| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 乳腺癌概论 | 第13-23页 |
| 1.乳腺癌分型 | 第13-16页 |
| 1.1 管腔上皮A型 | 第14页 |
| 1.2 管腔上皮B型 | 第14-15页 |
| 1.3 三阴性乳腺癌 | 第15页 |
| 1.4 人类表皮生长因子受体2型 | 第15页 |
| 1.5 低Claudin型 | 第15页 |
| 1.6 正常样乳腺癌 | 第15-16页 |
| 2 乳腺癌治疗 | 第16-19页 |
| 2.1 内分泌治疗 | 第16-17页 |
| 2.2 化疗药物 | 第17-18页 |
| 2.3 单克隆抗体 | 第18页 |
| 2.4 蛋白酪氨酸激酶抑制剂 | 第18-19页 |
| 3 雌激素在乳腺癌中的重要作用 | 第19-23页 |
| 3.1 雌激素与乳腺癌变 | 第19-21页 |
| 3.2 雌激素暴露临床指标与乳腺癌风险 | 第21-22页 |
| 3.3 雌激素与乳腺癌风险总结 | 第22-23页 |
| 环形RNA简介 | 第23-26页 |
| 1.1 环形RNA研究历程 | 第23-24页 |
| 1.2 circRNA的分类与功能 | 第24-26页 |
| 1.2.1 外显子型circRNA | 第24-25页 |
| 1.2.2 内含子型circRNA | 第25页 |
| 1.2.3 内含子保留型circRNA | 第25-26页 |
| 本课题研究意义 | 第26-27页 |
| 材料和方法 | 第27-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-35页 |
| 2.1.1 主要实验仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.2 主要实验试剂耗材 | 第28-29页 |
| 2.1.3 主要引物 | 第29-32页 |
| 2.1.4 细胞株、菌种与质粒 | 第32页 |
| 2.1.5 主要溶液 | 第32-35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-54页 |
| 2.2.1 细胞传代、冻存、复苏 | 第35-36页 |
| 2.2.2 siRNA或DNA转染 | 第36-37页 |
| 2.2.3 RNA提取、反转录、PCR、qPCR | 第37-41页 |
| 2.2.4 细胞增殖、克隆形成、细胞周期实验 | 第41-42页 |
| 2.2.5 环形RNA的定义 | 第42-43页 |
| 2.2.6 环形RNA的鉴定 | 第43页 |
| 2.2.7 RNA原位杂交 | 第43-45页 |
| 2.2.8 shRNA分子克隆、质粒小提、质粒小提中量、病毒包装 | 第45-49页 |
| 2.2.9 核质分离 | 第49-50页 |
| 2.2.10 RNA沉降(全程无核酸酶) | 第50-52页 |
| 2.2.11 SDS-PAGE蛋白胶银染 | 第52-54页 |
| 实验结果与讨论 | 第54-78页 |
| 3.1 实验结果 | 第54-73页 |
| 3.1.1 从RNA-seq数据中发现circRNA | 第54-55页 |
| 3.1.2 对预测结果进行初步分析 | 第55-57页 |
| 3.1.3 对预测结果进行验证 | 第57-58页 |
| 3.1.4 通过RNase R富集circRNA | 第58-59页 |
| 3.1.5 对circRNA-seq预测结果进行验证 | 第59-60页 |
| 3.1.6 circPGR对RNase R耐受性的探讨 | 第60-61页 |
| 3.1.7 雌激素对circPGR诱导情况 | 第61-62页 |
| 3.1.8 circPGR细胞定位的探讨 | 第62-63页 |
| 3.1.9 circPGR对MCF7增殖的影响 | 第63-64页 |
| 3.1.10 circPGR对MCF7细胞周期的影响 | 第64-65页 |
| 3.1.11 通过RNA-seq无偏见的揭示circPGR调控的基因 | 第65-68页 |
| 3.1.12 通过qPCR验证调控结果 | 第68-69页 |
| 3.1.13 circPGR影响雌激素诱导基因的表达 | 第69-70页 |
| 3.1.14 circPGR在不同种类的乳腺细胞中的表达情况 | 第70页 |
| 3.1.15 通过RNA-seq寻找高表达circRNA | 第70-71页 |
| 3.1.16 circPVT1对MCF7细胞增殖具有重要影响 | 第71-72页 |
| 3.1.17 探索与circPVT1结合的蛋白 | 第72-73页 |
| 3.2 讨论 | 第73-77页 |
| 3.2.1 circRNA在乳腺癌MCF7细胞中广泛存在 | 第73-74页 |
| 3.2.2 通过RNA-seq难以找到受雌激素诱导的circRNA | 第74页 |
| 3.2.3 通过circRNA-seq发现有激素诱导的circRNA | 第74-75页 |
| 3.2.4 circPGR真实存在并主要定位于细胞质 | 第75-76页 |
| 3.2.5 circPGR对MCF7细胞增殖与细胞周期具有显著影响 | 第76页 |
| 3.2.6 RNA-seq无偏见揭示circPGR参与细胞周期 | 第76页 |
| 3.2.7 circPGR在乳腺癌细胞中高表达 | 第76页 |
| 3.2.8 circPVT1在乳腺癌细胞中高表达 | 第76-77页 |
| 3.3 结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-84页 |
| 致谢 | 第84-86页 |
