摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
本文所用主要缩略词 | 第15-17页 |
第一部分 文献综述 | 第17-39页 |
第一章 棉花纤维发育的研究进展 | 第17-23页 |
1 棉花纤维细胞的四大发育过程 | 第17-19页 |
2 棉花纤维发育相关基因的研究进展 | 第19-23页 |
第二章 植物Rab类蛋白的研究进展 | 第23-31页 |
1 Rab蛋白的命名和分类 | 第23-24页 |
2 Rab蛋白的结构特点 | 第24-26页 |
3 Rab蛋白的功能 | 第26-31页 |
3.1 Rab蛋白在植物生长发育中的作用 | 第26-28页 |
3.2 Rab蛋白在生物和非生物胁迫中的作用 | 第28-31页 |
第三章 植物启动子的研究进展 | 第31-37页 |
1 植物启动子的一般结构 | 第31-32页 |
2 植物启动子的一般类型 | 第32-35页 |
2.1 组成型启动子 | 第32-33页 |
2.2 特异型启动子 | 第33-35页 |
2.3 诱导型启动子 | 第35页 |
3 植物启动子的研究方法 | 第35-37页 |
3.1 启动子缺失分析 | 第35-36页 |
3.2 突变及获得或失去功能分析 | 第36页 |
3.3 调控元件和结合蛋白互作分析 | 第36-37页 |
本研究的目的和意义 | 第37-39页 |
第二部分 研究报告 | 第39-121页 |
第四章 雷蒙德氏棉Rab基因家族分析 | 第39-57页 |
1 材料与方法 | 第39-40页 |
1.1 数据库 | 第39页 |
1.2 棉花中Rab蛋白的发掘 | 第39页 |
1.3 棉花中Rab蛋白的基本生物信息学分析 | 第39页 |
1.4 棉花中Rab蛋白的序列比对 | 第39-40页 |
1.5 棉花中Rab蛋白的系统进化树的构建 | 第40页 |
1.6 棉花中Rab蛋白的基因结构分析 | 第40页 |
1.7 棉花中Rab蛋白的基因染色体分布分析 | 第40页 |
1.8 棉花中Rab蛋白的RNAseq数据分析 | 第40页 |
2 结果与分析 | 第40-55页 |
2.1 雷蒙德氏棉中Rab基因家族成员的鉴定结果 | 第40页 |
2.2 雷蒙德氏棉中Rab基因家族成员的命名 | 第40-41页 |
2.3 雷蒙德氏棉中Rab基因家族成员的基本生物信息学分析 | 第41-45页 |
2.4 雷蒙德氏棉中Rab基因家族成员的系统进化分析 | 第45-48页 |
2.5 雷蒙德氏棉Rab基因家族成员的基因结构分析 | 第48-51页 |
2.6 雷蒙德氏棉中Rab基因家族成员的染色体分布 | 第51页 |
2.7 Rab家族成员基因表达模式分析 | 第51-55页 |
3 讨论 | 第55-57页 |
3.1 雷蒙德氏棉中Rab蛋白基因家族成员的分类与基因结构基本具有一致性 | 第55-56页 |
3.2 棉花中Rab蛋白基因家族成员的表达模式表明其功能的多样性 | 第56-57页 |
第五章 陆地棉小G蛋白基因GhRab11d3的特征及功能分析 | 第57-99页 |
1 材料与方法 | 第57-72页 |
1.1 植物材料 | 第57页 |
1.2 菌株和质粒 | 第57-59页 |
1.3 培养基的配置 | 第59-62页 |
1.4 序列分析网站 | 第62-63页 |
1.5 DNA的提取 | 第63页 |
1.6 荧光定量PCR分析 | 第63页 |
1.7 GhRab11d3基因组和cDNA序列的克隆 | 第63-65页 |
1.8 亚细胞定位 | 第65页 |
1.9 农杆菌介导的棉花遗传转化 | 第65-67页 |
1.10 转基因植株的检测 | 第67-68页 |
1.11 转基因植株的表达分析 | 第68页 |
1.12 转基因植株的纤维品质检测 | 第68页 |
1.13 酵母诱饵载体的构建以及棉纤维酵母文库的筛选 | 第68-70页 |
