| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第14-39页 |
| 1.1 黑色素瘤概述 | 第14-19页 |
| 1.2 肿瘤免疫治疗概述 | 第19-26页 |
| 1.3 靶向纳米递药系统概述 | 第26-32页 |
| 1.4 白喉毒素基因概述 | 第32-34页 |
| 1.5 光控基因表达技术概述 | 第34-35页 |
| 1.6 立项依据 | 第35-39页 |
| 第2章 纳米胶束的载体材料合成与表征 | 第39-62页 |
| 2.1 引言 | 第39-40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-47页 |
| 2.2.1 材料与仪器 | 第40页 |
| 2.2.2 维生素E琥珀酸酯接枝聚乙烯亚胺(VES-g-PEI)的合成 | 第40-41页 |
| 2.2.3 含二硫键的维生素E琥珀酸酯接枝聚乙烯亚胺(VES-ss-PEI)的合成 | 第41-43页 |
| 2.2.4 聚乙二醇接枝透明质酸(mPEG-g-HA)的合成 | 第43-44页 |
| 2.2.5 含有靶头RGD的聚乙二醇接枝透明质酸(HA-PEG-RGD)的合成 | 第44-45页 |
| 2.2.6 中间体化合物的核磁氢谱检测 | 第45页 |
| 2.2.7 中间体化合物的核磁碳谱检测 | 第45-46页 |
| 2.2.8 产物的核磁氢谱检测 | 第46页 |
| 2.2.9 中间体的质谱检测 | 第46页 |
| 2.2.10 傅里叶变换红外光谱测定 | 第46-47页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第47-61页 |
| 2.3.1 VES-ss-PEI的合成与表征 | 第47-56页 |
| 2.3.2 HA-PEG-RGD的合成与表征 | 第56-59页 |
| 2.3.3 原料及产物的傅里叶傅里叶变换红外光谱分析 | 第59-61页 |
| 2.4 本章小结 | 第61-62页 |
| 第3章 靶向纳米递药系统的构建及其小鼠体内分布考察 | 第62-81页 |
| 3.1 引言 | 第62-63页 |
| 3.2 实验方法 | 第63-67页 |
| 3.2.1 材料与仪器 | 第63页 |
| 3.2.2 VES-ss-PEI纳米胶束的制备 | 第63页 |
| 3.2.3 阳离子纳米胶束的临界胶束浓度测定 | 第63-64页 |
| 3.2.4 胶束稀释稳定性实验 | 第64页 |
| 3.2.5 阳离子胶束材料的质子缓冲能力测定 | 第64页 |
| 3.2.6 VES-ss-PEI/HA-PEG-RGD纳米胶束的制备 | 第64页 |
| 3.2.7 VES-ss-PEI纳米胶束与VES-ss-PEI/HA-PEG-RGD纳米胶束的形态表征 | 第64页 |
| 3.2.8 纳米胶束的稳定性测试 | 第64页 |
| 3.2.9 血药浓度及组织药物浓度的标准曲线绘制 | 第64-65页 |
| 3.2.10 血药浓度及组织分布的测定 | 第65页 |
| 3.2.11 小鼠活体成像实验 | 第65-66页 |
| 3.2.12 统计学分析 | 第66-67页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第67-80页 |
| 3.3.1 VES-ss-PEI纳米胶束的制备与表征 | 第67-71页 |
| 3.3.2 VES-ss-PEI/HA-PEG-RGD纳米胶束的制备与表征 | 第71-73页 |
| 3.3.3 纳米胶束的稳定性考察 | 第73-74页 |
| 3.3.4 包载IR-775纳米胶束的体内药动学及组织分布考察 | 第74-78页 |
| 3.3.5 纳米胶束体内靶向性评价 | 第78-80页 |
| 3.4 本章小结 | 第80-81页 |
| 第4章 包载卵清蛋白多功能纳米胶束用于靶向黑色素瘤免疫治疗的研究 | 第81-97页 |
| 4.1 引言 | 第81-82页 |
| 4.2 实验方法 | 第82-86页 |
| 4.2.1 材料与仪器 | 第82页 |
| 4.2.2 OVA@mPEG-g-HA/VES-g-PEI纳米胶束的制备 | 第82页 |
| 4.2.3 OVA@mPEG-g-HA/VES-g-PEI纳米胶束的载药率测定 | 第82-83页 |
| 4.2.4 载蛋白纳米胶束的体外累积释放试验 | 第83页 |
