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棉铃虫对Cry2Ab毒素抗性风险评估及抗性机理研究

摘要第7-11页
ABSTRACT第11-14页
第一章 文献综述第15-53页
    1 棉铃虫防治及全球转基因棉花发展现状第15-22页
        1.1 棉铃虫的危害及化学防治第15页
        1.2 转基因棉花的应用及现状第15-18页
        1.3 澳大利亚转基因棉花发展及抗性现状第18-19页
        1.4 美国转基因棉花发展及抗性现状第19-20页
        1.5 印度转基因棉花发展及抗性现状第20-21页
        1.6 我国转基因棉现状及思考第21-22页
    2 转Bt作物抗性治理策略的发展第22-29页
        2.1 高剂量/庇护所策略第22-23页
        2.2 基因叠加策略第23-27页
        2.3 毒素结构改良第27-29页
        2.4 Bt作物与RNAi协同作用第29页
    3 Bt毒素研究现状及应用第29-39页
        3.1 Bt毒素研究现状第29-31页
        3.2 Cry毒素的结构和功能第31-34页
        3.3 Cry毒素的作用机制第34-39页
        3.4 Bt毒素在转基因作物中的应用第39页
    4 昆虫对Bt毒素抗性研究现状第39-49页
        4.1 昆虫Bt毒素抗性机理第39-43页
        4.2 抗性检测方法第43-46页
        4.3 Bt作物田间抗性第46-49页
    5 本研究的目的及意义第49-53页
第二章 棉铃虫田间种群Cry2Ab毒素的敏感性调查第53-65页
    1 材料与方法第54-56页
        1.1 供试昆虫第54-55页
        1.2 Bt毒素第55页
        1.3 生物测定方法第55-56页
        1.4 数据处理第56页
    2 结果与分析第56-61页
        2.1 田间棉铃虫种群对Cry2Ab毒素的敏感性第56-60页
        2.2 诊断剂量法检测Cry2Ab原毒素田间抗性个体频率第60-61页
    3 讨论第61-65页
第三章 棉铃虫Cry2Ab抗性品系筛选及适合度研究第65-81页
    1 材料与方法第66-69页
        1.1 供试昆虫第66-67页
        1.2 Bt毒素第67页
        1.3 生物测定第67页
        1.4 抗性遗传方式第67-68页
        1.5 不同品系在转Bt棉和常规棉上的存活试验第68-69页
        1.6 Bt棉毒素表达水平第69页
        1.7 数据分析第69页
    2 结果与分析第69-76页
        2.1 Cry2Ab抗性的遗传方式第69-73页
        2.2 An2Ab品系交互抗性谱第73-74页
        2.3 棉铃虫在不同品种棉花上的存活率第74-75页
        2.4 转Bt棉花不同部位Cry1A和Cry2Ab毒素的表达量第75-76页
    3 讨论第76-81页
第四章 棉铃虫中肠Cry2A结合蛋白的鉴定及分析第81-99页
    1 材料与方法第83-91页
        1.1 供试昆虫第83-84页
        1.2 试验试剂及仪器第84页
        1.3 中肠Cry2A受体的分离及鉴定第84-88页
        1.4 相关受体基因克隆及表达量分析第88-91页
    2 结果与分析第91-96页
        2.1 棉铃虫中肠BBMV中Cry2A毒素结合蛋白的分离与鉴定第91-93页
        2.2 棉铃虫中肠Cry2A毒素受体与An2Ab品系相关抗性的关系第93-96页
    3 讨论第96-99页
第五章 棉铃虫Cry2Ab抗性相关基因的定位及筛选第99-123页
    1 材料与方法第101-106页
        1.1 供试昆虫第101页
        1.2 试验试剂第101-102页
        1.3 所用相关引物第102页
        1.4 集群分离分析法定位Cry2Ab抗性QTL第102-103页
        1.5 转录组测序第103页
        1.6 相关信号通路抑制剂生物测定第103页
        1.7 CRISPR/dCas9干扰技术第103-106页
    2 结果与分析第106-118页
        2.1 Cry2Ab抗性相关基因的定位第106-107页
        2.2 利用SNP标记验证Cry2Ab抗性相关基因位置第107-109页
        2.3 棉铃虫转录组测序结果分析第109-111页
        2.4 抗性连锁区域相关基因的验证第111-114页
        2.5 信号通路抑制剂对Cry2Ab毒素毒力的影响第114-117页
        2.6 Ral与抗性的关系第117-118页
    3 讨论第118-123页
        3.1 QTL定位及在Bt抗性机制探索中的应用第118-119页
        3.2 Ras相关蛋白及在生物体内的功能第119-120页
        3.3 利用CRISPR/Cas9技术降低特定基因表达量第120-123页
全文总结第123-125页
参考文献第125-145页
附录第145-149页
攻读博士学位期间发表的论文第149-151页
致谢第151页

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