| 摘要 | 第8-12页 |
| ABSTRACT | 第12-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-43页 |
| 1 昆虫抗药性分子机制研究 | 第17-21页 |
| 1.1 靶标抗性 | 第17-18页 |
| 1.2 代谢抗性 | 第18-21页 |
| 1.2.1 P450介导的抗药性 | 第19页 |
| 1.2.2 羚酸酯酶介导的抗药性 | 第19-20页 |
| 1.2.3 GST介导的抗药性 | 第20-21页 |
| 2 P450酶系 | 第21-33页 |
| 2.1 细胞色素P450酶 | 第21-27页 |
| 2.1.1 P450的蛋白结构 | 第23-24页 |
| 2.1.2 P450的分类与功能 | 第24-25页 |
| 2.1.3 昆虫基因组中P450的数量 | 第25-26页 |
| 2.1.4 昆虫P450的进化 | 第26页 |
| 2.1.5 P450基因亚家族扩张 | 第26页 |
| 2.1.6 P450基因簇 | 第26-27页 |
| 2.1.7 P450同源基因 | 第27页 |
| 2.2 NADPH-细胞色素P450还原酶 | 第27-31页 |
| 2.2.1 P450与P450还原酶相互作用 | 第30页 |
| 2.2.2 P450还原酶功能 | 第30-31页 |
| 2.3 细胞色素b5 | 第31-33页 |
| 2.3.1 细胞色素b5的特点 | 第31-32页 |
| 2.3.2 细胞色素b5的功能 | 第32-33页 |
| 3 P450在昆虫抗药性中的作用 | 第33-37页 |
| 3.1 组成型过量表达与害虫抗药性 | 第34-36页 |
| 3.2 诱导与害虫抗药性 | 第36-37页 |
| 3.3 编码序列突变与害虫抗药性 | 第37页 |
| 4 稻飞虱的防治及其抗药性 | 第37-40页 |
| 4.1 褐飞虱 | 第38页 |
| 4.2 白背飞虱 | 第38-39页 |
| 4.3 灰飞虱 | 第39-40页 |
| 5 研究目的与意义 | 第40-43页 |
| 第二章 吡虫啉对褐飞虱P450基因的诱导表达分析 | 第43-55页 |
| 1 材料与方法 | 第44-48页 |
| 1.1 供试虫源 | 第44页 |
| 1.2 所用试剂 | 第44页 |
| 1.3 生物测定和增效实验 | 第44页 |
| 1.4 褐飞虱RNA提取 | 第44-45页 |
| 1.5 实时荧光定量PCR cDNA合成 | 第45-46页 |
| 1.6 实时荧光定量PCR检测 | 第46-48页 |
| 1.7 统计分析 | 第48页 |
| 2 结果 | 第48-52页 |
| 2.1 生物测定和增效实验 | 第48-49页 |
| 2.2 吡虫琳诱导敏感品系P450表达 | 第49页 |
| 2.3 吡虫啉诱导田间种群P450表达 | 第49-52页 |
| 3 讨论 | 第52-55页 |
| 第三章 多个P450基因共同介导褐飞虱对吡虫啉的代谢抗性 | 第55-75页 |
| 1 材料与方法 | 第56-65页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第56页 |
| 1.2 所用试剂 | 第56页 |
| 1.3 生物测定和增效实验 | 第56-57页 |
| 1.4 褐飞虱RNA提取 | 第57页 |
| 1.5 cDNA合成 | 第57-58页 |
| 1.6 目的基因体外表达载体构建 | 第58-62页 |
| 1.7 目的基因体外表达和膜蛋白的提取 | 第62-63页 |
| 1.8 重组表达P450对吡虫啉的代谢及RP-HPLC检测 | 第63-64页 |
| 1.9 RNA干扰 | 第64页 |
| 1.10 实时荧光定量PCR | 第64-65页 |
| 1.11 统计分析 | 第65页 |
| 2 结果 | 第65-72页 |
| 2.1 生物测定与增效实验 | 第65-66页 |
| 2.2 G25和S25品系P450基因表达量差异 | 第66页 |
| 2.3 RNA干扰后褐飞虱对吡虫啉敏感性变化 | 第66页 |
| 2.4 不同P450基因在抗药性发展过程中的作用 | 第66-69页 |
| 2.5 检测连续25代筛选褐飞虱中4个P450基因表达量 | 第69-72页 |
| 3 讨论 | 第72-75页 |
| 第四章 两种新烟碱类杀虫剂对褐飞虱和白背飞虱P450基因诱导表达差异 | 第75-89页 |
| 1 材料与方法 | 第76-81页 |
| 1.1 供试虫源 | 第76页 |
| 1.2 所用试剂 | 第76页 |
| 1.3 生物测定 | 第76-77页 |
| 1.4 稻飞虱RNA提取 | 第77页 |
| 1.5 转录组测序 | 第77-78页 |
| 1.6 基因鉴定和同源性分析 | 第78页 |
| 1.7 cDNA合成 | 第78-79页 |
| 1.8 实时荧光定量PCR | 第79-81页 |
| 1.9 统计分析 | 第81页 |
| 2 结果与分析 | 第81-82页 |
| 2.1 序列组装、基因同源性分布及功能注释 | 第81页 |
| 2.2 吡虫琳和NMI诱导白背飞虱P450表达差异 | 第81-82页 |
| 2.3 NMI诱导褐飞虱和白背飞虱P450表达差异 | 第82页 |
| 2.4 不同剂量吡虫啉诱导褐飞虱P450表达差异 | 第82页 |
| 3 讨论 | 第82-89页 |
| 第五章 吡虫啉和吡蚜酮在褐飞虱中的交互抗性研究 | 第89-109页 |
| 1 材料与方法 | 第90-100页 |
| 1.1 供试虫源 | 第90页 |
| 1.2 主要试剂 | 第90页 |
| 1.3 生物测定和增效实验 | 第90页 |
| 1.4 褐飞虱RNA提取 | 第90-91页 |
| 1.5 cDNA合成 | 第91-92页 |
| 1.6 目的基因体外表达载体构建 | 第92-96页 |
| 1.7 目的基因体外表达和膜蛋白的提取 | 第96-97页 |
| 1.8 重组表达P450对吡虫啉的代谢及RP-HPLC检测 | 第97页 |
| 1.9 RNA干扰 | 第97-98页 |
| 1.10 实时荧光定量PCR | 第98-100页 |
| 1.11 统计分析 | 第100页 |
| 2 结果 | 第100-105页 |
| 2.1 生物测定 | 第100页 |
| 2.2 增效实验 | 第100页 |
| 2.3 RNA干扰 | 第100-101页 |
| 2.4 代谢 | 第101-105页 |
| 3 讨论 | 第105-109页 |
| 全文总结 | 第109-111页 |
| 参考文献 | 第111-127页 |
| 附录Ⅰ | 第127-134页 |
| 附录Ⅱ 攻读学位期间发表的论文 | 第134-135页 |
| 附录Ⅲ 攻读学位期间获得的奖励 | 第135-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
