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Komagataeibacter europaeus ACCC10220的变异与控制

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
1 引言第11-26页
    1.1 概述第11-12页
    1.2 BC的合成与调控第12-17页
        1.2.1 BC合成的途径及关键酶第12-13页
        1.2.2 BC合成的调控第13-17页
    1.3 产BC菌的变异及控制第17-22页
        1.3.1 G.sp.变异的原因第17-18页
        1.3.2 Cel~-菌株的变化第18-20页
        1.3.3 G.sp.变异的控制第20-22页
    1.4 水溶性多糖对BC的产量及结构影响第22-24页
        1.4.1 水溶性多糖对BC的产量影响第22-23页
        1.4.2 水溶性多糖对BC的结构影响第23-24页
    1.5 本文研究的意义和主要内容第24-26页
2 材料与方法第26-46页
    2.1 菌种、培养基、试剂及设备第26-31页
        2.1.1 菌种及培养基第26页
        2.1.2 试剂与材料第26-28页
        2.1.3 设备第28-31页
    2.2 实验方法第31-40页
        2.2.1 摇瓶培养中K.europaeus的变异影响因素第31页
        2.2.2 静态培养中K.europaeus的变异影响因素第31-32页
        2.2.3 筛网对K.europaeus变异的控制第32-33页
        2.2.4 水溶性多糖对K.europaeus变异的控制第33-34页
        2.2.5 动态方式制备无变异菌的K.europaeus种子液第34-35页
        2.2.6 筛网气升式发酵罐制备无变异菌的K.europaeus种子液第35-36页
        2.2.7 K.europaeus变异菌的特征第36-40页
    2.3 分析方法第40-46页
        2.3.1 K.europaeus变异菌占有率的测定第40页
        2.3.2 BC的除杂与干燥第40页
        2.3.3 水溶性多糖(water-soluble polysaccharides,WSP)的提取、除杂第40页
        2.3.4 WSP的傅里叶红外光谱(Fourier infrared spectrum,FT-IR)鉴定第40-41页
        2.3.5 静息细胞产BC速率测定第41-42页
        2.3.6 K.europaeus发酵液中纤维素酶提取及活力测定第42-43页
        2.3.7 K.europaeus种子液的静态产BC能力评估第43页
        2.3.8 纤维素结构测定第43-44页
        2.3.9 多糖中酸性多糖含量测定第44页
        2.3.10 多糖的分子量测定第44-45页
        2.3.11 图形及数据处理第45-46页
3 结果与分析第46-111页
    3.1 K.europaeus摇瓶培养中的变异影响因素第46-53页
        3.1.1 K.europaeus摇瓶培养中的变异现象第46-48页
        3.1.2 培养基装量对K.europaeus摇瓶培养变异及产BC的影响第48-49页
        3.1.3 培养基装量对K.europaeus摇瓶培养产BC的结构影响第49-51页
        3.1.4 AE培养基成分对K.europaeus动态培养变异的影响第51-52页
        3.1.5 本节小结第52-53页
    3.2 K.europaeus静态培养中的变异影响因素第53-58页
        3.2.1 培养容器对K.europaeus静态培养变异的影响第53-54页
        3.2.2 培养基装量对K.europaeus静态培养变异的影响第54页
        3.2.3 培养时间对K.europaeus静态培养变异的影响第54-56页
        3.2.4 培养基种类对K.europaeus静态培养变异的影响第56页
        3.2.5 AE培养基成分对K.europaeus静态培养变异的影响第56-57页
        3.2.6 本节小结第57-58页
    3.3 筛网对K.europaeus变异的控制第58-68页
        3.3.1 筛网对K.europaeus静态培养中变异的控制及BC产量影响第58-59页
        3.3.2 筛网对K.europaeus动态培养中变异的控制及BC和WSP_(M1)产量影响第59-63页
        3.3.3 筛网对K.europaeus动态培养中产BC的结构的影响第63-67页
