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稻瘟病菌SNARE蛋白MoSyn8和MoVam7调控外泌和囊泡转运机制研究

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
引言第11-12页
上篇 文献综述第12-63页
    第一章 稻瘟病菌与水稻互作的细胞生物学研究概况第13-47页
        1 稻瘟病菌侵染循环第13-14页
        2 稻瘟病菌与寄主互作的细胞生物学机制研究概况第14-17页
            2.1 植物免疫系统第14-15页
            2.2 稻瘟病菌效应分子第15-16页
            2.3 稻瘟病菌效应分子抑制寄主免疫反应机制研究概况第16-17页
        3 稻瘟病菌效应分子分泌系统第17-18页
        4 效应分子在寄主细胞间的转运机制第18-19页
        5 植物激素在水稻免疫过程中的相互作用第19-26页
            5.1 水杨酸在水稻防卫反应过程中的作用第20-21页
            5.2 茉莉酸在水稻防卫反应过程中的作用第21-22页
            5.3 乙烯在水稻防卫反应过程中的作用第22-23页
            5.4 赤霉素在水稻防卫反应过程中的作用第23-24页
            5.5 生长素在水稻防卫反应过程中的作用第24-25页
            5.6 油菜素甾醇在水稻防卫反应过程中的作用第25页
            5.7 脱落酸在水稻防卫反应过程中的作用第25-26页
        6 叶绿体在植物免疫反应过程中的作用第26-32页
            6.1 叶绿体是合成防卫分子前体的主要场所第27-29页
            6.2 微生物效应分子干扰叶绿体中防卫分子前体的形成第29-30页
            6.3 微生物效应分子直接靶向叶绿体促进病害的形成第30-32页
        展望第32-33页
        参考文献第33-47页
    第二章 SNARE蛋白在囊泡运输过程中的作用第47-63页
        1 SNARE蛋白的结构第47-48页
        2 SNARE蛋白的分类第48页
        3 SNARE蛋白在膜融合过程中的作用第48-49页
        4 SNARE蛋白的定位和特异性第49-50页
        5 SNARE蛋白在囊泡运输过程中的作用第50-55页
            5.1 囊泡的形成第50-53页
            5.2 SNARE在胞吞过程中的作用第53-54页
            5.3 SNARE蛋白在外泌过程中的作用第54-55页
        6 SNARE蛋白调控效应分子的分泌第55-56页
        展望第56-57页
        参考文献第57-63页
下篇 研究内容第63-145页
    第一章 稻瘟病菌SNARE蛋白MoSyn8调控外泌蛋白分泌的机制研究第65-81页
        1 材料与方法第66-69页
            1.1 供试菌株及培养条件第66-67页
            1.2 载体构建第67-68页
            1.3 水稻喷雾和叶鞘侵染第68页
            1.4 菌丝荧光显微观察第68-69页
            1.5 外泌蛋白的提取第69页
        2 结果与分析第69-75页
            2.1 MoSyn8调控无毒效应分子的分泌第69-71页
            2.2 MoSyn8调控细胞质效应分子Avr-Pia和Avr-Piz-t的分泌第71-74页
            2.3 外泌蛋白质组鉴定MoSyn8调控的外泌蛋白第74-75页
            2.4 外泌相关基因的敲除及致病性测定第75页
        3 讨论第75-78页
        参考文献第78-81页
    第二章 外泌致病因子MoPrs5抑制寄主防卫反应的机制研究第81-111页
        1 材料与方法第83-85页
            1.1 试验材料及培养条件第83页
            1.2 稻瘟病菌DNA和侵染阶段RNA的提取及cDNA的合成第83页
            1.3 水稻喷雾、叶鞘侵染和DAB染色第83页
            1.4 载体构建第83-84页
            1.5 信号肽功能验证第84-85页
            1.6 磷酸化检测第85页
        2 结果与分析第85-103页
            2.1 MoPRS5基因在菌丝阶段和侵染早期上调表达第85-86页
            2.2 MoPrs5调控稻瘟病菌营养菌丝生长,不影响分生孢子形成及分化第86-87页
            2.3 MoPrs5调控稻瘟病菌致病力第87-88页
            2.4 MoPrs5调控侵染菌丝扩展第88-89页
            2.5 MoPrs5抑制ROS的产生第89-90页
            2.6 MoPrs5氨基端信号肽能够正常行使外泌功能第90-91页
            2.7 MoPrs5侵染阶通过BIC结构分泌到寄主细胞中第91-92页
            2.8 MoPrs5能够抑制BAX诱导的烟草细胞坏死第92-93页
            2.9 MoPrs5与水稻中的叶绿素a/b结合蛋白互作第93-95页
            2.10 MoPrs5与Lhcb5在叶绿体中共定位第95-96页
            2.11 MoPRS5和LHCB5转基因水稻的获得及验证第96-97页
            2.12 Lhcb5调控水稻对稻瘟病菌的抗性第97-98页
            2.13 稻瘟病菌侵染诱导LHCB5-OE过表达材料细胞坏死第98-100页
            2.14 Lhcb5调控水稻对稻瘟病菌的广谱抗性第100页
            2.15 MoPRS5不影响LHBC5的转录和翻译第100-101页
            2.16 MoPrs5劫持Lhcb5的磷酸化基团第101-103页
        3 讨论第103-106页
        参考文献第106-111页
    第三章 SNARE蛋白MoVam7调控囊泡相关蛋白转运机制研究第111-145页
        1 材料与方法第113-115页
            1.1 试验材料及培养条件第113页
            1.2 稻瘟病菌DNA和侵染阶段RNA的提取及cDNA的合成第113页
            1.3 水稻喷雾、叶鞘侵染和DAB染色第113页
            1.4 囊泡的提取和纯化第113-114页
            1.5 敲除载体的构建和Southern验证第114-115页
            1.6 不同细胞器组分蛋白载体构建及Western blot检测第115页
        2 结果与分析第115-138页
            2.1 MoVam7调控的囊泡蛋白的鉴定第115-121页
            2.2 囊泡蛋白提取特异性及囊泡相关基因转录水平分析第121-122页
            2.3 MoVam7影响MoSsa1的定位第122页
            2.4 MoVam7与MoSsa1互作调控网格蛋白解聚过程第122-124页
            2.5 MoSwa2调控稻瘟病菌致病力第124-126页
            2.6 MoSwa2抑制水稻的防卫反应促进侵染菌丝扩展第126-127页
            2.7 MoSwa2抑制寄主ROS的产生第127页
            2.8 △Moswa2突变体诱导的防卫反应与ROS信号通路相关第127-128页
            2.9 MoSwa2调控胞外蛋白的分泌,帮助病菌规避寄主免疫反应第128-129页
            2.10 MoSwa2调控无毒效应分子Avr-Pia的分泌第129-132页
            2.11 MoSwa2调控胞外蛋白的分泌第132-133页
            2.12 MoVam7和MoSwa2调控胞吞过程第133-134页
            2.13 MoVam7和MoSwa2调控网格蛋白动态平衡第134-135页
            2.14 MoVam7调控Cvt途径第135-136页
            2.15 MoSwa2定位于囊泡上第136-138页
        3 讨论第138-141页
        参考文献第141-145页
全文总结及创新点第145-147页
附录一 试验常用培养基第147-150页
附录二 实验所用引物第150-155页
致谢第155页

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