1.14 双分子荧光互补BiFC的验证 | 第70-71页 |
1.15 纤维中肌动蛋白细胞骨架的检测 | 第71页 |
1.16 纤维中囊泡荧光染色和果胶含量的测定 | 第71-72页 |
2 结果与分析 | 第72-95页 |
2.1 GhRab11d3的发现 | 第72-73页 |
2.2 GhRab11d3的序列分析及遗传进化分析 | 第73-77页 |
2.3 GhRab11d3的原核表达分析 | 第77-78页 |
2.4 GhRab11d3在棉花不同组织中的表达分析 | 第78-79页 |
2.5 GhRab11d3的亚细胞定位 | 第79-80页 |
2.6 转基因植株的获得 | 第80-81页 |
2.7 转基因植株的PCR检测和转基因纯合株系的获得 | 第81-82页 |
2.8 GhRab11d3在转基因纯合株系中的表达分析 | 第82-85页 |
2.9 GhRab11d3在转基因纯合株系中的表型观察 | 第85-89页 |
2.10 GhRab11d3互作蛋白的发掘及验证 | 第89-93页 |
2.11 棉纤维中囊泡荧光染色及果胶含量的测定 | 第93-95页 |
3 讨论 | 第95-99页 |
3.1 GhRab11d3基因在不同棉种和不同物种中高度保守 | 第95页 |
3.2 GhRab11d3基因在棉纤维伸长期优势表达 | 第95-96页 |
3.3 GhRab11d3转基因材料的获得及对纤维长度的影响 | 第96-97页 |
3.4 GhRab11d3对于细胞骨架蛋白微丝F-actin及细胞壁组分果胶含量的影响 | 第97-99页 |
第六章 陆地棉小G蛋白基因GhRab11d3启动子的特征及功能分析 | 第99-121页 |
1 材料与方法 | 第99-106页 |
1.1 植物材料 | 第99页 |
1.2 菌株和质粒 | 第99-100页 |
1.3 培养基的配置 | 第100页 |
1.4 启动子的克隆 | 第100-101页 |
1.5 启动子的分析 | 第101页 |
1.6 缺失启动子的载体构建 | 第101页 |
1.7 农杆菌介导的烟草的稳定遗传转化 | 第101页 |
1.8 转基因后代植株的PCR检测 | 第101-102页 |
1.9 GUS报告基因的定性检测 | 第102-104页 |
1.10 烟草胚珠的外源激素诱导处理 | 第104-105页 |
1.11 基因枪介导的融合载体在植物组织中的瞬时表达 | 第105-106页 |
2 结果与分析 | 第106-118页 |
2.1 GhRab11d3在伸长期纤维中优势表达 | 第106-107页 |
2.2 GhRab11d3启动子的克隆及序列分析 | 第107-110页 |
2.3 GhRab11d3启动子各缺失载体对烟草的遗传转化以及转基因后代纯系植株的获得 | 第110-111页 |
2.4 pGhRab11d3在烟草各组织器官中的功能分析 | 第111-112页 |
2.5 pGhRab11d3的546 bp大小对于驱动GUS报告基因在烟草各组织器官中的表达是必须的 | 第112-115页 |
2.6 pGhRab11d3可以被GA、IAA和6-BA所诱导,却不能被ABA所诱导 | 第115-116页 |
2.7 pGhRab11d3在纤维发育中的功能 | 第116-118页 |
3 讨论 | 第118-121页 |
3.1 GhRab11d3启动子受多种激素诱导调控 | 第118-119页 |
3.2 AGL15和MYB顺式作用元件可能是GhRab11d3启动子的核心调控元件 | 第119页 |
3.3 GhRab11d3启动子可以作为改良棉花纤维品质和增强激素应答的重要工具 | 第119-121页 |
全文结论 | 第121-123页 |
创新点 | 第123-125页 |
参考文献 | 第125-137页 |
附录 | 第137-139页 |
致谢 | 第139-141页 |
发表论文 | 第141页 |