| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略词及中文对照 | 第8-13页 |
| 一、引言 | 第13-37页 |
| (一)氧化应激 | 第13-17页 |
| 1.活性氧的产生与清除 | 第13-14页 |
| 2.ROS的作用 | 第14-15页 |
| 3.氧化应激的结果 | 第15-17页 |
| (二)鸟嘌呤的氧化及修复 | 第17-27页 |
| 1.鸟嘌呤的氧化 | 第17-18页 |
| 2.DNA糖苷酶 | 第18-19页 |
| 3.8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1—OGG1 | 第19-27页 |
| (三)细胞的死亡 | 第27-35页 |
| 1.细胞死亡的类型 | 第27-28页 |
| 2.Parthanatos | 第28-35页 |
| (四)本论文立题依据、研究内容及意义 | 第35-37页 |
| 1.立题依据 | 第35页 |
| 2.研究内容 | 第35页 |
| 3.研究意义 | 第35-37页 |
| 二、实验材料与方法 | 第37-59页 |
| (一)实验材料 | 第37-40页 |
| 1.实验仪器 | 第37-38页 |
| 2.试剂及试剂盒 | 第38-39页 |
| 3.抗体 | 第39页 |
| 4.细胞系 | 第39-40页 |
| (二)实验方法 | 第40-59页 |
| 1.过表达质粒的构建 | 第40-44页 |
| 2.干涉质粒的构建 | 第44-45页 |
| 3.细胞培养 | 第45-46页 |
| 4.稳转细胞系的构建 | 第46-47页 |
| 5.脂质体转染 | 第47页 |
| 6.细胞死亡的检测 | 第47-48页 |
| 7.TUNEL标记法 | 第48-49页 |
| 8.彗星电泳 | 第49-50页 |
| 9.全蛋白提取 | 第50-51页 |
| 10.核质分离 | 第51-52页 |
| 11.免疫印迹 | 第52-54页 |
| 12.免疫荧光 | 第54-55页 |
| 13.点杂交 | 第55-57页 |
| 14.细胞核内ROS检测 | 第57页 |
| 15.数据分析 | 第57-59页 |
| 三、实验结果与分析 | 第59-78页 |
| (一)氧化应激触发PARP1依赖AIF介导的细胞死亡(Parthanatos) | 第59-63页 |
| (二)OGG1加剧氧化应激触发的Parthanatos | 第63-66页 |
| (三)OGG1能激活氧化应激诱导的Parthanatos信号通路 | 第66-69页 |
| 1.过度氧化应激时OGG1促进DNA断裂 | 第66-68页 |
| 2.过度氧化应激时OGG1能激活Parthanatos信号通路 | 第68-69页 |
| (四)OGG1起始的碱基切除修复加剧氧化应激引起的Parthanatos | 第69-74页 |
| 1.氧化应激促使OGG1发挥DNA糖苷酶活性 | 第69-71页 |
| 2.过度氧化应激时OGG1-BER加剧DNA断裂 | 第71页 |
| 3.过度氧化应激时OGG1-BER促进PARP1的过度活化 | 第71-72页 |
| 4.过度氧化应激时OGG1-BER促使AIF入核 | 第72-73页 |
| 5.OGG1-BER加剧氧化应激引起的Parthanatos | 第73-74页 |
| (五)OGG1参与到NMDA诱导神经细胞Parthanatos过程 | 第74-78页 |
| 1.NMDA刺激神经细胞会产生大量ROS | 第74-75页 |
| 2.OGG1加剧NMDA诱导神经细胞Parthanatos过程 | 第75-76页 |
| 3.OGG1-BER是NMDA诱导Parthanatos的主要原因 | 第76-78页 |
| 四、讨论 | 第78-84页 |
| (一)OGG1-BER产生的修复中间体是引发Parthanatos的主要原因 | 第78-80页 |
| 1.OGG1-BER产生的修复中间体是PARP1过度活化的主要原因 | 第79页 |
| 2.OGG1-BER是Parthanatos发生的主要驱动力 | 第79-80页 |
| (二)DNA糖苷酶在开启碱基切除修复通路中的重要性 | 第80-81页 |
| 1.DNA糖苷酶在开启碱基切除修复通路发挥重要作用 | 第80-81页 |
| 2.OGG1在开启碱基切除修复通路中尤为重要 | 第81页 |
| (三)OGG1-BER依据氧化应激程度触发不同的细胞生物学事件 | 第81-84页 |
| 1.OGG1-BER活性受氧化还原水平的调节 | 第81-82页 |
| 2.不同氧化水平下OGG1触发不同的细胞生物学事件 | 第82-84页 |
| 结论 | 第84-85页 |
| 创新点 | 第85-86页 |
| (一)阐明了OGG1在细胞死亡(parthanatos)过程中的作用 | 第85页 |
| (二)提示了OGG1在开启碱基切除修复通路中的重要性 | 第85页 |
| (三)揭示了OGG1-BER依据氧化应激程度触发不同细胞生物学事件 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-97页 |
| 致谢 | 第97-99页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第99页 |
