摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 引言 | 第11-26页 |
1.1 概述 | 第11-12页 |
1.2 BC的合成与调控 | 第12-17页 |
1.2.1 BC合成的途径及关键酶 | 第12-13页 |
1.2.2 BC合成的调控 | 第13-17页 |
1.3 产BC菌的变异及控制 | 第17-22页 |
1.3.1 G.sp.变异的原因 | 第17-18页 |
1.3.2 Cel~-菌株的变化 | 第18-20页 |
1.3.3 G.sp.变异的控制 | 第20-22页 |
1.4 水溶性多糖对BC的产量及结构影响 | 第22-24页 |
1.4.1 水溶性多糖对BC的产量影响 | 第22-23页 |
1.4.2 水溶性多糖对BC的结构影响 | 第23-24页 |
1.5 本文研究的意义和主要内容 | 第24-26页 |
2 材料与方法 | 第26-46页 |
2.1 菌种、培养基、试剂及设备 | 第26-31页 |
2.1.1 菌种及培养基 | 第26页 |
2.1.2 试剂与材料 | 第26-28页 |
2.1.3 设备 | 第28-31页 |
2.2 实验方法 | 第31-40页 |
2.2.1 摇瓶培养中K.europaeus的变异影响因素 | 第31页 |
2.2.2 静态培养中K.europaeus的变异影响因素 | 第31-32页 |
2.2.3 筛网对K.europaeus变异的控制 | 第32-33页 |
2.2.4 水溶性多糖对K.europaeus变异的控制 | 第33-34页 |
2.2.5 动态方式制备无变异菌的K.europaeus种子液 | 第34-35页 |
2.2.6 筛网气升式发酵罐制备无变异菌的K.europaeus种子液 | 第35-36页 |
2.2.7 K.europaeus变异菌的特征 | 第36-40页 |
2.3 分析方法 | 第40-46页 |
2.3.1 K.europaeus变异菌占有率的测定 | 第40页 |
2.3.2 BC的除杂与干燥 | 第40页 |
2.3.3 水溶性多糖(water-soluble polysaccharides,WSP)的提取、除杂 | 第40页 |
2.3.4 WSP的傅里叶红外光谱(Fourier infrared spectrum,FT-IR)鉴定 | 第40-41页 |
2.3.5 静息细胞产BC速率测定 | 第41-42页 |
2.3.6 K.europaeus发酵液中纤维素酶提取及活力测定 | 第42-43页 |
2.3.7 K.europaeus种子液的静态产BC能力评估 | 第43页 |
2.3.8 纤维素结构测定 | 第43-44页 |
2.3.9 多糖中酸性多糖含量测定 | 第44页 |
2.3.10 多糖的分子量测定 | 第44-45页 |
2.3.11 图形及数据处理 | 第45-46页 |
3 结果与分析 | 第46-111页 |
3.1 K.europaeus摇瓶培养中的变异影响因素 | 第46-53页 |
3.1.1 K.europaeus摇瓶培养中的变异现象 | 第46-48页 |
3.1.2 培养基装量对K.europaeus摇瓶培养变异及产BC的影响 | 第48-49页 |
3.1.3 培养基装量对K.europaeus摇瓶培养产BC的结构影响 | 第49-51页 |
3.1.4 AE培养基成分对K.europaeus动态培养变异的影响 | 第51-52页 |
3.1.5 本节小结 | 第52-53页 |
3.2 K.europaeus静态培养中的变异影响因素 | 第53-58页 |
3.2.1 培养容器对K.europaeus静态培养变异的影响 | 第53-54页 |
3.2.2 培养基装量对K.europaeus静态培养变异的影响 | 第54页 |
3.2.3 培养时间对K.europaeus静态培养变异的影响 | 第54-56页 |
3.2.4 培养基种类对K.europaeus静态培养变异的影响 | 第56页 |
3.2.5 AE培养基成分对K.europaeus静态培养变异的影响 | 第56-57页 |
3.2.6 本节小结 | 第57-58页 |
3.3 筛网对K.europaeus变异的控制 | 第58-68页 |
3.3.1 筛网对K.europaeus静态培养中变异的控制及BC产量影响 | 第58-59页 |
3.3.2 筛网对K.europaeus动态培养中变异的控制及BC和WSP_(M1)产量影响 | 第59-63页 |
3.3.3 筛网对K.europaeus动态培养中产BC的结构的影响 | 第63-67页 |
3.3.4 本节小结 | 第67-68页 |
3.4 水溶性多糖对K.europaeus变异的控制 | 第68-83页 |