        3.3.4 本节小结第67-68页
    3.4 水溶性多糖对K.europaeus变异的控制第68-83页
        3.4.1 水溶性多糖对K.europaeus静态培养下变异的控制及产BC的影响第68-71页
        3.4.2 水溶性多糖对K.europaeus动态培养下变异的控制及产BC的影响第71-72页
        3.4.3 水溶性多糖对K.europaeus动态培养下变异的控制的原因探讨第72-82页
        3.4.4 本节小结第82-83页
    3.5 动态方式制备无变异菌的K.europaeus种子液第83-92页
        3.5.1 琼脂、CMC-Na和纤维素酶对K.europaeus动态培养中的控制第83-84页
        3.5.2 CMC-Na或纤维素酶对K.europaeus种子液中游离菌体生物量的影响第84-87页
        3.5.3 添加CMC-Na或纤维素酶的K.europaeus种子液生产BC能力第87-89页
        3.5.4 添加CMC-Na的K.europaeus种子液静态制备BC的结构第89-91页
        3.5.5 本节小结第91-92页
    3.6 筛网气升式发酵罐制备无变异菌的K.europaeus种子液第92-96页
        3.6.1 纤维素酶对K.europaeus静态产BC量的影响第92-93页
        3.6.2 纤维素酶对K.europaeus气升式培养制备种子液中生物量的影响及种子液的静态产BC能力评价第93-95页
        3.6.3 葡萄糖浓度和培养液pH控制对K.europaeus气升式培养制备种子液中生物量的影响第95-96页
        3.6.4 本节小结第96页
    3.7 K.europaeus变异菌的特征第96-111页
        3.7.1 菌落及菌体形态特征第97-99页
        3.7.2 生理生化特征第99-101页
        3.7.3 产物特征第101-104页
        3.7.4 DNA分子特征第104-106页
        3.7.5 胞内蛋白组学特征第106-109页
        3.7.6 本节小结第109-111页
4 讨论第111-125页
    4.1 K.europaeus摇瓶培养中的变异第111-113页
        4.1.1 培养基装量对K.europaeus摇瓶培养中变异的影响第111-112页
        4.1.2 培养基成分对K.europaeus摇瓶培养中变异的影响第112-113页
    4.2 K.europaeus静态培养中的变异第113-119页
        4.2.1 K.europaeus静态培养中的变异是低氧胁迫或低氧对变异菌的正向选择?第113-115页
        4.2.2 K.europaeus静态培养中的变异与细胞下沉和上浮有关?第115-118页
        4.2.3 培养基成分对K. europaeu静态培养中变异的影响第118-119页
    4.3 筛网及水溶性多糖对K. europaeu动态培养中的变异的控制第119-123页
        4.3.1 筛网对K. europaeu动态培养中的变异的控制第120页
        4.3.2 水溶性多糖对Keuropaeu动态培养中的变异的控制第120-123页
    4.4 BC胁迫导致K. europaeu细胞的分子变化第123-125页
5 结论第125-127页
参考文献第127-138页
附录第138-154页
    1 K.europaeus ACCC 10220 W、M1和M2菌株的16S RNA和rpoB序列及鉴定材料第138-141页
    2 K.europaeus ACCC 10220 W、M1和M2菌株与纤维素合成有关的酶的基因(葡萄糖磷酸变位酶、UDPG-焦磷酸化酶、纤维素合成酶)的PCR扩增产物的凝胶图第141-144页
    3 K.europaeusACCC 10220 W、M1和M2菌株与纤维素合成有关的酶(葡萄糖磷酸变位酶、UDPG-葡萄糖焦磷酸化酶、纤维素合成酶)的基因的测序结果第144-153页
        3.1 葡萄糖磷酸变位酶基因第144-147页
        3.2 UDPG焦磷酸化酶基因第147-149页
        3.3 Ces基因(包含cmcax、ccpax和bglxA)第149-151页
        3.4 bscD基因的Bioedit比较结果第151-152页
        3.5 ccp基因的Bioedit比较结果第152页
        3.6 bglxA基因的Bioedit比较结果第152-153页
    4 攻读博士学位期间发表的与本论文相关的文章及授权专利第153页
    5 攻读博士学位期间主持和参加的与本论文有关的课题第153-154页
致谢第154页

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