| 4.2.5 B16-F10黑色素瘤细胞的培养 | 第83页 |
| 4.2.6 载蛋白纳米胶束的细胞摄取实验 | 第83页 |
| 4.2.7 载蛋白纳米胶束的细胞共定位实验 | 第83-84页 |
| 4.2.8 载蛋白纳米胶束促进OVA抗原交叉呈递实验 | 第84页 |
| 4.2.9 小鼠骨髓树突细胞成熟度实验 | 第84页 |
| 4.2.10 小鼠黑色素瘤皮下模型的建立 | 第84页 |
| 4.2.11 小鼠抑瘤实验 | 第84-85页 |
| 4.2.12 统计学分析 | 第85-86页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第86-96页 |
| 4.3.1 载OVA纳米胶束的制备与表征 | 第86页 |
| 4.3.2 载蛋白纳米胶束的体外释放特性 | 第86-88页 |
| 4.3.3 载蛋白纳米胶束的细胞摄取考察 | 第88-89页 |
| 4.3.4 载药纳米胶束细胞共定位考察 | 第89-91页 |
| 4.3.5 B16-F10细胞表面的MHC I-OVA_(257-264)多肽含量考察 | 第91-93页 |
| 4.3.6 OVA对树突细胞成熟度的考察 | 第93-94页 |
| 4.3.7 抑瘤实验相关结果 | 第94-96页 |
| 4.4 本章小结 | 第96-97页 |
| 第5章 载光控白喉毒素基因新型纳米胶束用于靶向黑色素瘤治疗的研究 | 第97-135页 |
| 5.1 引言 | 第97-99页 |
| 5.2 实验方法 | 第99-107页 |
| 5.2.1 材料与仪器 | 第99页 |
| 5.2.2 光控基因表达系统的构建 | 第99-100页 |
| 5.2.3 pDNA@VES-ss-PEI纳米胶束的制备 | 第100页 |
| 5.2.4 pDNA@VES-ss-PEI/HA-PEG-RGD纳米胶束的制备 | 第100页 |
| 5.2.5 琼脂糖凝胶电泳实验 | 第100页 |
| 5.2.6 载基因的纳米胶束的稳定性实验 | 第100-101页 |
| 5.2.7 载基因纳米胶束的体外释放实验 | 第101-102页 |
| 5.2.8 B16-F10黑色素瘤细胞的培养 | 第102页 |
| 5.2.9 载基因纳米胶束的细胞摄取实验 | 第102页 |
| 5.2.10 基因转染实验 | 第102页 |
| 5.2.11 细胞毒性实验 | 第102-103页 |
| 5.2.12 3D肿瘤球生长抑制实验 | 第103-104页 |
| 5.2.13 细胞划痕实验 | 第104页 |
| 5.2.14 细胞凋亡实验 | 第104页 |
| 5.2.15 细胞中白喉毒素蛋白含量的测定 | 第104页 |
| 5.2.16 小鼠黑色素瘤皮下模型的建立 | 第104-105页 |
| 5.2.17 光控白喉毒素基因治疗的小鼠抑瘤实验 | 第105页 |
| 5.2.18 小鼠黑色素瘤组织石蜡切片实验 | 第105页 |
| 5.2.19 脏器组织切片HE染色及肝肾功能相关指标的测定 | 第105-106页 |
| 5.2.20 光控白喉毒素基因联合OVA肿瘤免疫治疗的小鼠抑瘤实验 | 第106页 |
| 5.2.21 统计学分析 | 第106-107页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第107-134页 |
| 5.3.1 载pDNA纳米胶束的制备及表征 | 第107-111页 |
| 5.3.2 载pDNA纳米胶束的释放特性 | 第111-114页 |
| 5.3.3 载RITC-pDNA纳米胶束的细胞摄取能力的考察 | 第114-115页 |
| 5.3.4 蓝光照射强度对载绿色荧光蛋白基因纳米胶束转染能力的影响 | 第115-116页 |
| 5.3.5 蓝光照射条件下载光控白喉毒素基因纳米胶束对细胞抑制作用考察 | 第116-124页 |
| 5.3.6 体内抑瘤效果考察及相关机制的探讨 | 第124-132页 |
| 5.3.7 光控白喉毒素基因联合OVA肿瘤免疫治疗小鼠黑色素瘤的初步探讨 | 第132-134页 |
| 5.4 本章小结 | 第134-135页 |
| 全文总结 | 第135-137页 |
| 参考文献 | 第137-151页 |
| 致谢 | 第151-152页 |
| 附录1 | 第152-153页 |
| 附录2 | 第153-154页 |