3.4.1 水溶性多糖对K.europaeus静态培养下变异的控制及产BC的影响 | 第68-71页 |
3.4.2 水溶性多糖对K.europaeus动态培养下变异的控制及产BC的影响 | 第71-72页 |
3.4.3 水溶性多糖对K.europaeus动态培养下变异的控制的原因探讨 | 第72-82页 |
3.4.4 本节小结 | 第82-83页 |
3.5 动态方式制备无变异菌的K.europaeus种子液 | 第83-92页 |
3.5.1 琼脂、CMC-Na和纤维素酶对K.europaeus动态培养中的控制 | 第83-84页 |
3.5.2 CMC-Na或纤维素酶对K.europaeus种子液中游离菌体生物量的影响 | 第84-87页 |
3.5.3 添加CMC-Na或纤维素酶的K.europaeus种子液生产BC能力 | 第87-89页 |
3.5.4 添加CMC-Na的K.europaeus种子液静态制备BC的结构 | 第89-91页 |
3.5.5 本节小结 | 第91-92页 |
3.6 筛网气升式发酵罐制备无变异菌的K.europaeus种子液 | 第92-96页 |
3.6.1 纤维素酶对K.europaeus静态产BC量的影响 | 第92-93页 |
3.6.2 纤维素酶对K.europaeus气升式培养制备种子液中生物量的影响及种子液的静态产BC能力评价 | 第93-95页 |
3.6.3 葡萄糖浓度和培养液pH控制对K.europaeus气升式培养制备种子液中生物量的影响 | 第95-96页 |
3.6.4 本节小结 | 第96页 |
3.7 K.europaeus变异菌的特征 | 第96-111页 |
3.7.1 菌落及菌体形态特征 | 第97-99页 |
3.7.2 生理生化特征 | 第99-101页 |
3.7.3 产物特征 | 第101-104页 |
3.7.4 DNA分子特征 | 第104-106页 |
3.7.5 胞内蛋白组学特征 | 第106-109页 |
3.7.6 本节小结 | 第109-111页 |
4 讨论 | 第111-125页 |
4.1 K.europaeus摇瓶培养中的变异 | 第111-113页 |
4.1.1 培养基装量对K.europaeus摇瓶培养中变异的影响 | 第111-112页 |
4.1.2 培养基成分对K.europaeus摇瓶培养中变异的影响 | 第112-113页 |
4.2 K.europaeus静态培养中的变异 | 第113-119页 |
4.2.1 K.europaeus静态培养中的变异是低氧胁迫或低氧对变异菌的正向选择? | 第113-115页 |
4.2.2 K.europaeus静态培养中的变异与细胞下沉和上浮有关? | 第115-118页 |
4.2.3 培养基成分对K. europaeu静态培养中变异的影响 | 第118-119页 |
4.3 筛网及水溶性多糖对K. europaeu动态培养中的变异的控制 | 第119-123页 |
4.3.1 筛网对K. europaeu动态培养中的变异的控制 | 第120页 |
4.3.2 水溶性多糖对Keuropaeu动态培养中的变异的控制 | 第120-123页 |
4.4 BC胁迫导致K. europaeu细胞的分子变化 | 第123-125页 |
5 结论 | 第125-127页 |
参考文献 | 第127-138页 |
附录 | 第138-154页 |
1 K.europaeus ACCC 10220 W、M1和M2菌株的16S RNA和rpoB序列及鉴定材料 | 第138-141页 |
2 K.europaeus ACCC 10220 W、M1和M2菌株与纤维素合成有关的酶的基因(葡萄糖磷酸变位酶、UDPG-焦磷酸化酶、纤维素合成酶)的PCR扩增产物的凝胶图 | 第141-144页 |
3 K.europaeusACCC 10220 W、M1和M2菌株与纤维素合成有关的酶(葡萄糖磷酸变位酶、UDPG-葡萄糖焦磷酸化酶、纤维素合成酶)的基因的测序结果 | 第144-153页 |
3.1 葡萄糖磷酸变位酶基因 | 第144-147页 |
3.2 UDPG焦磷酸化酶基因 | 第147-149页 |
3.3 Ces基因(包含cmcax、ccpax和bglxA) | 第149-151页 |
3.4 bscD基因的Bioedit比较结果 | 第151-152页 |
3.5 ccp基因的Bioedit比较结果 | 第152页 |
3.6 bglxA基因的Bioedit比较结果 | 第152-153页 |
4 攻读博士学位期间发表的与本论文相关的文章及授权专利 | 第153页 |
5 攻读博士学位期间主持和参加的与本论文有关的课题 | 第153-154页 |
致谢 | 第154页 |