| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第15-29页 |
| 1.1 胃癌 | 第15-16页 |
| 1.2 毛壳素的研究现状 | 第16-18页 |
| 1.2.1 毛壳素是真核细胞组蛋白甲基转移酶SUV39的特异性抑制剂 | 第16-17页 |
| 1.2.2 毛壳素的抗病毒作用 | 第17页 |
| 1.2.3 毛壳素能够改善心血管疾病 | 第17-18页 |
| 1.2.4 毛壳素的抗肿瘤作用 | 第18页 |
| 1.3 细胞凋亡 | 第18-24页 |
| 1.3.1 细胞凋亡的途径 | 第19-22页 |
| 1.3.1.1 Caspase依赖性的细胞凋亡 | 第20-21页 |
| 1.3.1.2 Caspase非依赖性的细胞凋亡 | 第21页 |
| 1.3.1.3 穿孔蛋白-颗粒酶介导的细胞凋亡 | 第21-22页 |
| 1.3.2 BID与AIF在凋亡中的作用 | 第22-24页 |
| 1.4 细胞自噬 | 第24-28页 |
| 1.4.1 细胞自噬的含义和基本过程 | 第24-25页 |
| 1.4.2 细胞自噬的调节 | 第25-26页 |
| 1.4.3 自噬与凋亡的关系 | 第26-28页 |
| 1.5 课题研究的目的和意义 | 第28-29页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第29-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-32页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第29页 |
| 2.1.2 细胞培养材料和试剂 | 第29页 |
| 2.1.3 抗体和工具酶 | 第29-30页 |
| 2.1.4 主要化学试剂和耗材 | 第30-31页 |
| 2.1.5 主要实验仪器 | 第31-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-44页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第32-33页 |
| 2.2.2 MTT法检测细胞存活率 | 第33页 |
| 2.2.3 流式细胞仪检测细胞死亡率 | 第33页 |
| 2.2.4 蛋白质相关实验的方法 | 第33-35页 |
| 2.2.4.1 全蛋白的抽提 | 第33-34页 |
| 2.2.4.2 细胞质、细胞核蛋白的抽提 | 第34页 |
| 2.2.4.3 蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western Blotting | 第34-35页 |
| 2.2.5 RNA的相关实验 | 第35-37页 |
| 2.2.5.1 RNA的抽提 | 第35页 |
| 2.2.5.2 RNA的反转录 | 第35-36页 |
| 2.2.5.3 实时荧光定量PCR | 第36-37页 |
| 2.2.6 质粒构建 | 第37-41页 |
| 2.2.7 病毒的包装 | 第41页 |
| 2.2.8 细胞感染及稳转株的筛选 | 第41-42页 |
| 2.2.9 Hoechst33342染色观察细胞核形态 | 第42页 |
| 2.2.10 吖啶橙染色检测自噬囊泡 | 第42页 |
| 2.2.11 线粒体膜电位的检测 | 第42-43页 |
| 2.2.12 细胞内ROS检测 | 第43页 |
| 2.2.13 免疫荧光 | 第43-44页 |
| 2.3 主要溶液的配制 | 第44-47页 |
| 2.3.1 细胞培养实验相关溶液 | 第44页 |
| 2.3.2 全蛋白抽提相关溶液 | 第44-45页 |
| 2.3.3 核浆蛋白抽提相关溶液 | 第45页 |
| 2.3.4 蛋白印迹相关溶液 | 第45-46页 |
| 2.3.5 质粒抽提相关溶液 | 第46页 |
| 2.3.6 其他常用溶液 | 第46-47页 |
| 2.4 统计学分析 | 第47-48页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第48-65页 |
| 3.1 毛壳素能够诱导胃癌细胞发生凋亡 | 第48-53页 |
| 3.1.1 毛壳素促进胃癌细胞死亡 | 第48-50页 |
| 3.1.2 毛壳素诱导胃癌细胞发生caspase依赖的凋亡 | 第50-51页 |
| 3.1.3 毛壳素诱导胃癌细胞发生caspase非依赖的凋亡 | 第51-53页 |
| 3.2 毛壳素主要通过caspase非依赖的AIF信号通路诱导胃癌细胞发生凋亡 | 第53-55页 |
| 3.3 毛壳素通过BID介导AIF入核引发胃癌细胞发生Caspase非依赖的凋亡 | 第55-58页 |
| 3.3.1 毛壳素诱导AIF发生核转位 | 第55-57页 |
| 3.3.2 毛壳素诱导AIF发生核转位是在BID的介导下完成的 | 第57-58页 |
| 3.4 毛壳素可降低人胃癌细胞的线粒体膜电位而不依赖于ROS的释放 | 第58-61页 |
| 3.5 自噬在毛壳素诱导的胃癌细胞凋亡过程中的作用 | 第61-65页 |
| 3.5.1 毛壳素诱导胃癌细胞发生自噬 | 第61-62页 |
| 3.5.2 抑制毛壳素引发的自噬可促进胃癌细胞凋亡 | 第62-65页 |
| 第四章 讨论 | 第65-70页 |
| 第五章 结论 | 第70-71页 |
| 主要缩略表 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
