| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 附录 | 第8-12页 |
| 第1章 前言 | 第12-23页 |
| 1.1 再生医学与干细胞 | 第12-13页 |
| 1.1.1 再生医学 | 第12页 |
| 1.1.2 干细胞概念及分类 | 第12-13页 |
| 1.1.3 干细胞应用瓶颈 | 第13页 |
| 1.2 MSCs的临床应用 | 第13-16页 |
| 1.2.1 MSCs的特性 | 第13-15页 |
| 1.2.2 MSCs的应用 | 第15-16页 |
| 1.2.3 MSCs的体外扩增 | 第16页 |
| 1.3 无血清培养基 | 第16-20页 |
| 1.3.1 无血清培养基的发展历史 | 第16-17页 |
| 1.3.2 无血清培养基的研究方法 | 第17-19页 |
| 1.3.3 MSCs无血清培养基现状 | 第19-20页 |
| 1.4 无血清培养基中各组分的作用 | 第20-22页 |
| 1.4.1 糖类 | 第20页 |
| 1.4.2 氨基酸 | 第20页 |
| 1.4.3 维生素 | 第20页 |
| 1.4.4 脂质 | 第20-21页 |
| 1.4.5 无机盐 | 第21页 |
| 1.4.6 激素 | 第21页 |
| 1.4.7 促黏附因子 | 第21页 |
| 1.4.8 生长因子 | 第21-22页 |
| 1.5 课题提出 | 第22-23页 |
| 第2章 MSCs无血清培养基的筛选设计 | 第23-39页 |
| 2.1 引言 | 第23-24页 |
| 2.2 材料与方法 | 第24-27页 |
| 2.2.1 BMSCs分离 | 第24页 |
| 2.2.2 BMSCs传代 | 第24页 |
| 2.2.3 培养基PB设计 | 第24-25页 |
| 2.2.4 培养基配制 | 第25页 |
| 2.2.5 BMSCs接种 | 第25页 |
| 2.2.6 细胞形态学观察 | 第25页 |
| 2.2.7 细胞增殖测定 | 第25页 |
| 2.2.8 生长曲线测定 | 第25页 |
| 2.2.9 细胞表型分析 | 第25-26页 |
| 2.2.10 基因表达测定 | 第26-27页 |
| 2.2.11 BMSCs诱导分化 | 第27页 |
| 2.2.12 细胞集落形成能力检测 | 第27页 |
| 2.2.13 统计学分析 | 第27页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第27-36页 |
| 2.3.1 无血清培养基初筛实验 | 第27-31页 |
| 2.3.2 初筛无血清培养基的成分优化 | 第31-33页 |
| 2.3.3 OM中BMSCs的功能评价 | 第33-36页 |
| 2.4 讨论 | 第36-37页 |
| 2.5 本章小结 | 第37-39页 |
| 第3章 MSCs无血清培养基的优化 | 第39-52页 |
| 3.1 前言 | 第39-40页 |
| 3.2 材料与方法 | 第40-41页 |
| 3.2.1 胶原包被处理 | 第40页 |
| 3.2.2 响应面实验设计 | 第40页 |
| 3.2.3 培养基配制 | 第40页 |
| 3.2.4 BMSCs接种 | 第40页 |
| 3.2.5 细胞形态学观察 | 第40页 |
| 3.2.6 细胞增殖测定 | 第40页 |
| 3.2.7 生长曲线测定 | 第40页 |
| 3.2.8 表面表型分析 | 第40页 |
| 3.2.9 基因表达测定 | 第40页 |
| 3.2.10 BMSCs诱导分化 | 第40页 |
| 3.2.11 细胞集落形成能力检测 | 第40页 |
| 3.2.12 统计学分析 | 第40-41页 |
| 3.3 结果 | 第41-50页 |
| 3.3.1 胶原预铺处理 | 第41-42页 |
| 3.3.2 最速上升法 | 第42-44页 |
| 3.3.3 响应面设计 | 第44-47页 |
| 3.3.4 SM中细胞生长和功能的表征 | 第47-50页 |
| 3.4 讨论 | 第50-51页 |
| 3.5 本章小结 | 第51-52页 |
| 第4章 关键因子TGF-β1调控BMSCs增殖的机制研究 | 第52-66页 |
| 4.1 引言 | 第52-53页 |
| 4.2 材料与方法 | 第53-55页 |
| 4.2.1 培养基配制 | 第53页 |
| 4.2.2 细胞周期检测 | 第53页 |
| 4.2.3 TGF-β1受体抑制剂SB431542(SB)处理 | 第53页 |
| 4.2.4 FAK抑制剂PF573228(PF)处理 | 第53页 |
| 4.2.5 Western blot检测 | 第53-54页 |
| 4.2.6 TGF-β1的处理方法及细胞计数 | 第54页 |
| 4.2.7 BMSCs接种 | 第54页 |
| 4.2.8 细胞增殖测定 | 第54页 |
| 4.2.9 生长曲线测定 | 第54页 |
| 4.2.10 表面表型分析 | 第54页 |
| 4.2.11 基因表达测定 | 第54-55页 |
| 4.2.12 BMSCs诱导分化 | 第55页 |
| 4.2.13 统计学分析 | 第55页 |
| 4.3 结果 | 第55-64页 |
| 4.3.1 TGF-β1对BMSCs增殖的影响 | 第55-58页 |
| 4.3.2 TGF-β1对细胞增殖相关通路的影响 | 第58-59页 |
| 4.3.3 TGF-β1在FAK-Akt-mTOR通路中的作用 | 第59-61页 |
| 4.3.4 TGF-β1对BMSCs生长和功能的影响 | 第61-64页 |
| 4.4 讨论 | 第64-65页 |
| 4.5 本章小结 | 第65-66页 |
| 第5章 全文总结与展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 硕士期间研究成果 | 第76页 |
