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一个陆地棉小G蛋白基因GhRab11d3及其启动子的特征与功能分析

摘要第8-11页
ABSTRACT第11-14页
本文所用主要缩略词第15-17页
第一部分 文献综述第17-39页
    第一章 棉花纤维发育的研究进展第17-23页
        1 棉花纤维细胞的四大发育过程第17-19页
        2 棉花纤维发育相关基因的研究进展第19-23页
    第二章 植物Rab类蛋白的研究进展第23-31页
        1 Rab蛋白的命名和分类第23-24页
        2 Rab蛋白的结构特点第24-26页
        3 Rab蛋白的功能第26-31页
            3.1 Rab蛋白在植物生长发育中的作用第26-28页
            3.2 Rab蛋白在生物和非生物胁迫中的作用第28-31页
    第三章 植物启动子的研究进展第31-37页
        1 植物启动子的一般结构第31-32页
        2 植物启动子的一般类型第32-35页
            2.1 组成型启动子第32-33页
            2.2 特异型启动子第33-35页
            2.3 诱导型启动子第35页
        3 植物启动子的研究方法第35-37页
            3.1 启动子缺失分析第35-36页
            3.2 突变及获得或失去功能分析第36页
            3.3 调控元件和结合蛋白互作分析第36-37页
    本研究的目的和意义第37-39页
第二部分 研究报告第39-121页
    第四章 雷蒙德氏棉Rab基因家族分析第39-57页
        1 材料与方法第39-40页
            1.1 数据库第39页
            1.2 棉花中Rab蛋白的发掘第39页
            1.3 棉花中Rab蛋白的基本生物信息学分析第39页
            1.4 棉花中Rab蛋白的序列比对第39-40页
            1.5 棉花中Rab蛋白的系统进化树的构建第40页
            1.6 棉花中Rab蛋白的基因结构分析第40页
            1.7 棉花中Rab蛋白的基因染色体分布分析第40页
            1.8 棉花中Rab蛋白的RNAseq数据分析第40页
        2 结果与分析第40-55页
            2.1 雷蒙德氏棉中Rab基因家族成员的鉴定结果第40页
            2.2 雷蒙德氏棉中Rab基因家族成员的命名第40-41页
            2.3 雷蒙德氏棉中Rab基因家族成员的基本生物信息学分析第41-45页
            2.4 雷蒙德氏棉中Rab基因家族成员的系统进化分析第45-48页
            2.5 雷蒙德氏棉Rab基因家族成员的基因结构分析第48-51页
            2.6 雷蒙德氏棉中Rab基因家族成员的染色体分布第51页
            2.7 Rab家族成员基因表达模式分析第51-55页
        3 讨论第55-57页
            3.1 雷蒙德氏棉中Rab蛋白基因家族成员的分类与基因结构基本具有一致性第55-56页
            3.2 棉花中Rab蛋白基因家族成员的表达模式表明其功能的多样性第56-57页
    第五章 陆地棉小G蛋白基因GhRab11d3的特征及功能分析第57-99页
        1 材料与方法第57-72页
            1.1 植物材料第57页
            1.2 菌株和质粒第57-59页
            1.3 培养基的配置第59-62页
            1.4 序列分析网站第62-63页
            1.5 DNA的提取第63页
            1.6 荧光定量PCR分析第63页
            1.7 GhRab11d3基因组和cDNA序列的克隆第63-65页
            1.8 亚细胞定位第65页
            1.9 农杆菌介导的棉花遗传转化第65-67页
            1.10 转基因植株的检测第67-68页
            1.11 转基因植株的表达分析第68页
            1.12 转基因植株的纤维品质检测第68页
            1.13 酵母诱饵载体的构建以及棉纤维酵母文库的筛选第68-70页
            1.14 双分子荧光互补BiFC的验证第70-71页
            1.15 纤维中肌动蛋白细胞骨架的检测第71页
            1.16 纤维中囊泡荧光染色和果胶含量的测定第71-72页
        2 结果与分析第72-95页
            2.1 GhRab11d3的发现第72-73页
            2.2 GhRab11d3的序列分析及遗传进化分析第73-77页
            2.3 GhRab11d3的原核表达分析第77-78页
            2.4 GhRab11d3在棉花不同组织中的表达分析第78-79页
            2.5 GhRab11d3的亚细胞定位第79-80页
            2.6 转基因植株的获得第80-81页
            2.7 转基因植株的PCR检测和转基因纯合株系的获得第81-82页
            2.8 GhRab11d3在转基因纯合株系中的表达分析第82-85页
            2.9 GhRab11d3在转基因纯合株系中的表型观察第85-89页
            2.10 GhRab11d3互作蛋白的发掘及验证第89-93页
            2.11 棉纤维中囊泡荧光染色及果胶含量的测定第93-95页
        3 讨论第95-99页
            3.1 GhRab11d3基因在不同棉种和不同物种中高度保守第95页
            3.2 GhRab11d3基因在棉纤维伸长期优势表达第95-96页
            3.3 GhRab11d3转基因材料的获得及对纤维长度的影响第96-97页
            3.4 GhRab11d3对于细胞骨架蛋白微丝F-actin及细胞壁组分果胶含量的影响第97-99页
    第六章 陆地棉小G蛋白基因GhRab11d3启动子的特征及功能分析第99-121页
        1 材料与方法第99-106页
            1.1 植物材料第99页
            1.2 菌株和质粒第99-100页
            1.3 培养基的配置第100页
            1.4 启动子的克隆第100-101页
            1.5 启动子的分析第101页
            1.6 缺失启动子的载体构建第101页
            1.7 农杆菌介导的烟草的稳定遗传转化第101页
            1.8 转基因后代植株的PCR检测第101-102页
            1.9 GUS报告基因的定性检测第102-104页
            1.10 烟草胚珠的外源激素诱导处理第104-105页
            1.11 基因枪介导的融合载体在植物组织中的瞬时表达第105-106页
        2 结果与分析第106-118页
            2.1 GhRab11d3在伸长期纤维中优势表达第106-107页
            2.2 GhRab11d3启动子的克隆及序列分析第107-110页
            2.3 GhRab11d3启动子各缺失载体对烟草的遗传转化以及转基因后代纯系植株的获得第110-111页
            2.4 pGhRab11d3在烟草各组织器官中的功能分析第111-112页
            2.5 pGhRab11d3的546 bp大小对于驱动GUS报告基因在烟草各组织器官中的表达是必须的第112-115页
            2.6 pGhRab11d3可以被GA、IAA和6-BA所诱导,却不能被ABA所诱导第115-116页
            2.7 pGhRab11d3在纤维发育中的功能第116-118页
        3 讨论第118-121页
            3.1 GhRab11d3启动子受多种激素诱导调控第118-119页
            3.2 AGL15和MYB顺式作用元件可能是GhRab11d3启动子的核心调控元件第119页
            3.3 GhRab11d3启动子可以作为改良棉花纤维品质和增强激素应答的重要工具第119-121页
全文结论第121-123页
创新点第123-125页
参考文献第125-137页
附录第137-139页
致谢第139-141页
发表论文第141页

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