07-15降解黄瓜营养液中甲氰菊酯残留物第88-89页
     ·光合细菌PSB07-15降解黄瓜中的甲氰菊酯残留物第89-90页
   ·讨论第90-91页
   ·结论第91-92页
第九章 光合细菌PSB07-21降解拟除虫菊酯类农药残留物的特性及降解酶基因的克隆第92-101页
   ·材料与方法第92-94页
     ·培养基、试剂与主要仪器第92页
     ·降解菌第92页
     ·不同初始条件降解效率第92-93页
     ·最适条件下降解效率第93页
     ·总DNA提取第93页
     ·引物设计、降解酶基因的克隆与序列测定第93页
     ·序列分析第93-94页
     ·添加微量Fe(Ⅱ)降解试验第94页
     ·拟除虫菊酯类农药残留量的测定第94页
   ·结果与分析第94-99页
     ·菌株PSB07-21降解拟除虫菊酯类农药残留物最适条件第94-96页
     ·菌株PSB07-21降解拟除虫菊酯类农药残留物效率第96页
     ·引物设计第96页
     ·PCR克隆与测序第96-98页
     ·序列分析第98页
     ·添加微量Fe(Ⅱ)降解实验第98-99页
   ·讨论第99页
   ·结论第99-101页
参考文献第101-113页
致谢第113-115页
攻读学位期间主要的研究成果第115页

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